FOSFORYLACJA OKSYDACYJNA - PREZENTACJA.doc (46 KB) Pobierz 2. Fosforylacja oksydacyjna – proces syntezy ATP, zachodzący w wyniku przeniesienia elektronów NADH lub FADH2 na O2 przez szereg przenośników elektronów (w łańcuchu oddechowym). Główne źródło ATP w organizmach tlenowych. Z 30 ATP powst. Podczas utleniania glukozy 26 pochodzi z fosforylacji oksydacyjnej. 3. Przebieg: Przepływ elektronów z NADH i FADH2 do O2 przez kompleksy białkowe w wewn błonie mitochondriów, powoduje wypompowanie protonów z matriks mitochondrialnej powstaje siła protomotoryczna składająca się z: gradientu pH i transbłonowego potencjału elektrycznego. Synteza ATP zachodzi na skutek powrotnego przepływu protonów przez kompleks enzymatyczny do matriks mit. Utlenianie sprzężone jest z fosforylacją dzięki gradientowi protonowemu wytworzonemu w poprzek błony mit. Istotę fosforylacji Oks stanowi przekształcenie siły elektromotorycznej w siłę protonomotoryczną, a następnie w potencjał fosforylacyjny. 4. W pierwszej fazie biorą udział 3 pompy protonowe napędzane elektronami: reduktaza NADH-Q, reduktaza cytochromowa i oksydaza cytochromowa. W ich skład wchodzą złożone centra oksydoredukcyjne zaw.flawiny, chinony, centra żelazowo-siarkowe, hemy, jony miedzi. 5. W drugiej fazie uczestniczy synteza ATP, która syntetyzuje ATP w następstwie przepływu protonów z powrotem do matriks mit. Fosf Oks stanowi dobitny przykład, że gradienty protonowe odpowiedają w układach biologicznych za odwracalny przepływ energii swobodnej. Fosforylacja Oks u org tlenowych zachodzi na went błonie mitochondriom – mało przepuszczalna, ma stronę cytoplazmatyczna i matriksową W org prokariotycznych pompy protonowe napędzanie elektronami i kompleks syntetyzujący ATP są umiejscowione w błonie cytoplazmatycznej, wewnętrznej z dwóch błon. Podczas fosf Oks potencjał przenoszenia elektr NADH lub FAD2 ulega przekształceniu w potencjał przenoszenia fosforanów ATP(potencjał fosforanowy ATP) 6. Silne reduktory, jak NADH wykazują ujemny potencjał redukcyjny, a silne utleniacze, jak O2 mają potencjał dodatni. Transport elektronów przez łańcuch oddechowy jest wymuszony różnicą potencjału między NADH i O2 wynoszącą 1,14V. 7. W skład łań odd wchodzą 3 pompy protonowe połaczone dwoma ruchomymi przenośnikami elektronów: reduktaza NADH-Q, reduktaza cytochromowa i oksydaza cytochromowa. Przepływ elektronów przez te transbłonowe kompleksy powoduje pompowanie protonów w poprzek wewn błony mit. Do grup przenoszących elektrony należą: flawiny, centra żelazo-siarkowe, hemy i jony miedzi. 8. -Elektrony przenoszone są z reduktazy NADH-Q do drugiego kompleksu łańcuchareduktazy cytochromowej, przez zredukowaną formę ubichinonu (Q), hydrofobowego chinonu szybko dyfundującego w błonie mit. - Ubichinon również przenosi elektrony z FADH2(wytworzonego na przykład podczas utleniania bursztynianu w cyklu kwasu cytrynowego) do reduktazy cytochromowej. - Małe białko – cytochrom c- przerzuca elektrony z reduktazy cytochromowej na oksydazę cytochromową będącą końcowym składnikiem łańcucha. 9. Reduktaza NADH-Q nazywana kompleksem I – przejście 2 elekt z NADH-Q powoduje wypompowanie 4 H+ z matriks na cytoplazmatyczną stronę wewn błony mit. Choroby: kilka rodzajów mutacji reduktazy NADH-Q powouje dziedziczną wzrokową neuropatię Lebera- utrata wzroku dziedziczona na drodze matczynej, pojawiająca się zazwyczaj w wieku średnim. Reduktaza bursztynian-Q – kompleks II (nie pompuje protonów) – miejsce wejścia także dla elektronów z FADH2, FADH2 nie opuszcza kompleksu Reduktaza cytochromowa – kompleks III – hem jako grupa prostetyczna, przejście pary elektr przez ten kompleks powoduje przetransportowanie netto 2H+ na str cytoplazmatyczną. Oksydaza cytochromowa – kompleks IV – kat. Przeniesienie elektr z ferro-cytochromu c (forma zredukowana) do akceptora końcowego, którym jest tlen cząsteczkowy. Przyjęcie 4 elektr przez O2 powoduje jego całkowitą redukcję do H2O z równoczesnym wypompowaniem protonów z matriks na cytoplazmatyczną stronę wewn błony mit. Podczas przejścia pary elektr przez oksydazę przepompowywane są 4 protony. Nie znany jest mechanizm przekształcający potencjał elektronów w siłę protonomotoryczną. Transport elektronów w łań odd jest hamowany przez specyficzne inhibitory. (rys str 580) 10. Utlenianie jest sprzężone z fosforylacją przez siłę protonomotoryczną. Energia swobodna utleniania jest wykorzystywana do procesu endoergicznego, jakim jest synteza ATP ADP + Pi + H+ > ATP + H2O Syntezą ATP przeprowadza zespół podjednostek umiejscowiony w wewnętrznej błonie mit. Ten kompleks enzymatyczny nazwano: mitochondrialną ATPazą lub ATPazą H+, obecnie nazywa się go syntetaza ATP. 11. W jaki sposób utlenianie NADH sprzężone jest z fosforylacją ATP? 12. Początkowo sądzono, że transport elektronów prowadzi do utworzenia kowalencyjnego intermedia tu wysokoenergetycznego, który miałby służyć jako prekursor ATP. Próbowano wyizolować domniemane intermedia ty, ale ich nie znaleziono. W 1961r. Peter Mitchell przedstawił hipotezę chemiosmotyczną. Mówił on, że: Siła protonomotoryczna jest czynnikiem napędzającym syntezę ATP przez kompleks ATPazy. Istotę jego koncepcji można tak przedstawić w skrócie: pierwszym stadium zachowania energii jest wytworzenie siły protonomotorycznej w poprzek wewnętrznej błony mitochondrialnej, indukowane przez transport elektronów. Czyli sprzężenie utleniania z fosforylacją przez gradient protonowy. 13. ATP jest syntetyzowany przez kompleks enzymatyczny złożony z kanałowej podjednostki F0 przewodzącej protony i katalitycznj podjednostki F1. 14 F1: -katalizuje syntezę ATP - zawiera 5 rodzajów łańcuchów polipeptydowych - masa cząst. 387kDa F0: - hydrofobowy segment zakotwiczony w błonie mitochondrialnej stanowiący kanał protonowy kompleksu - 4 rodzaje łańcuchów polipeptydowych 15 Trzonek łączący F0 i F1 zawiera jeszcze kilka innych białek. Jedno z nich decyduje o wrażliwości kompleksu na oligomycynę, antybiotyk, który przeszkadzając w wykorzystaniu gradientu protonowego, hamuje syntezę ATP. 16 RYSUNEK I OMÓWIONY PRZEBIEG Przepływ protonów przez syntazę ATP powoduje uwolnienie ściśle związanego ATP. Syntaza ATP katalizuje reakcję: ADP3- + Pi2- + H+ > ATP4- + H2O W rzeczywistości ADP i ATP występują w formie skompleksowanej z Mg2+. Końcowy atom tlenu ADP atakuje atom fosforu Pi, wskutek czego powstaje intermedia pentakowalencyjny, który nastepnie dysocjuje do ATP i H2O (RYS) Paul Boyer odkrył że: Rolą gradientu protonowego nie jest udział w syntezie ATP, lecz odłączenie nukleotydu od syntazy, bo ATP tworzy się również podczas nieobecności siły protonomotorycznej. Miejsca wiążące nukleotydy w tym enzymie oddziałują na siebie. Wiąznie ADP i Pi do jednego miejsca pobudza usunięcie ATP z drugiego miejsca, czyli synteza ATP wykazuje tzw. kooperatywność kataboliczną. 17 Boyer zaproponował model konformacyjnego mechanizmu syntezy ATP napędzanej przez protony. (RYS.) 3 miejsca katalityczne: O- forma otwarta – ma znikome powinowactwo do substratów L – wiąże substraty luźno i nie wykazuje aktywności katalitycznej T – wiąże substraty bardzo silnie i jest aktywne Rozważmy cząst enzymu, w której ATP związany jest z miejscem T. W tym czasie ADP i Pi związane są z miejscami L. Energia wniesiona przez przepływ protonów przemienia miejsce T w O, L w T, a O w L. Protony przepływają przez błonę F0 do miejsca katalitycznego F1, tylko wtedy, gdy O, L i T wzajemnie w siebie przechodzą! Te przejścia są powiązane najprawdopodobniej przez zmiany w oddziaływaniu między podjednostkami. 18. -Siła protonomotoryczna napędzająca syntezę ATP jest sumą dwóch składowych: gradientu pH i potencjału błonowego. -Dodatni potencjał błonowy przyczynia się do syntezy ATP dzięki tworzeniu lokalnie dużego stężenia H+ w miejscu połączenia F0 z F1 stanowiącego dla nich barierę: jest charakterystyczne, że 0,18V prowadzi do powstania takiego samego gradientu stężeń, jak różnica 3 jednostek pH pomiędzy obu stronami. - Przeniesienie 3 H+ przez syntezę powoduje utworzenie 1 cząsteczki ATP. (RYS) 19 Skąd ADP? translokaza ATP-ADP w błonie mit – umożliwia transport ADP do środka jedynie w powiązaniu transportu ATP na zewn. Skąd Pi? Przenośnik di karboksylowy umożliwia przechodzenie jabłczanu, bursztynianu i Dumaranu przez wewn bł mit na wymianę z Pi. 20. O szybkości fosforylacji oksydacyjnej decyduje zapotrzebowanie na ATP. Decyduje tu głównie poziom ADP – regulacja szybkości fosforylacji oksydacyjnej przez poziom ADP nazywa się kontrolą oddechową. Takie związki jak np. DNP, które przenoszą protony w poprzek wewn błony mit, niszczą gradient protonowy. Plik z chomika: aniaz16 Inne pliki z tego folderu: wykłady z biochemii - I sem(1).docx (621 KB) Prezentacja - metabolizm glikogenu.ppt (35317 KB) Serotonina.ppt (292 KB) Synteza_i_rozpad_glikogenu_-seminarium.pptx (6058 KB) SZLAK_PENTOZOFOSFORANOWY-to_co_czyt.ppt (1371 KB) Inne foldery tego chomika: Anatomia Chemia Dokumenty Egzamin Filmiki Zgłoś jeśli naruszono regulamin Strona główna Aktualności Kontakt Dział Pomocy Opinie Regulamin serwisu Polityka prywatności Copyright © 2012 Chomikuj.pl