Szybki test na wykrywanie przeciwciał FIV i FeLV w krwi pełnej, surowicy, lub w plazmie. Jeżeli w próbce nie ma patogenów, znakowane złotem przeciwciała nie mogą się przyłączyć do unieruchomionych przeciwciał w obszarze linii testowej i linia testowa się nie ukazuje, a wynik testu jest ujemny. Instrukcja obsługi Kasetka testowa KRUUSE FIV/FeLV Quick jest stosowany do wykrywania swoistego antygenu wirusa białaczki kotów (FeLV ) oraz przeciwciał przeciw wirusowi nabytego braku odporności kotów (FIV ) w krwi pełnej, surowicy, lub w plazmie krwi kota. Paski testowe znajdują się wewnątrz plastikowej obudowy. Z prawej strony umieszczone są oczka wlewu próbki. Pole reakcyjne znajduje się pośrodku kasetki testowej. W polu reakcyjnym znajduje się obszar testowy i obszar kontrolny. Oznakowanie obok pola reakcyjnego wskazuje odpowiednio obydwa te obszary – kontrolny (C) i testowy (T). KRUUSE FIV/FeLV Quick FIV i FeLV KRUUSE FIV/FeLV Quick jest używany do wykrywania swoistego antygenu wirusa białaczki kotów (FeLV) oraz przeciwciał wirusa nabytego braku odporności kotów (FIV) w kociej krwi pełnej, surowicy, lub w plazmie. Zarówno wirus białaczki kotów (FeLV), jak i wirus nabytego braku odporności kotów (FIV) są retrowirusami i zaliczają się do najpowszechniejszych chorób zakaźnych kotów. Zespół nabytego niedoboru immunologicznego kotów jest powodowany zakażeniem wirusem nabytego braku odporności kotów (FIV, Feline Immunodeficiency Virus). Wirus nabytego braku odporności kotów (FIV) należy do rodzaju lentiwirus z rodziny retrowirusów. FIV występuje nas całym świecie w różnych serotypach (A, B, C, D, E). Podobnie jak wszystkie retrowirusy, FIV wykorzystuje cykl replikacji podobny do cytolitycznych wirusów RNA. Wytwarzają one enzym, który pozwala im na umieszczenie kopii własnego materiału genetycznego w zainfekowanych przez siebie komórkach. Jak prawie wszystkie lentiwirusy, także FIV występuje głównie w postaci związanej z komórką i może przetrwać w środowisku przez bardzo krótki okres czasu (sekundy). FIV jest głównie przenoszony poprzez rany gryzione. Wiele chorób powodowanych przez FIV i FeLV posiada podobne symptomy. Pierwszymi symptomami jest generalnie utrata wagi, chroniczna biegunka i ospałość. Obydwa wirusy mogą być przenoszone przez lizanie, gryzienie, oraz zjadanie wydzielin i odchodów. W odróżnieniu od FIV, FeLV dotyka przyjazne, towarzyskie, puszczane na zewnątrz koty i w domach z wieloma kotami zakażenie może być endemiczne. Dla rozróżnienia tych dwóch zakażeń wskazany jest test kombinowany. KRUUSE FIV/FeLV Quick jest używany do równoległego wykrywania antygenu FeLV i przeciwciał FIV w krwi pełnej, osoczu, lub w surowicy kotów. Kot z klinicznymi objawami zakażenia FIV, lub FeLV najszybciej, jak tylko możliwe powinien zostać zbadany kombinowanym testem KRUUSE FIV/FeLV Quick, dla uniknięcia rozprzestrzeniania się choroby i aby wdrożyć natychmiastowe leczenie. Testy na FeLV i FIV należy również wykonywać dla każdego nowego kota w populacji. KRUUSE FIV/FeLV Quick jest również stosowany w badaniach przesiewowych, oraz jest narzędziem sprawdzania statusu immunologicznego przed szczepieniem. Ważna uwaga: W fazie początkowej i końcowej (z uwagi na zapaść układu odpornościowego) infekcji FIV, wykrycie przeciwciał u kotów FIV-pozytywnych jest bardzo trudne, z uwagi na niski poziom przeciwciał. Ogólnie po ok. 2 do 4 tygodniach od zakażenia FIV, przeciwciała osiągają mierzalny poziom – i wtedy można wykonywać testy na przeciwciała, takie jak test KRUUSE FIV/FeLV Quick. Oczko wlewu próbki krwi Obszar testowy i kontrolny pola reakcyjnego Przechowywanie i Data przydatności KRUUSE FIV/FeLV Quick muszą być przechowywane w temperaturze pokojowej (2°C do 30°C) OSTRZEŻENIA • • • • • • • • • • • Wyłącznie do użytku weterynaryjnego i profesjonalnego Do jednorazowego użytku Użyć kasetkę w przeciągu 10 minut od otwarcia torebki Nie podawać roztworu próbki na pole reakcyjne Unikać reakcji krzyżowych stosując nową probówkę dla każdej próbki Nie dotykać pola reakcyjnego Stosować wyłącznie oryginalny bufor, dostarczany wraz z zestawem Materiał próbki może być zakaźny. Zachować ostrożność przy utylizacji Nie używać kasetek po upływie daty przydatności wskazanej na torebce Nie używać testu z uszkodzonym opakowaniem Po upływie wskazanego czasu odczytu traktować wyniki jako nieważne I. Zawartość: • • • • 5 kasetek testowych z pipetą i podkładką osuszającą 1 plastikowy woreczek z 5 probówkami na próbki 1 butelka 2.5 ml odczynnika buforującego 1 instrukcja obsługi II. Dodatkowy niezbędny sprzęt • Timer Kontrola jakości Testowanie KRUUSE FIV/FeLV Quick jest testem immunologicznym bocznego przepływu typu Sandwich. Do detekcji patogenów wykorzystuje on strukturę „kanapki”, w której antygeny próbki znajdują się pomiędzy przeciwciałami znakowanymi złotem i unieruchomionymi przeciwciałami w strefie testowej. Dla zapewnienia poprawności działania zestawu stosowane są zewnętrzne środki kontrolne w ramach Dobrej Praktyki Laboratoryjnej. Środki kontrolne powinny uwzględniać kontrolę wyniku ujemnego i wyniku dodatniego przy minimalnym stężeniu analitu. Stosując kontrolę słabego wyniku dodatniego można określić czy test nie był zakłócony, oraz czy dane stężenie analitu jest wykrywalne przy danej czułości systemu testowego. Przygotowanie próbki Próbka powinna być zbadana możliwie jak najszybciej po pobraniu. Gdy nie jest to możliwe, próbki krwi pełnej można przechowywać w temperaturze od 2°C do 8°C przez okres do 7 godzin. KRUUSE FIV/FeLV Quick służy do badania krwi pełnej, surowicy, lub osocza. Wyjaśnienie procesu przeprowadzania testu Paski testowe składają się z dwóch różnych komponentów. OSTROŻNIE: Próbki i inne materiały należy traktować jako materiały zakaźne. Po podaniu próbki do oczek wlewu, jest ona absorbowana przez podłoże absorpcyjne paska testowego. Płyn miesza się z oznakowanymi złotem przeciwciałami podłoża koniugacyjnego. Dzięki podciąganiu kapilarnemu płyn zaczyna migrować w górę paska testowego, przechodząc przez obszar linii testowej, a następnie przez obszar linii kontrolnej. Linia kontrola powinna się zawsze pokazać, wskazując na poprawność działania testu. Jeżeli próbka zawiera patogeny, na odpowiednim dla nich pasku pokaże się również linia testowa. Linia testowa powstaje w procesie tworzenia się kanapki pomiędzy znakowanymi złotem przeciwciałami z podłoża koniugacyjnego, antygenu z próbki i nieruchomymi przeciwciałami w obszarze linii testowej. www.kruuse.com labsolutions Ogólne uwagi odnośnie próbek krwi: Ocena testu • Wynik testu można odczytać 5-10 minut od jego rozpoczęcia. • • • Dla uniknięcia hemolizy oddzielić surowicę, lub osocze z krwi najszybciej jak jest to możliwe Krew heparynizowaną lub EDTA można stosować do oddzielenia osocza Stosować wyłącznie próbki czyste, nie zhemolizowane Stosowanie krwi pełnej może zmniejszyć czułość wyniku testu Wynik dodatni: Test jest dodatni, gdy w lewym polu reakcyjnym widoczna jest linia kontrolna (C) oraz linia testowa (T ). FeLV został wykryty w tym przypadku. Test powinien być wykonany natychmiast po pobraniu próbki. Nie pozostawiać przez dłuży czas próbek w temperaturze pokojowej. Próbki surowicy, lub osocza można przechowywać w 2-8° C do 3-ch dni. Dla długoterminowego przechowywania próbki należy trzymać poniżej -20°C. Nie zamrażać próbek krwi pełnej! Przed wykonaniem testu próbki muszą być doprowadzone do temperatury pokojowej. Próbki zamrożone muszą kompletnie odtajać i przed wykonaniem testu muszą być dokładnie wymieszane. Próbek nie wolno wielokrotnie zamrażać i odmrażać. Próbki przeznaczone do wysyłki muszą być pakowane zgodnie z obowiązującymi przepisami dotyczącymi przewozu czynników biologicznych. Procedura testowa dla surowicy i osocza 1. Pobrać od kota próbkę krwi i przygotować próbkę surowicy, lub osocza. Otworzyć torebkę; wyjąć pipetę i pobrać nią próbkę materiału. Wprowadzić pipetą do każdego oczka wlewu po jednej kropli surowicy, lub osocza. Odczekać kilka sekund, aż próbki całkowicie się wchłoną. 2. Otworzyć bufor i dodać do każdego oczka wlewu po 2 krople bufora. Nawet blada linia świadczy o dodatnim wyniku testu. Wynik ujemny: Test jest ujemny, gdy widoczna jest wyłącznie linia kontrolna (C). Nie widać linii testowych. Nie wykryto ani, ani FeLV ani FIV. Wynik nieważny: Test jest nieważny, gdy po jego wykonaniu nie widać linii kontrolnej. Oznacza to, że test mógł nie być poprawnie przeprowadzony, test mógł być przeterminowany, lub też, że po otwarciu torebki test był zbyt długo wyeksponowany na działanie zewnętrznego powietrza. Jeżeli to nastąpi, należy wykonać ponowny test. UWAGA: Wynik testu musi być odczytany w przeciągu 10 minut od rozpoczęcia testu. Po tym czasie test, oraz wyniki testu należy traktować jako nieważne. Jeżeli po upływie 2 minut płyn niezbyt dobrze migruje w górę paska, dodać do odpowiedniego oczka wlewu kolejną kroplę bufora. 3. Odczytać wyniki w ciągu 5-10 minut od rozpoczęcia testu. 1. Uwagi: Wynik testu należy zawsze oceniać łącznie z historią choroby, oraz w kontekście klinicznym. Wyniki testów uzyskane z próbek krwi pełnej i nie korelujące z obrazem klinicznym, należy powtórzyć z próbką osocza, lub surowicy. Wszystkie wątpliwe wyniki testów należy powtórzyć po ok. 2 tygodniach. 2. Utylizacja Zalecana jest bezpieczna utylizacja. Materiał próbek oraz kasetki powinny zostać zebrane do szczelnego plastikowego woreczka. Procedura testowa dla krwi pełnej 1. Pobrać od kota próbkę krwi. Otworzyć torebkę; wyjąć pipetę, pobrać nią próbkę materiału oraz wprowadzić pipetą do probówki 2 krople krwi pełnej. Otworzyć bufor i dodać do probówki 6 kropli bufora. 2. Zamknąć probówkę i łagodnie nią wstrząsnąć. Otworzyć ponownie probówkę i pobrać pipetą materiał próbki. Powoli wprowadzić pipetą po 2 krople materiału do każdego oczka wlewu próbki (wprowadzić do danego oczka pierwszą kroplę, odczekać kilka sekund, aż się ona wchłonie i wtedy dodać drugą kroplę). Charakterystyka sprawności testu Czułość i specyficzność w próbce surowicy Badanie Czułość – Specyficzność, 2010 KRUUSE FIV/FeLV Quick Jeżeli po upływie 2 minut płyn niezbyt dobrze migruje w górę paska, dodać do odpowiedniego oczka wlewu kolejną kroplę bufora. Czułość 93 % 96 % FeLV 92 % 96 % Literatura 1. 3. 4. 1. 2. Specyficzność FIV 2. 3. Odczytać wyniki w ciągu 5-10 minut od rozpoczęcia testu. Test immunoenzymatyczny 5. Anderson, R C., and R. M. May (ed.). 1982. Population biology of infectious diseases. Springer-Verlag KG, Berlin. Hosie, M. J., and 0. Jarrett. 1990. Serological responses of cats to feline immunode ficiency virus. AIDS 4:215-220. Kaaden O-R, Gedek B, Mahnel H, Mayr A: „Spezielle Virologie“ in: Medizinische Mikrobiologie, Infektions- und Seuchenlehre. Stuttgart 1993 Pedersen, N. C., E. W. Ho, M. L. Brown, and J. K. Yamamoto. 1987. Isolatio of a T-lymphotropic virus from domestic cats with an immunodeficiency-like syndrome. Science 235:790-793. Yamamoto, J. K., H. Hansen, E. W. Ho, T. Y. Morishita, T. Okuda, T. R. Saura, R. M. Nakamura, and N. C. Pedersen.1989. Epidemiologic and clinical aspects of FIV infection in cats from the continental U.S. and Canada and possible mode of transmission. J. Am. Vet. Med. Assoc. 194:213-220. Stosowane symbole Używać tylko jeden raz ∑ labsolutions Dokładnie zapoznać się z instrukcją obsługi Zawartość +30°C Temperatura przechowywania +4°C Numer partii Data przydatności