ZMiLIM UM Łódż Oddział - POŁOŻNICTWO licencjat, s. dzienne Plan zajęć dla oddziału POŁOŻNICTWA w roku akademickim 2015 / 2016 /semestr letni/ WYKŁADY 1. Wstęp do mikrobiologii – Układ odpornościowy człowieka a mikroorganizmy. Pojęcie infekcjo logii. Podział drobnoustrojów. Znaczenie mikrobiologii i diagnostyki mikrobiologicznej we współczesnej medycynie. (3h) 2. Mikrobiom człowieka w zdrowiu i w chorobie. Komensale i pasożytnicza flora mikrobiologiczna człowieka. Drobnoustroje kolonizujące: drogi oddechowe, przewód pokarmowy, moczowo-płciowy. Mechanizmy patogenezy bakteryjnej. (3h) 3. Podstawy wirusologii. Odpowiedź organizmu ludzkiego w zakażeniach wirusowych i bakteryjnych. Znaczenie obrony przeciwzakaźnej w zależności od drobnoustroju. Bariery chroniące przed zakażeniem. Unikanie odpowiedzi immunologicznej przez bakterie. Odpowiedź przeciwwirusowa. Unikanie odpowiedzi immunologicznej. (3h) ĆWICZENIA 1. Mikrobiologia ogólna cz1. (2h) Budowa i fizjologia mikroorganizmów. Podstawy diagnostyki bakteriologicznej i wirusologicznej. Metody barwienia preparatów bakteryjnych. Zasady określania lekowrażliwości. 2. Mikrobiologia ogólna cz2. (2h) – Podstawowe zasady pobierania materiału klinicznego, zabezpieczania i transportu do laboratorium. Wpływ czynników fizycznych i chemicznych na bakterie. Sterylizacja i dezynfekcja. Aseptyka i antyseptyka. 3. Mikrobiologia szczegółowa cz1. (2h) - Charakterystyka wybranych bakterii Gram-dodatnich: Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, Listeria, Clostridium, Actinomyces, Lactobacillus, (morfologia, epidemiologia, objawy chorobowe, profilaktyka). 4. Mikrobiologia szczegółowa cz2. (2h) - Charakterystyka wybranych bakterii Gram-ujemnych: Neisseria, Chlamydia, Escherichia, Proteus, Klebsiella, Haemophilus, Mycoplasma, Gardnerella, Mobiluncus Treponema, bakterie beztlenowe Gram-ujemne (morfologia, epidemiologia, objawy chorobowe, profilaktyka). Podstawy diagnostyki zakażeń dróg moczowo-płciowych. Metody stosowane do oceny biocenozy dróg rodnych. . Prowadząca Data Godzina WYKŁADY Miejsce Grupa ul.Narutowicza 58, Prof. dr. hab. n. med. Janina Grzegorczyk 25.II 45 16 -19 00 03.III 15 18 -20 30 07.III 10 -13 00 sala P2 Pomorska 251 CDUM, sala 1.27 wszystkie grupy ul.Narutowicza 58, 45 sala P2 ĆWICZENIA dr n. med. J.Ż-Olszewska, dr n. med. I Szczerba dr n. med. A. Kiryszewska 24.II, 02.III, 9.III, 16.III 8 -10 dr n. med. J.Ż-Olszewska, dr n. med. I Szczerba dr n. med. A. Kiryszewska dr n. med. M. Brauncajs 24.II, 02.III, 9.III, 16.III 10 -11 30 00 30 30 Pomorska 251 Budynek C5 sale 95, 96 3,4,5 Pomorska 251 Budynek C5 sale 95, 96 1,2,6,7 ZMiLIM UM Łódż Oddział - POŁOŻNICTWO licencjat, s. dzienne ZAKRES MATERIAŁU Z MIKROBIOLOGII OGÓLNEJ I SZCZEGÓŁOWEJ obowiązujący studentów – Położnictwa 2015/2016 [semestr letni] Ćwiczenie 1. Mikrobiologia ogólna cz1. Budowa i fizjologia mikroorganizmów. Podstawy diagnostyki bakteriologicznej i wirusologicznej. Metody barwienia preparatów bakteryjnych. Zasady określania lekowrażliwości. Wymagania hodowlane bakterii; podział pożywek bakteryjnych ze względu na skład, konsystencję i zastosowanie ; środowisko hodowli: temperatura, gaz, pH, ciśnienie osmotyczne, Fazy wzrostu hodowli. Metoda uzyskiwania czystej hodowli; Pojęcie kolonii bakteryjnej. Metody hodowli wirusów Budowa komórki bakteryjnej, elementy stałe i dodatkowe; Klasyfikacja mikroorganizmów. Definicje jednostek systematycznych. Podział bakterii ze względu na kształt, układ w preparatach. Budowa wirusów, replikacja. Metody barwienia preparatów, podział i zastosowanie. Antybiotyki i chemioterapeutyki – podział ze względu na budowę, mechanizm, zakres i efekt działania na komórkę bakteryjną. Oporność bakteryjna na antybiotyki i chemioterapeutyki: - podział, mechanizmy, przenoszenie oporności. Metody oznaczania wrażliwości na leki, wyznaczanie MIC i MBQ. Ćwiczenie 2. Mikrobiologia ogólna cz2. Podstawowe zasady pobierania materiału klinicznego, zabezpieczania i transportu do laboratorium. Wpływ czynników fizycznych i chemicznych na bakterie. Sterylizacja i dezynfekcja. Aseptyka i antyseptyka. Pobieranie, identyfikacja i transport materiału do badań bakteriologicznych, wirusologicznych i środowiskowych. Występowanie bakterii w środowisku otaczającym człowieka (powietrze, woda, gleba, przedmioty) i metody wykrywania. Kontrola bakteriologiczna środowiska człowieka metodą sedymentacji, aspiracji, wymazów oraz odcisków czystościowych. Definicje pojęć: zarazek, flora bakteryjna stała i przejściowa, nosicielstwo bakterii patogennych, rezerwuar zarazka, źródło zakażenia, drogi rozprzestrzeniania się, etiologia choroby Wpływ czynników fizycznych i chemicznych na bakterie. Definicje pojęć: sanityzacja, aseptyka, antyseptyka, odkażanie (dezynfekcja), wyjaławianie (sterylizacja), pasteryzacja, tyndalizacja. Podział metod dezynfekcji i sterylizacji Metody kontroli sterylizacji Ćwiczenie 3. Mikrobiologia szczegółowa cz1. Charakterystyka wybranych bakterii Gram-dodatnich z rodzaju: Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, Listeria, Clostridium, Actinomyces, Lactobacillus, (morfologia, epidemiologia, objawy chorobowe, profilaktyka). Systematyka, rezerwuar zarazka, źródła i drogi zakażenia, budowa antygenowa, mechanizmy chorobotwórczości, choroby, metody identyfikacji bakterii z rodzaju: Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, Listeria,, Lactobacillus, Clostridium, oraz, Actinomyces. Ćwiczenie 4. Mikrobiologia szczegółowa cz2. Charakterystyka wybranych bakterii Gram-ujemnych: Neisseria, Chlamydia, Escherichia, Proteus, Klebsiella, Haemophilus, Mycoplasma, Treponema, bakterie beztlenowe Gram-ujemne (morfologia, epidemiologia, objawy chorobowe, profilaktyka). Podstawy diagnostyki zakażeń dróg moczowo-płciowych. Metody stosowane do oceny biocenozy dróg rodnych. . Metody stosowane do oceny biocenozy dróg rodnych. Systematyka, rezerwuar zarazka, źródła i drogi zakażenia, budowa antygenowa, mechanizmy chorobotwórczości, chorobotwórczość, metody identyfikacji bakterii z rodzaju Neisseria, Escherichia coli, Klebsiella, Proteus, Pseudomonas, Haemophilus, Fusobacterium, Bacteroides, Porphyromonas, Prevotella, Gardnerella, Mobiluncus, oraz Treponema, Chlamydia, Mycoplasma. LITERATURA OBOWIĄZUJĄCA: Podstawowa:1. Heczko Piotr B. (red.). Mikrobiologia. Podręcznik dla pielęgniarek, położnych i ratowników medycznych. PZWL - Wydawnictwo Lekarskie, 2007. Uzupełniająca: Dąbrowska-Szponar M., Garbacz K., Piechowicz L. Praktyczny atlas mikrobiologii, Gdański Uniwersytet Medyczny, 2012 ZMiLIM UM Łódż Oddział - POŁOŻNICTWO licencjat, s. dzienne Plan zajęć dla oddziału POŁOŻNICTWA w roku akademickim 2015 / 2016 /semestr letni/ Ćwiczenie 1. I. II. III. IV. V. Budowa i fizjologia mikroorganizmów. Podstawy diagnostyki bakteriologicznej i wirusologicznej. Metody barwienia preparatów bakteryjnych. Zasady określania lekowrażliwości. Przedstawienie przepisów BHP obowiązujących w pracowni mikrobiologicznej ZMiLIM UM (5min) Omówienie Regulaminu studiów obowiązującego studentów podczas zajęć z mikrobiologii (5min) Sprawdzian bieżących wiadomości (3 min) Rozdanie imienne tematów do Samokształcenia do opracowania do 4-ego ćwiczenia. Prelekcja połączona z demonstracjami (warunki hodowli, zasady diagnostyki i określania lekowrażliwości). VI. Część demonstracyjna 1. Demonstracja sporządzonych, podstawowych pożywek bakteryjnych (bez posiewów). a/ Proste - woda peptonowa, bulion, agar zwykły (słupek, skos, płytka) b/ Wzbogacone - bulion z glukozą, agar z krwią, pożywka Loefflera, c/ Wybiórczo -różnicujące – pożywka Chapmana, pożywka McConkey’a, Coccosel agar. 2.1. Demonstracja wzrostu bakterii na pożywkach. a/ Wzrost bakterii na pożywkach płynnych (kożuszek, zmętnienie, osad). b/ Wzrost bakterii na pożywce stałej (trzy rożne rodzaje kolonii na agarze odżywczym). c/ Wzrost szczepów barwnikotwórczych (zabarwione kolonie -Micrococcus spp, zabarwiona pożywka wokół kolonii- Pseudomonas spp.). 2.2. Demonstracja słoja z kopertami do hodowli w kontrolowanej atmosferze gazowej dla bakterii beztlenowych, mikroaerofilnych i kapnofilnych. 3. Demonstracja naczyń do hodowli tkankowych wirusów. Omówienie metod hodowli wirusów (w zarodku ptasim i hodowlach tkankowych) 4. Demonstracja preparatów bakteryjnych a/ Metoda negatywna - kształty komórek bakteryjnych b/ Metoda pozytywno - negatywna - otoczki. c/ Metoda Grama – ziarniaki Gram- dodatnie - pałeczki Gram – ujemne - laseczki ze sporami b/ Preparat barwiony metodą Schaeffera-Fultona c/ Demonstracja preparatu bakteryjnego ukazującego rzęski [tablica: typy urzęsienia i fimbrie] 4. Identyfikowanie bakterii na podstawie ich cech biochemicznych. a/ Omówienie schematu diagnostycznego [tablica] b/ Określanie właściwości hemolitycznych bakterii – hemoliza: alfa, beta i gamma c/ Demonstracja wzrostu bakterii na wybranych pożywkach wybiórczych: McConkey (lak+ i-) Chapman (man+ i-) Coccosel, diagnostycznych d)Demonstracja panelu identyfikacyjnego API i Phoenix 5. Określanie lekowrażliwość a/ Demonstracja antybiogramu wykonanego metodą krążkowo-dyfuzyjną. b/ Demonstracja ustalania wartości (MIC) za pomocą E-testu. c/ Prezentacja wyliczania skuteczności antybiotyku wobec drobnoustroju –MBQ [tablica] VII. Część praktyczna Wykonanie preparatu metodą Grama z hodowli stałych i demonstracja pracy z mikroskopem świetlnym. ZMiLIM UM Łódż Ćwiczenie 2. Oddział - POŁOŻNICTWO licencjat, s. dzienne Podstawowe zasady pobierania materiału klinicznego, zabezpieczania i transportu do laboratorium. Wpływ czynników fizycznych i chemicznych na bakterie. Sterylizacja i dezynfekcja. Aseptyka i antyseptyka. I. Sprawdzian bieżących wiadomości (3 min) II. Prelekcja połączona z demonstracjami sprzętu i podłoży do pobieranie materiału do badań mikrobiologicznych i wirusologicznych; Omówienie wpływu czynników chemicznych i fizycznych na bakterie; sterylizacja i dezynfekcja. III. Część demonstracyjna 1. Demonstracja naczyń, podłoży, sprzętów do pobierania materiału klinicznego (podłoża do pobierania krwi, płynu mózgowo-rdzeniowego, wymazówki, Portagerm, pojemnik na kał, mocz, Uromedium), płytka Rodaca. 1.1. Pobieranie materiału, Omówienie i demonstracja naczyń, podłoży, aparatów do pobierania materiału klinicznego a. do badań mikrobiologicznych a)-krew: tuż przed spodziewanym szczytem gorączki, zestawem do bezpośredniego posiewania na p. tranportowo-hodowlane (wygrzane do temp 37ºC), w ilości w stosunku do podłoża jak1:10. b)-płyn mózgowo-rdzeniowy: do strzykawki i natychmiast wprowadzany w odpowiedniej ilości do wygrzanego p. transportowo-hodowlanego c)-wymaz ze śluzówek: jamy ustnej: punktowo (unikając kontaktu z językiem) na p. tranpostowe Stuarta spojówek: wymazówką z włókna dakronowego na p. Stuarta odbytu: spoza zwieraczy elastyczną wymazówką na p. Amiės z węglem aktyw. kanału szyjki macicym [tablica] d)- wymaz ze zmian ropnych skóry: na podłoże Stuarta e)- wymaz z głębokich ran i odleżyn - kierunku bakt. beztl. na p. Stuarta unikając chłodzenia podłoża w lod. f)– bioptaty, wycinki śródoperacyjne: na podłoża żelowe konfekcjonowane w butelkach, g)- kał – do jałowego pojem., bez płynów konserwujących, transport do 2 h od pobrania, nie schładzać w lod. h)- plwocina – odkrztuszona wydzielina do jałowego pojemnika z szeroką szyją i)- mocz – pobrany do jałowego, jednorazowego pojemnika (po odpowiednim przygotowaniu się pacjenta) i natychmiast transportowany do laboratorium i/lub posiany na podłoże zanurzeniowe b. do badań wirusologicznych. a)-Krew: około 5 ml „na skrzep”. Odciągnięta surowica służy do badań serologicznych;- jałowo na heparynę i zamrozić b) -wymaz z gardła, nosa, spojówek, odbytu, szyjki macicy:– pobierane na płyn odżywczy-transp. i przechow. w 0ºC c)-kał: - pobiera się do jałowego pojemnika i zamraża d)-treść zmian skórnych: - pobiera się igłą z widocznych pęcherzy lub wacikiem przy zmianach podeschniętych i następnie chłodzi lub zamraża w -20ºC e)- płyn mózgowo-rdzeniowy: - pobierany bezpośrednio po nakłuciu do jałowej probówki. Jeżeli nie ma możliwości natychmiastowego transportu (w chłodzie) próbkę należy zamrozić. UWAGA: ze względu na dużą wrażliwość wirusów na podwyższoną temperaturę, materiał przed transportem powinien być przetrzymywany chłodzie /jeśli transport w tej samej dobie/lub w temperaturze -20ºC (krew (bez heparyny)w temp.: 4 do 8ºC); Na czas transportu materiał powinien być umieszczony w termosie z lodem. c. do badań środowiskowych: a)- powietrze: metodą sedymentacyjną lub aspiracyjną na podłoża wzbogacone lub selektywne, b)- powierzchnia: 1. wymaz czystościowy: wykonuje się z powierzchni 5 x 5 cm, zwilżoną, w jałowej soli fizjologicznej wymazówką i transportuje na podłożu Stuarta. 2. odcisk – z powierzchni prostych i tkanin pobiera się odcisk płytką Rodacka z naniesioną zestaloną pożywką. Płytkę dociska się z jednakową siłą stosując aparaty stęplujące do płytek. 3. odcisk – z powierzchni zakrzywionych płytką wielopolową o elastycznym spodzie. Metoda odciskowa poza rejestracją zanieczyszczenia pozwala policzyć ilość bakterii na 1 cm 2. 1.2. Obecność bakterii w środowisku a. Demonstracja i omówienie metod poszukiwania bakterii: w powietrzu metodą sedymentacyjną i aspiracyjną na powierzchni metodą wymazów i odcisków na odzieży i na powierzchni skóry, błon śluzowych jamy ustnej metodą odciskową b. Kryteria oceny sanitarnej w środowisku szpitala:- powietrza, powierzchni. c. Kryteria oceny mikrobiologicznej skóry i błon śluzowych szczególnie u pacjentów przyjmowanych do planowych zabiegów. 2.Demonstracja sporali A i S oraz testów chemicznych taśmy ze wskaźnikiem chemicznym procesu sterylizacji [+ i -] IV. Część praktyczna 1. Wykonanie testów nad wpływem UV, temperatury i środka dezynfekującego na hodowle bakteryjne 2. Wykonanie doświadczeń nad wpływem czynników dezynfekujących na florę opuszków palców na podłożu TSA 3. Sprawdzenie obecności bakterii w otoczeniu: w powietrzu – m. sedymentacyjną, na powierzchniach – m. wymazów. 4. Wykonanie posiewów metodą odciskową: włosy, ubranie, banknot, moneta. 5. Wykonanie wymazu ze śluzówek jamy ustnej i posiew na podłoże z krwią baranią 6. Wykonanie wymazów z przedsionka nosa od każdego studenta i posiew na p. Chapmana ZMiLIM UM Łódż Oddział - POŁOŻNICTWO licencjat, s. dzienne Mikrobiologia szczegółowa cz1. Charakterystyka wybranych bakterii Gram-dodatnich z rodzaju: Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, Listeria, Clostridium, Actinomyces, Lactobacillus, (morfologia, epidemiologia, objawy chorobowe, profilaktyka). Ćwiczenie 3. I. Sprawdzian bieżących wiadomości (3 min) II. Prelekcja połączona z demonstracjami posianych podłoży hodowlanych. Omówienie: występowania w organizmie człowieka i środowisku, źródeł zarazka i dróg zakażania, czynników chorobotwórczości (w tym toksyny), chorobotwórczości, profilaktyki swoistej zakażeń powodowanych przez omawiane gatunki, rodzaju materiału klinicznego do badań mikrobiologicznych bakterii z rodzaju: Staphylococcus Streptococcus Enterococcus Listeria Lactobacillus Clostridium Mycobacterium Actinomyces II. Część demonstracyjna 1. S. aureus na agarze z krwią 2. S. aureus podłożu Chapmana 3. S. pneumoniae na agarze z krwią 4. S. pyogenes na agarze z krwią 5. E. faecalis na Coccosel agar 6. Listeria monocytogenes na p. ALOA 7. M. tuberculosis, M. bovis na p. Loewensteina-Jensena 8. Lactobacillus na Rogosa 9. III. Demonstracja preparatów mikroskopowych z powyższych hodowli: - S. aureus m. Grama, - S. pneumoniae m. Grama - S. pyogenes z hodowli płynnej - E. faecalis m. Grama - Listeria monocytogenes m. Grama - Lactobacillus m. Grama -M. tuberculosis m. Zhiel-Neelsena Część praktyczna Odczyt posiewów z poprzedniego ćwiczenia. Studenci dokonują: 1. oceny wpływu środków antyseptycznych na florę bakteryjną skóry rąk na podstawie posiewów 2. oceny ilości bakterii w powietrzu i na powierzchniach; opisują i oceniają wg kryteriów / wg załączonych w tabelach/ badane środowiska 3. oceny wymazów z przedsionka nosa: analizując z asystentem swoje posiewy wykonując test na katalazę wykonując test lateksowy z 1 wybranego posiewu ZMiLIM UM Łódż Oddział - POŁOŻNICTWO licencjat, s. dzienne Ćwiczenie 4. Charakterystyka wybranych bakterii Gram-ujemnych: Neisseria, Chlamydia, Escherichia, Proteus, Klebsiella, Haemophilus, Mycoplasma, Treponema, bakterie beztlenowe Gram-ujemne (morfologia, epidemiologia, objawy chorobowe, profilaktyka). Podstawy diagnostyki zakażeń dróg moczowo-płciowych. Metody stosowane do oceny biocenozy dróg rodnych. . I. Sprawdzian bieżących wiadomości (3 min) II. Odbiór pisemnych opracowań tematów przewidzianych w ramach Samokształcenia II. Prelekcja połączona z demonstracjami posianych podłoży hodowlanych. Omówienie: występowania w organizmie człowieka i środowisku, źródeł zarazka i dróg zakażania, czynników chorobotwórczości (w tym toksyny), chorobotwórczości, profilaktyki swoistej zakażeń powodowanych przez omawiane gatunki, rodzaju materiału klinicznego do badań mikrobiologicznych bakterii z rodzaju: Neisseria Haemophilus Escherichia coli Klebsiella Proteus Fusobacterium Porphyromonas Prevotella Gardnerella, Mobiluncus Treponema Chlamydia Mycoplasma III. Część demonstracyjna 1. Demonstracja wzrostu Enterobacteriaceae na pożywkach SS, McConkey’a (lak+ i lak-). 2. Demonstracja wzrostu Neisseria (lactamica) na podłożu czekoladowym. 2. Prezentacja wzrostu mgławicowego Proteus vulgaris 3. Demonstracja wzrostu P. aeruginosa na na agarze Kinga B 4. Demonstracja preparatu m. Grama z hodowli P. aeruginosa 5. Demonstracja preparatu z ropnej wydzieliny z cewki moczowej m.Grama 6. Demonstracja preparatu - BV i flory prawidłowej szyjki macicy 7. Demonstracja posianego Uromedium 7. Omówienie kalendarza szczepień [tablica] IV. Część praktyczna /praca w zespołach/ 1 Obserwacja i interpretacja posiewów demonstracyjnych. 2 Odczytanie i interpretacja posianego Uromedium 3 Wykonanie testu na oksydazę cytochromową z hodowli rodzaju: Escherichia i Pseudomonas 4 Wykonanie preparatów mikroskopowych metodą Grama z ww. hodowli ZMiLIM UM Łódż Oddział - POŁOŻNICTWO licencjat, s. dzienne TEMATY DO SAMODZIELNEGO OPRACOWNIA W RAMACH SAMOKSZTAŁCENIA /15h/ obowiązujący studentów – Położnictwa 2015/2016 [semestr letni] 1. Zakażenia szpitalne 2. Techniki mycia rąk w opiece zdrowotnej 3. Szczepy alarmowe /alert patogeny/w zakażeniach szpitalnych 4. Kalendarz szczepień obowiązujący w 2016r 5. Metody stosowane do oceny mikrobiologicznej dróg rodnych 6. Flora fizjologiczna i patogenna dróg rodnych Lista osób przygotowujących wspólnie wybrany temat w grupie nr … ZMiLIM UM Łódż Oddział - POŁOŻNICTWO licencjat, s. dzienne Ocena zanieczyszczenia mikrobiologicznego powietrza na sali ćwiczeń Liczbę drobnoustrojów w 1m3 powietrza należy obliczyć wg wzoru Omeliańskiego: X = a . 100 . 100 / p . t . 1/5 gdzie: X – liczba drobnoustrojów w 1m3 powietrza; a – liczba kolonii na płytce (średnia arytmetyczna z 5 płytek); p – powierzchnia płytki (πr2); t – czas ekspozycji płytki (zalecany: 30 min.); 1/5 – stała. W Polsce określono trzy klasy czystości pomieszczeń szpitalnych: 1. Pomieszczenia I klasy czystości – do 70 CFU/m3 powietrza: sale operacyjne wysokoaseptyczne (transplantologia), sale łóżkowe specjalne (pacjenci w immunosupresji), pracownie rozpuszczania cytostatyków, centralna sterylizatornia – część czysta. 2. Pomieszczenia II klasy czystości – do 300 CFU/m3 powietrza: bloki operacyjne, OIOM, oddziały noworodków i wcześniaków, gabinety zabiegowe, gabinety endoskopii. 3. Pomieszczenia III klasy czystości – do 700 CFU/m3 powietrza: sale chorych, centralna sterylizatornia – część brudna