Imię i nazwisko:……………………….. Sekcja:……….. Wersja: …… Analizowany gen….. Data: ……..2017 r. ĆWICZENIE X TEMAT: Sekwencjonowanie kwasów nukleinowych Sekwencja 20 nukleotydowa:…………………………………………………. Zadanie 1. Przeprowadź walidację wyniku sekwencjonowania NGS za pomocą manualnej metody enzymatycznej Sangera i Coulsona. 1. Protokół sekwencjonowania DNA genu ……. ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… 2. Wizualizacja wyniku sekwencjonownania fragmentu DNA genu ….. metodą Sangera i Coulsona za pomocą elektroforegramu. Zadanie 2. Przeprowadź walidację wyniku sekwencjonowania NGS za pomocą manualnej metody chemicznej Maxama i Gilberta. 1. Protokół sekwencjonowania DNA genu ……. ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………… 2. Wizualizacja wyniku sekwencjonownania fragmentu DNA genu ….. metodą chemiczną Maxama i Gilberta za pomocą elektroforegramu. Zadanie 3. Analiza wyniku porównania dwóch badanych sekwencji genu env wirusa HIV. 1) Ile jest zmian w badanych sekwencjach? ……………………………………………………………………………………….. ……………………………………………………………………………………….. ……………………………………………………………………………………….. ……………………………………………………………………………………….. 2) Jakiego typu są to mutacje? ……………………………………………………………………………………….. ……………………………………………………………………………………….. ……………………………………………………………………………………….. ……………………………………………………………………………………….. 3) Jaki efekt fenotypowy powodują wykryte mutacje? ……………………………………………………………………………………….. ……………………………………………………………………………………….. ……………………………………………………………………………………….. ……………………………………………………………………………………….. Pytania sprawdzające Wymień i krótko opisz metody sekwencjonowania, z uwzględnieniem metod nowej i starej generacji. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ……………………………………………………………………………………………… ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. Określ w jakim zakresie badań biotechnologicznych pomocne lub niezbędne jest zastosowanie technik sekwencjonowania, podaj przykłady. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. Opisz sposoby przygotowania produktów PCR do sekwencjonowania. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ………………………………………………………………………………………………. ……………………………………………………………………………………………….