11/7/2012 http://www.bioalgorithms.info Molecular Biology Primer • Angela Brooks, Raymond Brown, Calvin Chen, Mike Daly, Hoa Dinh, Erinn Hama, Robert Hinman, Julio Ng, Michael Sneddon, Hoa Troung, Jerry Wang, Che Fung Yun 2012-10-31 Algorytmika dla bioinformatyki: cześć 5 1 Centralny dogmat biologii molekularnej: Informacja, jak wytwarzać białka jest przechowywana w DNA. Na proces produkcji białka składają się dwa procesy : transkrypcja - przepisanie sekwencji DNA na RNA (1 i 2) translacja - przetłumaczenia sekwencji RNA na sekwencje aminokwasów (3) Dla istoty życia krytyczne są trzy typy molekuł: • • • DNA -- Przechowuje informację jak komórka ma pracować RNA -- Transferuje krótkie sekwencje informacji w różne części komórki – Buduje matrycę do syntetyzowania białek Białka -- Tworzą enzymy, które wysyłają sygnały do innych komórek a także regulują aktywność genów. – Są głównymi składnikami budulcowymi organizmu (np. włosy, skóra, itp.) 2012-10-31 Algorytmika dla bioinformatyki: cześć 5 2 1 11/7/2012 http://pl.wikipedia.org/wiki/Kwasy_nukleinowe Helisa: linia śrubowa http://www.e-biotechnologia.pl/Artykuly/chromosomy 2012-10-31 Algorytmika dla bioinformatyki: cześć 5 3 DNA : kwas deoksyrybonukleinowy • • • Funkcja DNA: przechowuje informację DNA ma strukturę podwójnej helisy. Szkielety z fosforanu i deoksyrybozy są związane 4 zasadami azotowymi: A-adenina, G- guanina, T-tymina, Ccytozyna. Pary A-T C-G uzupełniają się na komplementarnych niciach. DNA jest nie symetryczne. Ma kierunek „do przodu” i „do tyłu”. Końce są oznaczane 5’ i 3’ od pozycji węgla w deoksyrybozie. 5’ AATCGCAAT 3’ 3’ TTAGCGTTA 5’ DNA przy transkrypcji i przy replikacji jest zawsze czytane od 5’ do 3’ 2012-10-31 Algorytmika dla bioinformatyki: cześć 5 4 2 11/7/2012 Is the ‘selfish gene’ story metaphor or empirical science or both? Denis Noble: Experimental Physiology 93.1 pp 16–26, 2008 2012-10-31 Algorytmika dla bioinformatyki: cześć 5 5 http://www.bioalgorithms.info Restriction Enzymes • Discovered in the early 1970’s – Used as a defense mechanism by bacteria to break down the DNA of attacking viruses. – They cut the DNA into small fragments. • Can also be used to cut the DNA of organisms. – This allows the DNA sequence to be in a more manageable bite-size pieces. • It is then possible using standard purification techniques to single out certain fragments and duplicate them to macroscopic quantities. 2012-10-31 Algorytmika dla bioinformatyki: cześć 5 6 3 11/7/2012 Enzymy restrykcyjne Werner Arber Daniel Nathans Hamilton Smith : NOBEL z fizjologii w1978 Hin D II – pierwszy odkryty enzym restrykcyjny , rok 1970 Rozpoznaje i tnie DNA przy napotkaniu Werner Arber – Daniel Nathans – Hamilton Smith - odkrył enzym restrykcyjny pionier w zastosowaniu cięcia DNA do konstrukcji mapy genetycznej DNA pokazał , że enzym restrykcyjny tnie DNA dokładnie w połowie specyficznej sekwencji 2012-10-31 specyficznej sekwencji: GTGCAC Algorytmika dla bioinformatyki: cześć 5 or GTTAAC 7 Measuring DNA Length Electrophoresis • A copolymer of mannose and galactose, agaraose, when melted and recooled, forms a gel with pores sizes dependent upon the concentration of agarose • The phosphate backbone of DNA is highly negatively charged, therefore DNA will migrate in an electric field – The size of DNA fragments can then be determined by comparing their migration in the gel to known size standards. 2012-10-31 Algorytmika dla bioinformatyki: cześć 5 8 4 11/7/2012 2012-10-31 Algorytmika dla bioinformatyki: cześć 5 9 2012-10-31 Algorytmika dla bioinformatyki: cześć 5 10 5 11/7/2012 6