Zestaw do izolacji totalnego DNA z bakterii

Nr kat. EM02
Wersja zestawu: 1.2012
Zestaw do izolacji
totalnego DNA z bakterii
Nr kat. EM02
I.
PRZEZNACZENIE ZESTAWU
Zestaw EXTRACTME DNA BACTERIA przeznaczony jest do szybkiej i wydajnej izolacji
bakteryjnego DNA o wysokiej czystości z hodowli płynnych i powierzchniowych
oraz osadów mrożonych. Protokół izolacji i składy buforów zostały zoptymalizowane
w celu osiągnięcia wysokiej wydajności i czystości izolowanego DNA . Produkt
przeznaczony jest wyłącznie do zastosowań badawczo-rozwojowych.
II.
SKŁAD I PRZECHOWYWANIE ZESTAWU
50
150
250
3 izolacje
izolacji
izolacji
izolacji
(DEMO)
Nr katalogowy
EM02-050
EM02-150
EM02-250
EM02-D
BacL Buffer
15 ml
45 ml
75 ml
900 µl
1 szt.
3 szt.
5 szt.
1 szt.
700 µl
2,1 ml
3,5 ml
200 µl
1 szt.
3 szt.
5 szt.
1 szt.
RNase Buffer
220 µl
660 µl
1,1 ml
100 µl
BacB Buffer
18 ml
53 ml
88 ml
1,1 ml
BacW Buffer
50 ml
150 ml
250 ml
3 ml
Elution Buffer
10 ml
3 x 10 ml
5 x 10 ml
600 µl
DNA Purification Columns
50 szt.
3 x 50 szt.
5 x 50 szt.
3 szt.
Collection Tubes (2 ml)
50 szt.
3 x 50 szt.
5 x 50 szt.
3 szt.
Liczba izolacji
Proteinase K (lyophilized)
Proteinase Buffer
RNase A (lyophilized)
Enzymy RNaza A oraz proteinaza K dostarczane są w postaci liofilizowanej.
Każda probówka zawiera odpowiednią ilość enzymu do przeprowadzenia 50
izolacji DNA. Liofilizaty RNazy A i proteinazy K należy przechowywać w temp.
+4°C. Przed pierwszym użyciem liofilizat RNazy A należy rozpuścić w 220 µl RNase
Buffer (w zestawie DEMO w 100 µl RNase Buffer). RNaza A w roztworze
przechowywana w temp. +4°C zachowuje całkowitą aktywność przez 2-3 tygodnie.
Jeśli wymagane jest przechowywanie RNazy A przez dłuższy okres czasu, zaleca
się rozporcjowanie roztworu RNazy i przechowywanie w -20°C (zachowuje
aktywność przez kilka lat).
www.dnagdansk.com
Nr kat. EM02
Liofilizat proteinazy K należy rozpuścić w 700 µl Proteinase Buffer (w zestawie
DEMO w 200 µl Proteinase Buffer). Roztwór proteinazy K należy przechowywać
w temp. –20°C!
Pozostałe składniki zestawu należy przechowywać w temp. pokojowej (15-25°C).
Wszystkie roztwory z zestawu należy przechowywać szczelnie zamknięte, aby
uniknąć zmiany stężeń w wyniku parowania. Odpowiednio przechowywany zestaw
zachowuje stabilność minimum przez okres 12 miesięcy.
V.
KONTROLA JAKOŚCI
Każda partia produkcyjna (LOT) zestawu EXTRACTME DNA BACTERIA testowana
jest według opracowanych procedur. Wydajność, czystość oraz stabilność
wyizolowanego DNA analizowane są metodami spektrofotometrycznymi oraz
elektroforetycznymi. Dodatkowo funkcjonalna jakość oczyszczonego DNA
sprawdzana jest w reakcji PCR oraz reakcji trawienia enzymami restrykcyjnymi.
VI. SPECYFIKACJA PRODUKTU
III. WYMAGANE MATERIAŁY I SPRZĘT
pp
pp
pp
pp
pp
pp
jałowe próbówki wirownicze typu Eppendorf (1,5-2 ml)
pipety automatyczne oraz odpowiednie końcówki do pipet
rękawiczki jednorazowe
mikrowirówka z rotorem na probówki o obj. 1,5-2 ml (> 10 tys. rpm)
termoblok lub łaźnia wodna (do 70°C)
worteks
Materiał wyjściowy
Bakteryjna hodowla płynna lub powierzchniowa oraz mrożony osad bakteryjny.
Wydajność izolacji
Liczba komórek: ≤ 5 x 108 → 100%
Liczba komórek: 1 x 109 ÷ 3 x 109 š 75-90% (wg protokołu izolacji DNA z dużej liczby komórek)
Liczba komórek: 1 x 109 ÷ 3 x 109 š ≤ 60% (wg protokołu standardowego)
IV. ZASADA IZOLACJI
Pojemność złoża
ok. 40 µg DNA
Procedura oczyszczania DNA składa się z 5 etapów i przeprowadzana jest
z wykorzystaniem minikolumn wirowniczych, zawierających odpowiednie
złoże, wydajnie i selektywnie wiążące kwasy nukleinowe. W pierwszym etapie
izolacji DNA , podczas lizy enzymatycznej z wykorzystaniem BacL Buffer oraz
proteinazy K, następuje dezintegracja ściany komórkowej, degradacja błon
i białek komórkowych. Dodatkowo w celu otrzymania DNA wolnego od RNA
stosuje się RNazę A. Po dodaniu soli chaotropowych, lizat przenoszony jest do
minikolumny ze złożem. Dwuetapowe przemywanie DNA związanego do złoża
ma na celu usunięcie pozostałych zanieczyszczeń i/lub inhibitorów reakcji
enzymatycznych. Oczyszczone DNA eluowane jest z minikolumny buforem
o niskiej sile jonowej lub wodą (pH 7,0-9,0) i gotowe jest do bezpośredniego
wykorzystania w technikach biologii molekularnej (takich jak PCR, QPCR, Southern
blotting, sekwencjonowanie DNA, trawienie enzymami restrykcyjnymi, ligacja
DNA itp.) lub może być przechowywane do późniejszego użycia.
Czas izolacji
ok. 40-60 minut
Czystość DNA
A 260/A280 = 1,7-2,0
VII. środki ostrożności
pp
pp
pp
www.dnagdansk.com
Hodowla bakteryjna jest biologicznym materiałem niebezpiecznym
ze względu na zawartość mikroorganizmów potencjalnie patogennych
lub substancji zagrażających zdrowiu, bądź życiu człowieka. Przy pracy
z hodowlami mikroorganizmów należy stosować się do wymogów
dotyczących biologicznych materiałów niebezpiecznych.
Zaleca się przeprowadzać całą procedurę izolacji w komorze II klasy
bezpieczeństwa biologicznego lub przy palniku laboratoryjnym, używać
ochronnej odzieży laboratoryjnej oraz rękawiczek jednorazowych.
Zalecane jest używanie jałowych końcówek z filtrami do pipet.
Nr kat. EM02
pp
pp
pp
Należy unikać dotykania ścianek minikolumn pipetą, aby nie przenosić
śladów DNA pomiędzy kolejnymi minikolumnami.
Odpady zawierające sole guanidyny mogą tworzyć wysoce reaktywne
że obniży to wydajność odzysku DNA . Istotne w tym przypadku jest dodanie
buforu elucyjnego centralnie na powierzchnię złoża.
W celu uzyskania maksymalnej wydajności elucji DNA , bufor elucyjny należy
związki w połączeniu z substancjami utleniającymi. W przypadku rozlania
buforu, powierzchnię zmyć wodą z detergentem.
W przypadku rozlania cieczy zawierającej mikroorganizmy, zanieczyszczoną
powierzchnię zmyć wodnym roztworem detergentu.
podgrzać do 80°C i wydłużyć czas inkubacji złoża z buforem do 10 minut.
Jeśli istotne jest odzyskanie całkowitego DNA z minikolumny można przeprowadzić
dodatkową elucję (200 μl). W tym przypadku należy powtórzyć punkty 19-21
Protokołu izolacji DNA (sekcja XI), umieszczając minikolumnę w nowej probówce
1,5 ml typu Eppendorf. Elution Buffer nie zawiera EDTA , którego obecność może
przeszkadzać w niektórych reakcjach enzymatycznych.
VIII. SZCZEGÓLNE ZALECENIA I UWAGI
www.dnagdansk.com
IX. PRZYGOTOWANIE PRÓBKI
Materiał
Wydajność izolacji i jakość wyizolowanego DNA mogą zależeć od: ilości komórek
bakteryjnych w materiale wyjściowym, typu komórki (morfologia), obecności
antybiotyków w pożywce, rodzaju pożywki, a także fazy wzrostu, wieku i stanu
komórek bakteryjnych.
Zestaw przeznaczony jest do izolacji DNA maksymalnie z 3 x 10 9 komórek
bakteryjnych. Użycie większej liczby komórek może spowodować drastyczny
spadek wydajności izolacji oraz czystości wyizolowanego DNA .
Zaleca się prowadzenie izolacji ze świeżej hodowli lub mrożonych osadów
bakteryjnych. Należy unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania materiału
przed izolacją. Użycie starego bądź wielokrotnie rozmrażanego materiału może
skutkować niską wydajnością izolacji wysokocząsteczkowego DNA .
Izolacja DNA z dużej liczby komórek
W przypadku izolacji DNA z dużej liczby komórek (≥ 109), powstały po zwirowaniu
osad należy dokładnie zawiesić w 450 μl BacL Buffer oraz zwiększyć ilości
dodawanych enzymów odpowiednio do 6 μl w przypadku RNase A i 15 μl
w przypadku Proteinase K. Kontynuować izolację od pkt. 6 Protokołu izolacji
DNA (sekcja XI).
Interakcje z buforem wiążącym BacB Buffer
Niektóre gatunki bakterii po dodaniu buforu wiążącego mogą tworzyć gęstą
zawiesinę przy powierzchni. W takim przypadku po inkubacji z BacB Buffer w 55°C
należy jak najdokładniej rozbić zawiesinę przez intensywne worteksowanie
lub rozpipetowanie. Następnie po zwirowaniu lizatu (nie naruszając osadu),
całość należy przenieść do minikolumny ze złożem i kontynuować izolację od
pkt. 11 Protokołu izolacji DNA (sekcja XI). Nie powinno to obniżyć wydajności
izolacji ani czystości DNA .
Izolacja DNA z 3 ml hodowli
Do 1,5 ml probówki typu Eppendorf przenieść 1,5 ml hodowli bakteryjnej i wirować
przy 5-6 tys. rpm (3-4 tys. × g). Zdekantować supernatant, a do powstałego osadu
dodać kolejne 1,5 ml hodowli i powtórzyć wirowanie. Powstały osad należy
dokładnie zawiesić w 450 μl BacL Buffer oraz zwiększyć ilości dodawanych
enzymów odpowiednio do 6 μl w przypadku RNase A i 15 μl w przypadku
Proteinase K. Kontynuować izolację od pkt. 6 Protokołu izolacji DNA (sekcja XI).
Nie zaleca się izolacji z większej objętości niż 3 ml hodowli.
Elucja DNA ze złoża
Optymalną objętość buforu elucyjnego (Elution Buffer) należy dobrać w zależności
Izolacja DNA z zamrożonego osadu komórkowego
Zamrożony osad należy bezzwłocznie zawiesić w 300 μl BacL Buffer. Nie należy
od liczby komórek użytych do izolacji oraz od oczekiwanego poziomu stężenia
DNA w eluacie. Zaleca się stosowanie 50-100 μl Elution Buffer przy izolacji
maksymalnie z 109 komórek oraz zwiększenie objętości buforu elucyjnego do
200 μl w przypadku większej liczby komórek.
Jeśli pożądane jest otrzymanie DNA o wysokim stężeniu, objętość buforu
elucyjnego można zmniejszyć nawet do 20 μl. Należy mieć jednak na uwadze,
doprowadzać do rozmrożenia osadu. Kontynuować izolację od pkt. 3 Protokołu
izolacji DNA (sekcja XI).
Izolacja DNA z hodowli płynnej
Przed pobraniem odpowiedniej objętości hodowli płynnej, zawiesinę komórek
należy dokładnie wymieszać.
Izolacja DNA z hodowli powierzchniowej
Do probówki 1,5 ml typu Eppendorf przenieść 300 μl BacL Buffer. Ezą pobrać
obfitą liczbę komórek z płytki Petriego i zawiesić w buforze. Kontynuować
izolację od pkt. 3 Protokołu izolacji DNA (sekcja XI).
Nr kat. EM02
X.
PRZED PRZYSTĄPIENIEM DO IZOLACJI
1.
2.
Każdy z odczynników zestawu należy wymieszać.
Należy pamiętać o rozpuszczeniu liofilizatu Proteinase K w odpowiedniej
ilości buforu do proteinazy (Proteinase Buffer) oraz liofilizatu RNase A w
odpowiedniej ilości buforu do RNazy (RNase Buffer).
W przypadku wytrącenia się osadu w buforach, butelkę z roztworem należy
ogrzać do temp. 50-60°C i inkubować, aż do całkowitego rozpuszczenia się
osadu, mieszając co kilka minut, a następnie schłodzić do temp. pokojowej.
Nagrzać termoblok lub łaźnię wodną do temp. 70°C.
Ogrzać odpowiednią ilość buforu elucyjnego do temp. 70°C.
Należy pamiętać, żeby wszystkie etapy izolacji przeprowadzać w temp.
pokojowej, jeśli nie zalecono inaczej.
Wszystkie etapy wirowania zostały zoptymalizowane
z wykorzystaniem mikrowirówki Eppendorf 5417C. Prędkości
wirowania podane w jednostkach rpm odnoszą się do tej mikrowirówki.
Izolacja z bakterii Gram-dodatnich
Przed przystąpieniem do izolacji DNA z bakterii Gram-dodatnich próbkę należy
poddać działaniu odpowiedniego enzymu. Do izolacji DNA z bakterii z rodzaju
Staphylococcus zaleca się stosowanie lizostafyny (RP12, RP125), a w przypadku
bakterii z rodzaju Enterococcus – lizozymu (RP13, RP135).
3.
Staphylococcus:
1. Odwirować 1,5 ml hodowli bakteryjnej*.
2. Supernatant zdekantować, a osad bakteryjny zawiesić w 200 μl TE **
(dokładnie rozpipetować).
3. Do zawiesiny komórek dodać 30 μl*** roztworu lizostafyny 400 U/ml
(RP12, RP125) i 4 μl RNase A, dokładnie wymieszać poprzez pipetowanie
lub worteksowanie.
4. Inkubować 20-60 minut *** w temp. 37°C.
5. Dodać 300 μl BacL Buffer i 17 μl Proteinase K, dokładnie wymieszać
przez worteksowanie.
6. Kontynuować izolację od pkt. 6 Protokołu izolacji DNA (sekcja XI).
W przypadku gęstych hodowli, izolację należy prowadzić z mniejszych objętości
hodowli bakteryjnej.
**
Bufor TE: 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8,0.
***
W przypadku gronkowców koagulazoujemnych należy używać 50 μl preparatu
lizostafyny i wydłużyć czas inkubacji z enzymem do 1 godziny.
*
Enterococcus:
1. Odwirować 1,5 ml hodowli bakteryjnej*.
2. Supernatant zdekantować, a osad bakteryjny zawiesić w 200 μl TE **
(dokładnie rozpipetować).
3. Do zawiesiny komórek dodać 40 μl roztworu lizozymu 100 mg/ml i 4 μl
RNase A, dokładnie wymieszać poprzez pipetowanie lub worteksowanie.
4. Inkubować 40-60 minut w 37°C.
5. Dodać 300 μl BacL Buffer i 17 μl Proteinase K, dokładnie wymieszać.
6. Kontynuować izolację od pkt. 6 Protokołu izolacji DNA (sekcja XI).
W przypadku gęstych hodowli, izolację należy prowadzić z mniejszych objętości
hodowli bakteryjnej.
**
Bufor TE: 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8,0.
*
www.dnagdansk.com
4.
5.
6.
7.
1.
Nr kat. EM02
XI. PROTOKÓŁ IZOLACJI
1. Zwirować 0,2-1,5 ml hodowli bakteryjnej przy 5-6 tys. rpm
(3-4 tys. × g) przez 5 min.
Można użyć większej objętości hodowli bakteryjnej. W tym przypadku
należy postępować według modyfikacji protokołu opisanej w sekcji IX.
Przygotowanie próbki.
15. Dodać do minikolumny 400 μl BacW Buffer i wirować 30 s
przy 10-12 tys. rpm (11-15 tys. × g).
2. Supernatant zdekantować, a osad bakteryjny dokładnie
zawiesić w 300 μl BacL Buffer.
16. Wyjąć minikolumnę, wylać przesącz i umieścić ponownie
minikolumnę w probówce odbierającej.
3. Dodać 4 μl RNase A i wymieszać przez worteksowanie.
17. Wirować 2 min przy 12-14 tys. rpm (15-21 tys. × g).
4. Inkubować 10 min w temp. 37°C.
18. Ostrożnie wyjąć suchą minikolumnę z probówki odbierającej
i umieścić ją w jałowej probówce 1,5 ml typu Eppendorf.
5. Dodać 10 μl Proteinase K i wymieszaćprzez worteksowanie.
6. Inkubować 10 min w temp. 55°C.
7. Dodać 350 μl BacB Buffer i dokładnie wymieszać.
8. Inkubować kolejne 5 min w temp. 55°C.
9. Po inkubacji próbkę intensywnie worteksować przez 15 s.
10. Wirować 2 min przy 10-12 tys. rpm (11-15 tys. × g).
11. Nie naruszając osadu delikatnie przenieść supernatant do
minikolumny ze złożem, umieszczonej w probówce odbierającej
i wirować 1 min przy 10-12 tys. rpm (11-15 tys. × g).
12. Przenieść minikolumnę do nowej probówki odbierającej (2 ml).
13. Dodać do minikolumny 600 μl buforu płuczącego BacW
Buffer i wirować 30 s przy 10-12 tys. rpm (11-15 tys. × g).
www.dnagdansk.com
14. Wylać przesącz z probówki odbierającej i umieścić w niej
ponownie minikolumnę.
Bufor płuczący zawiera alkohol, który może powodować inhibicję
niektórych reakcji enzymatycznych, a także obniżenie wydajności elucji,
dlatego istotne jest jego całkowite usunięcie przed etapem elucji.
19. Nanieść 50-100 μl Elution Buffer uprzednio ogrzanego
do 70 ° C central nie na z łoże w minikolumnie.
Możliwe jest zwiększenie objętości buforu elucyjnego. Więcej wskazówek
dotyczących tego etapu znajduje się w sekcji VIII. Szczególne zalecenia i uwagi.
20. Inkubować minikolumnę z buforem przez 2 min.
21. Wirować 1 min przy 10-12 tys. rpm (11-15 tys. × g).
22. Minikolumnę usunąć, a wyizolowane DNA przechowywać
w +4°C lub -20°C do czasu dalszych analiz.
Nr kat. EM03
XII. MOŻLIWE PROBLEMY I ICH ROZWIĄZYWANIE
Problem
Prawdopodobna
przyczyna
Rozwiązanie
Problem
Prawdopodobna przyczyna
Rozwiązanie
Niecałkowita liza
komórek bakteryjnych.
Za krótki czas lizy
dla danego rodzaju
i ilości materiału.
Należy wydłużyć inkubację w 55°C do 20 minut lub do
całkowitej lizy komórek.
Zatkane
złoże minikolumny.
Powstała zawiesina
DNA, która trudno
przechodzi przez złoże.
Wirowanie należy powtórzyć przez 1 min przy
14 tys. rpm lub maksymalnej prędkości wirowania.
Do izolacji wzięto za
dużą liczbę komórek.
Należy powtórzyć izolację z mniejszej objętości hodowli
lub zastosować się do zaleceń dotyczących izolacji DNA
z gęstych hodowli (sekcja IX. Przygotowanie próbki).
Niecałkowita liza komórek.
Patrz Problem „Niecałkowita liza
komórek bakteryjnych”.
Szczep użyty do izolacji
należy do bakterii Gramdodatnich.
Należy powtórzyć izolację stosując się do zaleceń
dotyczących izolacji DNA z bakterii Gram-dodatnich (sekcja
IX. Przygotowanie próbki).
Niskie stężenie
wyizolowanego DNA.
Za duża objętość
Elution Buffer.
Objętość buforu elucyjnego można zmniejszyć do 30 μl
bez obniżenia wydajności elucji.
Szczep użyty do
izolacji nie jest
szczepem bakteryjnym.
Należy potwierdzić prawidłowość identyfikacji
szczepu, a następnie zastosować odpowiedni zestaw do
izolacji DNA.
Wyizolowane DNA
jest podegradowane.
Nieprawidłowe warunki
przechowywania materiału.
Izolację należy prowadzić ze świeżych lub mrożonych
osadów komórkowych. Należy unikać częstego
zamrażania i rozmrażania materiału.
Po inkubacji z BacB
Buffer powstała gęsta
zawiesina na
powierzchni płynu.
Charakterystyczna
cecha danego
szczepu bakteryjnego.
Patrz „Interakcje z buforem wiążącym BacB Buffer” w sekcji
VIII. Szczególne zalecenia i uwagi.
Do izolacji użyto
starego materiału.
Zalecana jest izolacja ze świeżej hodowli nocnej.
Starsze hodowle bakteryjne mogą zawierać
podegradowane DNA.
Za krótki czas inkubacji
z RNazą A .
Należy wydłużyć czas inkubacji z RNazą A (pkt. 4) do
30 minut.
Niska wydajność
izolacji DNA.
Materiał
o niskiej zawartości
komórek bakteryjnych.
Zwiększyć objętość hodowli użytej do izolacji do 3 ml i/lub
zmniejszyć objętość buforu elucyjnego do 20 μl.
RNaza A jest nieaktywna.
Izolację należy powtórzyć dodając świeży roztwór
RNazy A. Upewnić się, że RNaza A jest przechowywana
w temp. +4°C.
Niecałkowita
liza komórek.
Patrz Problem „Niecałkowita liza komórek bakteryjnych”.
Niecałkowita elucja DNA .
Przed naniesieniem na złoże podgrzać Elution Buffer do
80°C. Nanieść Elution Buffer centralnie na powierzchnię
złoża. Wydłużyć czas inkubacji z Elution Buffer (powyżej
10 minut). Przeprowadzić powtórną elucję. Zwiększyć
objętość Elution Buffer użytego do elucji do 200 μl.
Niecałkowite wysuszenie
minikolumny z resztek
buforu płuczącego.
Izolację należy powtórzyć, zwracając szczególną
uwagę, aby po etapie „wirowania na sucho” (pkt.17)
nie pozostałotżadnych resztek buforu płuczącego
w minikolumnie.
Niewystarczająca ilość DNA
w eluacie.
Patrz Problem „Niecałkowita liza komórek
bakteryjnych” i „Niskie stężenie wyizolowanego DNA”.
Duża zawartość RNA w próbce.
Patrz Problem „Niecałkowita degradacja RNA”.
Niecałkowita degradacja
białek w związku z obniżoną
aktywnością proteinazy K.
Sporządzić świeży roztwór proteinazy K. Należy
upewnić się, że roztwór proteinazy K jest
przechowywany w temp. –20°C.
Pominięto jeden z dwóch
etapów płukania.
Izolację należy powtórzyć, pamiętając o obu
etapach płukania.
Niecałkowite wysuszenie
minikolumny z resztek
buforu płuczącego.
Izolację należy powtórzyć, zwracając szczególną
uwagę, aby po etapie „wirowania na sucho” (pkt.17)
nie pozostało żadnych resztek buforu płuczącego
w minikolumnie.
www.dnagdansk.com
Niecałkowita
degradacja RNA.
Niewłaściwe pH wody
(pH <7,0).
Do elucji użyć Elution Buffer.
Niecałkowite wysuszenie
kolumny z resztek
buforu płuczącego.
Izolację należy powtórzyć, zwracając szczególną uwagę,
aby po etapie „wirowania na sucho” (pkt.17) nie pozostało
żadnych resztek buforu płuczącego w minikolumnie.
Niewystarczające
zmieszanie lizatu
z buforem wiążącym
BacB Buffer.
Izolację należy powtórzyć zwracając uwagę na całkowite
zmieszanie lizatu z BacB Buffer przed inkubacją w 55°C
(pkt.8).
Obniżona aktywność
proteinazy K.
Sporządzić świeży roztwór proteinazy K. Należy upewnić się,
że roztwór proteinazy K jest przechowywany w temp. –20°C.
Reakcje enzymatyczne
z użyciem
wyizolowanego
DNA nie
zachodzą prawidłowo.
Wyizolowane DNA jest
niskiej czystości.
Nr kat. EM03
XIII. BEZPIECZEŃSTWO I POSTĘPOWANIE Z PRODUKTEM
BacL BUFFER
Uwaga
H315, H319, H335, P261, P305+P351+P338
BacB BUFFER
Niebezpieczeństwo
H302, H315, H318, H319, H411, P273, P280,
P305+P351+P338
BacW BUFFER
Niebezpieczeństwo
H225, H319, H336, P210, P261,
P305+P351+P338
PROTEINASE K
Niebezpieczeństwo
H315, H319, H334, H335, P261,
P305+P351+P338, P342+P311
RNase A
Uwaga
H319, P305+P351+P338
www.dnagdansk.com
H225 Wysoce łatwopalna ciecz i pary. H302 Działa szkodliwie po połknięciu. H315
Działa drażniąco na skórę. H318 Powoduje poważne uszkodzenie oczu. H319 Działa
drażniąco na oczy. H334 Może powodować objawy alergii lub astmy lub trudności
w oddychaniu w następstwie wdychania. H335 Może powodować podrażnienie
dróg oddechowych. H336 Może wywoływać uczucie senności lub zawroty głowy.
H411 Działa toksycznie na organizmy wodne, powodując długotrwałe skutki. P210
Przechowywać z dala od źródeł ciepła/ iskrzenia/ otwartego ognia/ gorących
powierzchni. Palenie wzbronione. P261 Unikać wdychania pyłu/ dymu/ gazu/
mgły/ par/ rozpylonej cieczy. P273 Unikać uwolnienia do środowiska. P280
Stosować rękawice ochronne/ odzież ochronną/ ochronę oczu /ochronę twarzy.
P305 + P351 + P338 W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ DO OCZU: Ostrożnie płukać
wodą przez kilka minut. Wyjąć soczewki kontaktowe, jeżeli są i można je łatwo
usunąć. Nadal płukać. P342 + P311 W przypadku wystąpienia objawów ze strony
układu oddechowego: Skontaktować się z OŚRODKIEM ZATRUĆ lub z lekarzem.
www.dnagdansk.com
BLIRT S.A ., ul. Trzy Lipy 3/1.38, 80–172 Gdańsk, www.dnagdansk.com
T: +48 58 739 61 50 F: +48 58 739 61 51 E: [email protected]