ĆWICZENIE X Wykaz zagadnień na ćwiczenia z przedmiotu Biologia molekularna z elementami diagnostyki molekularnej dla studentów II roku kierunku: biotechnologia medyczna 15.05-19.05.2017 TEMAT: Sekwencjonowanie DNA i RNA w poszukiwaniu mutacji i polimorfizmów DNA oraz w diagnostyce genów i transkryptów fuzyjnych Cel: Zapoznanie studentów z różnymi metodami sekwencjonowania DNA oraz opanowanie umiejętności analizy i umiejętności interpretacji elektroforegramów sekwencyjnych 1. Sekwencjonowanie pierwszej generacji a) Metoda chemicznej degradacji DNA (metoda Maxama i Gilberta – 1977) b) Klasyczna metoda terminacji syntezy łańcucha DNA - metoda Sangera 2. Sekwencjonowanie drugiej generacji Nowe generacje sekwencjonowania NGS (ang. next generation sequencing): np. takie w których nie używa się ddNTP Pirosekwencjonowanie Metoda chemicznej degradacji DNA Sekwencjonowanie za pomocą ligazy Sekwencjonowanie metodą SOLiD. metoda sekwencjonowania SMRT (ang. Single-Molecule Real-Time) metoda sekwencjonowania - Solexa (Genome Analyzer) 3. Sekwencjonowanie III generacji - nanoporowe sekwencjonowanie Piśmiennictwo: 1. 2. 3. 4. Gola J, Mazurek U, Raczek E. Analiza DNA w medycynie sądowej, wydanie I. Katowice 2012, str 61-63. Przybecki Z., Pawełkowicz ME., Wojcicki R. Sekwencjonowanie genomów i rozwój biotechnologii. Biotechnologia 4 (91) 9–23 2010 Magdalena Kotowska1, Jolanta Zakrzewska-Czerwiñska. Kurs szybkiego czytania DNA – nowoczesne techniki sekwencjonowania Biotechnologia Biotechnologia 2010 4 (91) 24–38 Krystian Bączkowski, Paweł Mackiewicz, Maria Kowalczuk, Joanna Banaszak, Stanisław Cebrat. Od sekwencji do funkcji – poszukiwanie genów i ich adnotacje Biotechnologia 3 (70) 22–44 2005