1 PepMV test serologiczny PepMV ImmunoStrip Test pozwala na szybką i łatwą identyfikację w warunkach polowych wirusa mozaiki pepino – PepMV (ang. Pepino mosaic potexvirus). Wykonanie testu nie wymaga żadnych urządzeń analitycznych. Wynik jest znany już po upływie kilkunastu minut. Rośliny gospodarze Wirus PepMV został opisany po raz pierwszy w Peru na roślinie pepino (Solanum muricatum), tj. warzywie z rodziny psiankowatych. W Polsce i Europie został wykryty na uprawach szklarniowych pomidora (Lycopersicon esculentum). Wirus poraża ok. 30 roślin z rodziny psiankowatych, m.in. pomidory, ziemniaki, oberżynę i tytoń. Wykryto go również w uprawach bazylii pospolitej. W Hiszpanii wykryto wirusa PepMV również u kilku gatunków chwastów, tj. Amaranthus, Chenopodium murale, Convolvulus arvensis, Echium creticum, Malva parviflora, Nicotiana glauca, Plantago afra, Rumex, Solanum nigrum oraz Sonchus oleraceus. Objawy zakażenia Zakażenie wirusem PepMV sprawia, że młode liście są jaśniejsze, wąskie i poskręcane, z bąblowatymi deformacjami. Liście wykazują chlorozę lub międzyżyłkową mozaikę, miotlasty lub pokrzywo podobny wierzchołek porażonej rośliny. Objawy zakażenia wirusem PepMV na owocach to jaśniejsze plamy i przebarwienia, dające efekt marmurkowatości lub plamistości. Zainfekowane rośliny wykształcają mniej zawiązków, a ich owoce są drobniejsze. Objawy są najbardziej widoczne w okresie późnego lata, jesieni i zimy. Sposoby rozprzestrzeniania Wirus PepMV jest przenoszony przez kontakt: zanieczyszczone narzędzia, ręce, odzież, bezpośredni kontakt roślin między sobą (szczepienia, sadzonki), jak również przez nasiona. Także trzmiele wykorzystywane jako zapylacze w uprawach pomidora mogą rozprzestrzeniać wirus PepMv. Novazym Polska ul. Żywokostowa 23, 61-680 Poznań. tel. +48 61 610 39 10 , fax. +48 61 610 39 11, e-mail: [email protected], www.novazym.com Copyright Novazym Polska 2008 2 PepMV test serologiczny Przygotowanie próbki: Próbka może być przygotowana z liścia lub korzenia rośliny. Fragment tkanki należy zawiesić w buforze ekstrakcyjnym zawartym w woreczku testowym w stosunku 1:20 w/v, co odpowiada 0,15 g tkanki. W przypadku braku możliwości zważenia próbki, należy pobrać taką ilość tkanki, która w przybliżeniu odpowiada wielkości orła na monecie 1 zł. Uwaga: Nie należy stosować większych próbek. Przy pobieraniu każdej próbki należy używać nowego jednorazowego skalpela lub innego sterylnego narzędzia. Wykonanie testu : 1. Ostrożnie odciąć górną część woreczka z buforem ekstrakcyjnym. 2. Umieścić próbkę w woreczku, a następnie rozcierać tak, aby jak najlepiej zmiażdżyć tkankę. Uwaga: Jeden woreczek umożliwia zbadanie tylko jednej próbki. 3. W woreczku z roztartą próbą umieścić pionowo pasek testowy, tak, aby połowa zielonej końcówki była zanurzona w roztworze. Pasek powinien pozostać w woreczku przez 30 min. 4. Odczytać wynik po 30 min inkubacji paska w roztworze z próbą. Novazym Polska ul. Żywokostowa 23, 61-680 Poznań. tel. +48 61 610 39 10 , fax. +48 61 610 39 11, e-mail: [email protected], www.novazym.com Copyright Novazym Polska 2008 3 PepMV test serologiczny Interpretacja wyników: W przypadku poprawnie wykonanego testu musi pojawić się linia kontrolna. Pozytywny wynik testu: widoczne dwie linie - linia kontrolna (wyżej) i linia testowa (poniżej), obie w kolorze od czerwonego do purpurowego. Wynik negatywny testu: widoczna jedynie linia kontrolna. UWAGA! Jeżeli widoczna jest tylko linia testowa a brak jest linii kontrolnej należy test powtórzyć. Należy unikać bocznego przepływu buforu przez pasek testowy. Pasek należy zanurzyć w buforze do linii kontrolnej wskazywanej przez strzałki na pasku testowym. Przechowywanie: Testy należy przechowywać w suchym miejscu w temp +4°C. Data ważności: Novazym Polska ul. Żywokostowa 23, 61-680 Poznań. tel. +48 61 610 39 10 , fax. +48 61 610 39 11, e-mail: [email protected], www.novazym.com Copyright Novazym Polska 2008