Wrocław, 2013-06-28 SZCZEGÓŁOWY PLAN ĆWICZEŃ Z MIKROBIOLOGII I MIKROBIOLOGII JAMY USTNEJ dla III ROKU WYDZIAŁU LEKARSKO-STOMATOLOGICZNEGO ROK AKADEMICKI 2013/2014 semestr zimowy WYKŁAD: Wtorek 11.30 – 13.00 ĆWICZENIA: Wtorek 8.00 – 9.30; 9.45 – 11.15 Piątek 9.45 – 11.15; 11.30 – 13.00 01.10.2013 (wtorek) 8.00-9.30; 9,45-11.15 ĆWICZENIE 1: MORFOLOGIA BAKTERII. TECHNIKA MIKROSKOPOWANIA Część teoretyczna: Zapoznanie studentów z organizacją pracy oraz zasadami BHP w czasie ćwiczeń. Omówienie morfologii bakterii. Podział preparatów: preparaty natywne (przyżyciowe) i utrwalone (barwione). Podział technik barwienia (proste, złożone; pozytywne, negatywne, pozytywno-negatywne). Część praktyczna: 1. Oglądanie preparatów przyżyciowych z hodowli Leptospira. 2. Oglądanie preparatu barwionego metodą fluorescencyjną z Toxoplasma gondii 3. Morfologia bakterii – oglądanie gotowych preparatów barwionych w mikroskopie świetlnym. 4. Sporządzanie i oglądanie preparatów z hodowli stałej Micrococcus barwionych metodą negatywną. 04.10.2013 (piątek) 9.45-11.15; 11.30-13.00 ĆWICZENIE 2: METODY BARWIENIA PREPARATÓW UTRWALONYCH Część teoretyczna: Omówienie technik barwienia preparatów utrwalonych: barwienie pozytywne proste – metoda Loefflera barwienie pozytywne złożone – metoda Grama barwienie pozytywno-negatywne – metoda Buri-Ginsa Część praktyczna: 1. Sporządzanie i oglądanie preparatów z kieszonek dziąsłowych natywnych i barwionych metodą Loefflera. 2. Sporządzanie i oglądanie preparatów z zawiesiny bakterii G(+) i G(-) (Staphylococcus aureus + Escherichia coli) barwionych metodą Grama. 3. Sporządzenie i oglądanie preparatów laseczek rodzaju Bacillus z hodowli agarowej barwionych metodą wybraną przez asystenta. 4. Barwienie metodą Buri-Ginsa (Klebsiella) 08.10.2013 (wtorek) 8.00-9.30; 9,45-11.15 ĆWICZENIE 3: PODSTAWY DIAGNOSTYKI CHORÓB ZAKAŹNYCH. WARUNKI HODOWLI I IDENTYFIKACJA BAKTERII. Część teoretyczna: 1. Warunki hodowli bakterii tlenowych i beztlenowych in vitro – wpływ temperatury, pH, potencjału oksydacyjno-redukcyjnego, egzogennych związków pokarmowych (czynniki wzrostowe). 3. Podział podłoży mikrobiologicznych (proste, wzbogacone, wybiórczo-różnicujące, różnicujące – demonstracja wzrostu w podłożu płynnym i na podłożu stałym. Część praktyczna: Posiew redukcyjny zawiesiny ziarniaków Gram (+) na podłożu Columbia agar z krwią. 1 Create PDF files without this message by purchasing novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Uwaga: Materiały do następnego ćwiczenia: Sterylizacja i dezynfekcja na stronie internetowej (www.mbio.am.wroc.pl) 15.10.2013 (wtorek) 8.00-9.30; 9,45-11.15 ĆWICZENIE 4: STERYLIZACJA I DEZYNFEKCJA Odczyt posiewu redukcyjnego z poprzedniego ćwiczenia. Część teoretyczna: Omówienie fizycznych i chemicznych metod sterylizacji i dezynfekcji (ze szczególnym uwzględnieniem sterylizacji sprzętu dentystycznego). Demonstracja: - Attesty – biologiczne metody kontroli sterylizacji, - pakowanie sprzętu do sterylizacji: pakiety, rękawy, - opakowania jednorazowe. Część praktyczna: 1. Bakteriobójcze działanie promieniowania UV. 2. Kontrola jałowości powietrza. 3. Działanie preparatów dezynfekcyjnych do higienicznego mycia rąk. Przygotowanie do następnego ćwiczenia: posiew redukcyjny na podłożu agarowym z krwią i 1/3 płytki MC: wymaz z ropnia okołozębowego, wymaz z migdałków, wymaz ze zmiany próchniczej. 18.10.2013 (piątek) 9.45-11.15; 11.30-13.00 ĆWICZENIE 5: GRAM(+) ZIARENKOWCE – (Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus) Odczyt wyników z poprzedniego ćwiczenia (sterylizacja, dezynfekcja). Odczyt posiewów wykonanych na poprzednim ćwiczeniu (wymazy z ropnia, migdałków, zmiany próchniczej); wykonanie preparatów barwionych metodą Grama. Omówienie diagnostyki zakażeń wywoływanych G(+) ziarniakami. Część teoretyczna: 1. Rola Staphylococcus spp. w zakażeniach implantów zębowych. 2. Rola Streptococcus spp. w patogenezie próchnicy. Część praktyczna: 1. Metody różnicowania G(+) ziarenkowców: Staphylococcus aureus, Staph. epidermidis, Staph. saprophyticus (test koagulazowy, test katalazowy, nowobiocyna). Streptococcus oralis, Strep. pyogenes, Strep. pneumoniae, Enterococcus spp. test wrażliwości na bacytracynę i optochinę, szereg biochemiczny dla enterokoków. Api20Strep. – do odczytu. 22.10.2013 (wtorek) 8.00-9.30; 9.45-11.15 ĆWICZENIE 6: PATOGENY GÓRNYCH DRÓG ODDECHOWYCH: Corynebacterium diphtheriae, Moraxella catarrhalis, Haemophilus influenzae. NOSICIELSTWO Neisseria meningitidis i Streptococcus pneumoniae SPRAWDZIAN I (materiał z ćwiczeń 1-5) Część teoretyczna: Charakterystyka patogenów górnych dróg oddechowych. Diagnostyka błonicy. Różnicowanie pałeczek Haemophilus spp. nosicielstwo Haemophilus influenzae i Streptococcus pneumoniae. Diagnostyka zapalenia opon mózgowo-rdzeniowych. 2 Create PDF files without this message by purchasing novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Część praktyczna: Oglądanie preparatów i hodowli omawianych patogenów. 25.10.2013 (piątek) 9.45-11.15; 11.30-13.00 ĆWICZENIE 7: LASECZKI GRAM-DODATNIE (Bacillus anthracis, Clostridium spp.) Część teoretyczna: Chorobotwórczość: Bacillus anthracis, Clostridium botulinum, Cl. tetani, Cl. perfringens, Cl. difficile Część praktyczna: Oglądanie preparatów i hodowli omawianych patogenów. 29.11.2013 (wtorek) 8.00-9.30; 9.45-11.15 ĆWICZENIE 8: GRUŹLICA (OBRAZ KLINICZNY, DIAGNOSTYKA, PROFILAKTYKA). NOKARDIOZA Część teoretyczna: Podział taksonomiczny i charakterystyka mykobakterii Postacie kliniczne gruźlicy, diagnostyka, szczepienia (BCG), próby tuberkulinowe Odporność śródzakaźna – fenomen Kocha Charakterystyka i chorobotwórczość Nocardia spp. Część praktyczna: Oglądanie preparatów plwociny od chorego prątkującego barwionych metodą: Ziehl-Neelsena, Czynnik wiązkowy (cord factor) – preparat oznaczanie wrażliwości prątków na tuberkulostatyki. 05.11.2013 (wtorek) 8.00-9.30; 9.45-11.15 ĆWICZENIE 9: G(+) i G(-) BAKTERIE BEZWZGLĘDNIE BEZTLENOWE: Actinomyces, Prevotella, Porphyromonas, Bacteroides, Fusobacterium Część teoretyczna: Chorobotwórczość G(-) bakterii bezwzględnie beztlenowych (Prevotella, Porphyromonas, Bacteroides, Fusobacterium). Charakterystyka Actinomyces israeli, symptomatologia, diagnostyka i leczenie promienicy. Rola innych promieniowców w patogenezie jamy ustnej (paradontoza, płytka nazębna). Część praktyczna: Oglądanie preparatów i hodowli omawianych patogenów. Przygotowanie do następnego ćwiczenia - posiew redukcyjny: ropa z rany pooperacyjnej, wymaz z odbytu (biegunka). 08.11.2013 (piątek) 9.45-11.15; 11.30-13.00 ĆWICZENIE 10: GRAM-UJEMNE PAŁECZKI FERMENTUJĄCE i NIEFERMENTUJĄCE Część teoretyczna: Omówienie chorobotwórczości pałeczek rodziny Enterobacteriaceae. Chorobotwórczość Pseudomonas aeruginosa. Demonstracja wzrostu pałeczek G(-) na podłożach wybiórczo-różnicujących Część praktyczna: Odczyt posiewów z poprzedniego ćwiczenia 3 Create PDF files without this message by purchasing novaPDF printer (http://www.novapdf.com) Demonstracja szeregów biochemicznych i testów ID32GN dla: E. coli, Klebsiella pneumoniae, Salmonella spp., Shigella spp., Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa. Przygotowanie do następnego ćwiczenia. Pobieranie materiałów własnych z jamy ustnej (gardło, migdałki, płytka nazębna, kieszonki dziąsłowe) – posiew tlenowy na podłoża: agar z krwią, Mac Conkey’a, Sabouraud. 12.11.2013 (wtorek) 8.00-9.30; 9.45-11.15 ĆWICZENIE 11: MIKROFLORA JAMY USTNEJ SPRAWDZIAN II (materiał z ćwiczeń 6-10) Część teoretyczna: Omówienie pozytywnej i negatywnej roli flory fizjologicznej (zakażenia endogenne). Część praktyczna: Odczyt własnych posiewów – oglądanie morfologii i zabarwienia kolonii, hemolizy, oglądanie preparatów barwionych metodą Grama, sporządzonych z różnych morfologicznie kolonii. Wykonanie preparatów natywnych z kieszonek dziąsłowych (mikroskop cpw). 15.11.2013 (piątek) 9.45-11.15; 11.30-13.00 ĆWICZENIE 12: CHOROBY PRZENOSZONE DROGĄ PŁCIOWĄ Część teoretyczna: 1. Podział zakażeń przenoszonych drogą płciową ze względu na etiologię: zakażenia bakteryjne: Treponema pallidum, Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus ducreyi, Mycoplasma, Ureaplasma, Chlamydia trachomatis. zakażenia wirusowe: HIV, HSV, HBV, HPV, Molluscum contagiosum. zakażenia grzybicze: Candida albicans. zakażenia pierwotniakowe: Trichomonas vaginalis. 2. Etiologia NGU. 3. Omówienie diagnostyki kiły i rzeżączki ze szczególnym uwzględnieniem zmian w jamie ustnej. Część praktyczna: Oglądanie preparatów: preparat srebrzony z T. pallidum – mikroskop świetlny. preparat z ropy rzeżączkowej – mikroskop świetlny. preparat Trichomonas vaginalis – mikroskop świetlny. preparat z Candida albicans – mikroskop świetlny. 19.11.2013 (wtorek) 8.00-9.30; 9,45-11.15 ĆWICZENIE 13: METODY BADANIA WRAŻLIWOŚCI BAKTERII NA ANTYBIOTYKI I CHEMIOTERAPEUTYKI Część teoretyczna: 1. Charakterystyka najważniejszych grup antybiotyków (mechanizm i sposób działania, spektrum przeciwbakteryjne, mechanizm(y) oporności, farmakokinetyka): β-laktamy, aminoglikozydy, makrolidy i ketolidy, linkozamidy, glikopeptydy, tetracykliny, tigecyklina, polimyksyny, oksazolidynony, fluorochinolony, sulfonamidy. 2. Oznaczanie wrażliwości bakterii na antybiotyki: metodą dyfuzyjno-krążkową, metodą seryjnych rozcieńczeń leku w bulionie Mueller-Hintona – demonstracja, omówienie pojęcia MIC i MBC, metodą E-testów, 4 Create PDF files without this message by purchasing novaPDF printer (http://www.novapdf.com) metodą ATB – antybiogram dla bakterii beztlenowych – demonstracja, oznaczanie wrażliwości Mycobacterium tuberculosis na tuberkulostatyki – demonstracja. Część praktyczna: Wykonanie testu wrażliwości (antybiogramu) dla wybranych patogenów: Staphylococcus aureus MRSA, Enterococcus faecalis HLAR, Klebsiella pneumoniae ESBL(+) 22.11.2013 (piątek) 9.45-11.15; 11.30-13.00 ĆWCZENIE 14: BADANIE MECHANIZMÓW OPORNOŚCI BAKTERII NA LEKI PRZECIWBAKTERYJNE Odczyt antybiogramów z poprzedniego ćwiczenia. Część teoretyczna: 1. Omówienie wybranych mechanizmów oporności bakterii na antybiotyki: MRS, VRE, GRE, HLAR, ESBL na podstawie wyników z poprzedniego ćwiczenia. Część praktyczna: Oznaczanie szczepów β-laktamazododatnich – metoda cefinazowa. Demonstracja oznaczania ESBL – metoda E-testu. 26.11. 2013 (wtorek) 8.00-9.30; 9,45-11.15 Ćwiczenie15: KANDYDOZA I INNE ZAKAŻENIA GRZYBICZE JAMY USTNEJ Część teoretyczna: Charakterystyka grzybów rodzaju Candida. Postacie kliniczne kandydozy w obrębie jamy ustnej: ostra kandydoza rzekomobłonowa, ostra kandydoza atroficzna (zanikowa), przewlekła kandydoza (atroficzna)zanikowa, przewlekła kandydoza rozrostowa (hiperplastyczna), przewlekła kandydoza błony śluzowej, zapalenie kątów ust. Omówienie diagnostyki zakażeń grzybami Candida sp. Aspergilloza zatok szczękowych. 1. 2. 3. 4. Część praktyczna: 1.Sporządzenie i oglądanie preparatu Candida albicans barwionego metodą Grama. 2.Test filamentacyjny – wykonanie i oglądanie preparatu natywnego. 3.Oglądanie chlamydospor i blastospor Candida albicans w mikrohodowli. 4. Chromagar Candida. 29.11.2013 (piątek) 9.45-11.15; 11.30-13.00 ĆWICZENIE 16: POBIERANIE I TRANSPORT MATERIAŁÓW DO BADAŃ BAKTERIOLOGICZNYCH, WIRUSOLOGICZNYCH i SEROLOGICZNYCH. DIAGNOSTYKA ZAKAŻEŃ STOMATOLOGICZNYCH – część I SPRAWDZIAN III (materiał z ćwiczeń 11-15) Część teoretyczna: omówienie zasad i warunków prawidłowego pobierania i przesyłania materiałów do badań mikrobiologicznych 5 Create PDF files without this message by purchasing novaPDF printer (http://www.novapdf.com) demonstracja urządzeń do pobierania różnorodnych materiałów diagnostycznych demonstracja podłoży transportowych omówienie warunków transportu materiałów do laboratorium mikrobiologicznego (czas, temperatura, zabezpieczenia) Część praktyczna: Diagnostyka zakażeń stomatologicznych – część I. Posiew materiałów diagnostycznych: 1. wymaz z ropnia po wprowadzeniu implantu (wszczepu) zębowego. 2. wymaz z gardła – rozpoznanie: atroficzne zapalenie błony śluzowej, 3. krew – rozpoznanie: zapalenie wsierdzia (endocarditis) po ekstrakcji zęba, 4. ropa z przetoki twarzowo-szyjnej w bulionie tioglikolanowym. 03.12.2013 (wtorek) 8.00-9.30; 9,45-11.15 ĆWICZENIE 17: DIAGNOSTYKA ZAKAŻEŃ STOMATOLOGICZNYCH – część II Część praktyczna: 1 Odczyt posiewów z poprzedniego ćwiczenia. 2. Identyfikacja czynników etiologicznych zakażeń stomatologicznych: wykonanie i odczyt testów różnicujących adekwatnie do wyizolowanego drobnoustroju (patogenu). 3. Demonstracja gotowych testów stosowanych w diagnostyce stomatologicznej: Dentocult SM Strip mutans – test paskowy do wykrywania Streptococcus mutans Dentocult LB – test paskowy do wykrywania Lactobacillus. 06.12.2013 (piątek) 9.45-11.15; 11.30-13.00 ĆWICZENIE 18: ZAKAŻENIA WIRUSOWE JAMY USTNEJ - SEMINARIUM Część teoretyczna: Wirusowe zakażenia w obrębie jamy ustnej: Herpesviridae Mumpsvirus Morbilivirus (plamki Koplika) wirusy Coxsackie A- herpangina Różyczka Część praktyczna – demonstracja i omówienie: 1. Efekt cytopatyczny linii komórkowej zakażonej wirusem. 2. Bakteriofagi. 3. odczyn Hirsta. 4. odczyn Hirsta-Salka (OZHA). 10.12.2013 (wtorek) 8.00-9.30; 9,45-11.15 ĆWICZENIE 19: Chlamydia, Mycoplasma, Rickettsia – udział w zakażeniach jamy ustnej SPRAWDZIAN IV (materiał z ćwiczeń 16, 17, 18 oraz 19 materiał bieżący) 13.12.2013 (piątek) 9.45-11.15; 11.30-13.00 ĆWICZENIE 20: Odrabianie nieobecności. Zaliczenie ćwiczeń. Wrocław, 2013-06-28 Odpowiedzialny za dydaktykę: dr hab. Grażyna Gościniak prof. nadzw. 6 Create PDF files without this message by purchasing novaPDF printer (http://www.novapdf.com)