Rola rybosomu w procesie syntezy białek 395 do określenia dokładnego położenia białek rybosomowych w rybosomie E. coli. Na przykład, w celu określenia położenia białka S5 różne aminokwasy tego białka znakowano Fe(II), a następnie indukowano wytwarzanie rodników hydroksylowych w rekonstytuowanych rybosomach E. coli. Analiza położenia miejsc rozerwania wiązań w 16S rRNA umożliwiła wyciągnięcie wniosków dotyczących topologii rRNA w sąsiedztwie białka S5 (rys. 13.12). W ostatnich latach zaczęto coraz częściej stosować krystalografię rentgenowską (Metody badań 11.1), dzięki której otrzymano ekscytujący obraz struktury rybosomu. Analiza olbrzymiej ilości danych – otrzymanych po dyfrakcji promieni rentgenowskich na kryształach tak dużych cząstek jak rybosomy – jest wielkim wyzwaniem, szczególnie na poziomie potrzebnym do otrzymania struktury tak informatywnej, by można na jej podstawie opisać mechanizm działania rybosomu. Badacze sprostali temu wyzwaniu – wydedukowano strukturę białek rybosomowych związanych z odpowiednimi fragmentami rRNA, dużej i małej podjednostki oraz całego rybosomu bakteryjnego połączonego z mRNA i tRNA. Eksplozja informacji w ostatnim czasie nie tylko doprowadziła do odkrycia struktury rybosomu (rys. 13.13), ale również wniosła istotny wkład w nasze zrozumienie procesu translacji. 13.2.2 Inicjacja translacji Mimo że struktura rybosomu bakteryjnego jest podobna do eukariotycznego, to w procesie translacji występują różnice między tymi dwoma grupami organizmów. Najważniejsze z nich dotyczą pierwszego etapu translacji, w czasie którego następuje składanie rybosomu na mRNA, powyżej kodonu inicjacyjnego. 5' 3' Rys. 13.12 Rejony 16S rRNA E. coli, które bezpośrednio oddziałują z ryboso­ mowym białkiem S5. Rejony oddziaływań zaznaczono w kolorze czerwonym. Położenie tych miejsc dla pojedynczego białka rybosomowego uzmysławia, do jakiego stopnia drugorzędowa struktura rRNA jest zwinięta w obrębie trójwymiarowej struktury rybosomu Rys. 13.13. Rybosom bakteryjny. Na rysunku pokazano rybosom Thermus thermophilus. Mała podjednostka jest na górze – 16S rRNA zaznaczono na niebiesko, a białka rybosomowe małej podjednostki – na ciemnoniebiesko. rRNA w dużej podjednostce – na szaro, białka dużej podjednostki – na fioletowo. Na złoto zaznaczono miejsce A (sekcja 13.2.3) – miejsce, w które wchodzi aminoacylowany tRNA w czasie syntezy białka. Miejsce A – podobnie jak większość obszaru, w którym zachodzi synteza białka – jest położone w szczelinie między dwoma podjednostkami. Przedruk za zgodą z: Trends Biochem. Sci., 26, Mathews, Pe’ery. The machine that decodes the Genome. 585–587, 2001, Elsevier E:\Ksiazki\Andrzej\Rob_michal\Genomy\prod\genomy.pdf strona: 395 Created: Graffi Micha@ Pawelec