koło 1 cz.2.doc (40 KB) Pobierz Skutki stymulacji Th i Tc. S.96 Th (pomocnicze)- wspomagają odpowiedź typu humoralnego i komórkowego, zarówno przez bezpośredni kontakt, jak i przez wydzielane cytokiny. Ułatwiają aktywację, proliferację i różnicowanie limfocytów B, prekursorów limfocytów T cytotoksycznych, a także pobudzają makrofagi. Th mają najczęściej CD4+, które są ligandami dla MHC kl.2. 2 subpopulacje: Th1wytwarzają interleukinę 2 ( stymuluje cytotoksyczność limfocytów) oraz interferon γ (aktywuje makrofagi) i ma wybitny udział ww wspomaganiu odpowiedzi typu komórkowego. Th2wytwarzają interleukiny 4,5,10,13, będące czynnikami wzrostu i różnicowania limfocytów B, i wspomagają główne dopowiedź humoralną. Tc (cytotoksyczne)- mają cząsteczki CD8+, ligandy dla MHC kl.1. Limfocyty CD8+ zabijają komórki rozpoznając obce (allogeniczne) cząsteczki MHC klasy 1. Ich główna rola to niszczenie komórek zakażonych przez wirusy i inne mikroorganizmy, a także niszczenie komórek nowotworowych. Mogą również ,,wyleczyć” zainfekowaną komórkę przez zahamowanie replikacji wirusów. Limfocyty dysponują 2 mechanizmami zabijania komórek przez indukcję w nich apoptozy: 1) zależnej odo uwalniania perforyny, granzymów i granulizyny, 2) zależnej od interakcji cząsteczek nadrodziny TNF w błonie komórki eżektorowej i cząsteczek z nadrodziny TNFR w błonie komórki docelowej. Co oznacza, że antygen jest rozpoznawany w restrykcji MHC? To rozpoznawanie przez limfocyty T antygenów prezentowanych w kontekście białek głównego układu zgodności tkankowej. Receptor TCR rozpoznaje antygen, gdy ten jest związany z cząsteczką MHC. Samodzielnie nie rozpoznaje antygenu. Rozpoznanie antygenów przez receptor BCR (ogólnie) Kompleks BCR składa się z 2 części funkcjonalnych. Pierwsza z nich, którą jest receptor immunoglobulinowy, odpowiada za rozpoznanie antygenu ( antygen w formie natywnej!!). Druga część kompleksu BCR odpowiada za przekazywanie sygnału do wnętrza komórki ( część tę tworzy hetrodimer, którego składnikami są Igα i Igβ- w obrębie każdej cząsteczki znajduje się motyw ITEM. Etapy przekazywania sygnału z BCR: 1. aktywacja kinaz tyrozynowych (Srcpodobnych), która powoduje fosforylację tyrozyn w obrębie motywów ITAM cząsteczek Igα i Igβ. 2. Do ufosforylowanego kompleksu ITEM przyłącza się kinaza tyrozynowa Syk, aktywowana przez kinazy Src-podobne, która bierze udział w przekazywaniu sygnału do wnętrza komórki. (kartka) Asocjatywne rozpoznanie przez receptor TCR. Funkcją limfocytów T jest pomaganie w odpowiedzi immunologicznej różnym komórkom układu odpornościowego lub zabijanie komórek docelowych, zatem TCR muszą rozpoznawać antygeny prezentowane na powierzchni tych komórek, nie antygeny natywne ( nie zmienione). Dlatego TCR nie potrafią rozpoznać samego antygenu, ani też Ag na powierzchni bakterii lub wirusa. Rozpoznają krótkie peptydy, które są pochodnymi tych antygenów (bakteryjnych lub wirusowych) i są przyłączone do cząsteczek głównego układu zgodności tkankowej (MHC), a łącznie są prezentowane na powierzchni komórek prezentujących Ag (APC). Rozpoznanie antygenu przez receptor TCR. Poprzednie pytanie + ponieważ limfocyty T rozpoznają zmodyfikowane własne cząsteczki MHC, to rozpoznanie antygenu przez limfocyty T podlega restrykcji MHC. 1. i 2. sygnał aktywacji limfocyta T. Związanie samego TCR na limfocycie T nie stymuluje ani ekspansji tych komórek, ani wytwarzania cytokin. Pełna aktywacja antygenowo swoistych limfocytów T wymaga udziału dwóch sygnałów. Sygnał 1. jest to sygnał przekazany przez kompleks CD3 z TCR (który rozpoznał antygen na cząsteczce MHC komórki prezentującej antygen) do wnętrza limfocytu. Sygnał 2. pochodzi od cząsteczek kostymulujących (np.B7, która występuje na wielu komórkach prezentujących antygen- wiąże się z cząsteczką CD28 limfocytu T). Po otrzymaniu drugiego sygnału limfocyt może wejść w stan aktywacji.Sygnały przekazywane od TCR i CD28 współpracują ze sobą w indukcji syntezy limfokin przez limfocyt T i proliferacji tych komórek. Jeżeli limfocyt T otrzyma sygnał 1. (wiązanie Ag przez TCR), a nie uzyska sygnału 2. (kostymulacja), to aktywność limfocyta T zostaje wyłączona. Wzorce molekularne związane z patogenem (PAMP). Należą do nich najbardziej charakterystyczne struktury drobnoustrojów, selektywnie rozpoznawane przez komórki układu immunologicznego. Są to: LPS- lipopolisacharyd u Gram- bakterii Lipoproteidy Peptydoglikany Kwas lipotejchojowy Dwuniciowe RNA wirusów i jednoniciowe Polisacharydy bakterii Zymosan u drożdży Białka ścian kom.bakterii N-formylowana metionina Mannozy i mannozylowane białka drożdży W organizmie ludzkim PAMP są rozpoznawane dzięki specyficznym receptorom na powierzchni leukocytów. Do takich receptorów zalicza się receptory PRR (receptory rozpoznające wzorce), receptory Toll-like i receptory mannozy. Drobiny rozpoznania immunologicznego granulocytów- PRR, TLR (Toll- like receptor). PRR- nie wykazują specyficzności, rozpoznają patogeny, które mają na swojej powierzchni podobne zestawy cząsteczek (zespół cząsteczek o strukturze), umożliwiając tym samym ich usuwanie z organizmu. Ponadto receptory te ulegają ekspresji na różnych komórkach ważnych dla rozwoju odporności nabytej. TLR- (PRR błonowe- przekazywanie sygnału)- tworzą rodzinę białek ściśle ze sobą związanych, do której należy pięciu przedstawicieli. Wszystkie te białka składają się z zewnątrzkomórkowej domeny bogatej w leucynę i domeny cytoplazmatycznej pośredniczącej w przekazywaniu sygnału do różnych genów efektorowych.Jeden z tych receptorów, TLR4, indukuje syntezę cytokin i ekspresję cząsteczek kostymulujących na kom.APC. Inny,TLR2, wiąże LPS i uruchamia wewnątrzkomórkowe przekazywanie sygnału. Zasada wykonywania, czułość i przykłady zastosowań metod immunoprecypitacyjnych: ID- podwójna immunodyfuzja (kartka) RID- radialna immunodyfuzja (kartka) IE(F)- immunoelektroforeza- (kartka) RIE(F)- immunoelektroforeza rakietkowa (kartka) Immunoelektroforeza krzyżowa (dwuwymiarowa)- slajdy Miano surowicy W serologii, pomiar ilości swoistych przeciwciał (immunoglobulin) w badanej surowicy. Miano surowicy wyrażone w jednostkach wyznacza dodatnia reakcja antygen-przeciwciało (reakcja serologiczna) uzyskana z najwyższym rozcieńczeniem surowicy. Jeśli reakcja serologiczna wypada dodatnio jeszcze w rozcieńczeniu surowicy 1:200, miano surowicy można wyrazić jako 200 jednostek. Zasady wykonania, czułość i przykłady zastosowań metod immunoenzymatycznych fazy stałej: ELISA- test immunoenzymatyczny (kartka) PAGEImmunoblotting- (kartka)- polega na rozdzieleniu mieszaniny białek za pomocą elektroforezy w żelu poliakryloamidowym w obecności SDS (SDS-PAGE), przeniesieniu ich na błonę (tzw. elektrotransfer) i identyfikacji wśród związanych z błoną białek, badanego białka za pomocą specyficznych dla niego przeciwciał. Powstałe kompleksy antygen-przeciwciało wykrywane są przy użyciu kolejnych przeciwciał (rozpoznających fragment Fc specyficznych przeciwciał), sprzężonych z enzymem katalizującym reakcję z barwnym, nierozpuszczalnym produktem. W efekcie na błonie, w miejscu gdzie znajduje się badane białko, pojawia się barwny prążek. Termin immubloting stosowany jest także w węższym zakresie – obejmującym tylko detekcję białka na błonie za pomocą przeciwciał wraz z barwną reakcją enzymatyczną. Wynika to z faktu, że elektroforeza a następnie elektrotransfer białek nie są jedynym sposobem przygotowania błony z związanym badanym białkiem. Przy niektórych badaniach wystarczy po prostu nanieść kilka kropel roztworu próbki, zawierającej badane białko, bezpośrednio na błonę. Plik z chomika: takethebox123 Inne pliki z tego folderu: P6170009.JPG (2105 KB) P6170010.JPG (2098 KB) P6170015.JPG (1851 KB) P6170011.JPG (1936 KB) P6170002.JPG (2019 KB) Inne foldery tego chomika: Zgłoś jeśli naruszono regulamin Strona główna Aktualności Kontakt Dział Pomocy Opinie Regulamin serwisu Polityka prywatności Copyright © 2012 Chomikuj.pl koło 1 koło 2009