Diagnostyka dzieci matek zakażonych HIV. S. Dobosz, M. Marczyńska. Klinika Chorób Zakaźnych Wieku Dziecięcego AM w Warszawie Wojewódzki Szpital Zakaźny w Warszawie, ul. Wolska 37, Oddział XI Diagnostyka Pierwsze badania (diagnostyka HIV) – oddział noworodkowy (do 5-tej doby życia). Materiał do badań: 1 probówka krwi żylnej 2 - 5 ml (nie może być krew pępowinowa) sterylnie pobrana, EDTA, transport do laboratorium w ciągu 24h, temp. pokojowa. Diagnostyka Kolejne badania - ośrodki zajmujące się diagnostyką dzieci matek HIV(+). Równoległa diagnostyka w kierunku wertykalnych zakażeń HIV, HCV, HBV. Materiał do badań: 1 probówka (HIV): 2 - 5 ml krew żylna (nie może być pępowinowa) sterylnie pobrana, EDTA, transport do laboratorium w ciągu 24h, temp. pokojowa. 2 probówka (HCV): 4 - 5 ml żylna, sterylnie pobrana na „skrzep”, transport do laboratorium w ciągu 24h, temp. 4o C. Diagnostyka Matczyne przeciwciała klasy IgG: przeciwciała anty- HIV do 18 - 24 m.ż., przeciwciała anty- HCV do 12 m.ż. Zakażenie wertykalne badania wirusologiczne. Diagnostyka zakażenia HIV u dzieci do 18 - 24 m.ż. Hodowla wirusa, oznaczenie HIV- RNA metodą PCR, oznaczenie antygenu p24 HIV, ocena wartości limfocytów T CD4+. Wiek dziecka / badanie 1 - 5 doba życia Badanie przedmiotowe ۷ 10 - 14 doba życia ۷ 30 dni życia ۷ Neurolog Morfologia krwi obwodowej ۷ Antygen p24, PCR-HIV, hodowla Wartość limf. T CD4 ۷ 2 - 3 mies. życia 7 mies. życia ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ٭۷ ٭۷ ۷ ۷ ٭۷ ٭۷ HCV-RNA AlAT ۷ Przeciwciała anty-HCV ۷ ٭۷ ٭۷ Przeciwciała anty-HIV Antygen HBs HBV-DNA, HBeAg, anty-HBc IgM > 12 mies. życia ۷ ۷ ٭۷ Diagnostyka zakażenia HIV u dzieci do 18 - 24 m.ż. Rozpoznanie zakażenia HIV dwukrotne stwierdzenia obecności wirusa, testem potwierdzenia może być ocena replikacji HIV (VL HIV- RNA). Diagnostyka zakażenia HIV u dzieci do 18 - 24 m.ż. Wykluczenie zakażenia HIV dwukrotnie negatywne wyniki badań wirusologicznych > 30 - go dnia życia (jedną lub więcej z wyżej wymienionych metod). Diagnostyka zakażenia HIV u dzieci > 24 m. ż. Rozpoznanie zakażenia HIV dwukrotne oznaczenie przeciwciał anty-HIV w testach immunoeznymatycznych i potwierdzenie wyniku testem referencyjnym (Western-blot) lub metodami wirusologicznymi. Diagnostyka wertykalnego zakażenia HCV Oznaczenie materiału genetycznego wirusa (HCV-RNA) metodą RT-PCR. Rozpoznanie zakażenia HCV co najmniej dwukrotna obecność HCV- RNA w pierwszym roku życia ( jedno > 6 m. ż.) i/lub obecność przeciwciał anty- HCV u dziecka >12 m. ż. Wiek dziecka / badanie 1 - 5 doba życia Badanie przedmiotowe ۷ 10 - 14 doba życia ۷ 30 dni życia ۷ Neurolog Morfologia krwi obwodowej ۷ Antygen p24, PCR-HIV, hodowla Wartość limf. T CD4 ۷ 2 - 3 mies. życia 7 mies. życia ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ٭۷ ٭۷ ۷ ۷ ٭۷ ٭۷ HCV-RNA AlAT ۷ Przeciwciała anty-HCV ۷ ٭۷ ٭۷ Przeciwciała anty-HIV Antygen HBs HBV-DNA, HBeAg, anty-HBc IgM > 12 mies. życia ۷ ۷ ٭۷ Diagnostyka wertykalnego zakażenia HCV Obserwacja co najmniej 24 miesięczna (do pełnego wykluczenia zakażenia) wiremia przejściowa, okresowa obecność HCV-RNA w surowicy, brak serokonwersji do anty-HCV. Przypadki niejasne diagnostycznie - obserwacja wieloletnia, kilkakrotne badania anty- HCV i HCV-RNA w surowicy oraz w mononuklearach krwi obwodowej (PBMC). Obserwacje własne Celem pracy jest: ocena częstości transmisji wertykalnej HCV u dzieci matek zakażonych HIV, określenie czynników wpływających na ryzyko odmatczynego zakażenia HCV. Pacjenci i metody: 52 dzieci urodzonych przez 52 matki HIV(+), od czerwca 2001r do września 2005r. Diagnostyka - niezależnie od posiadanej informacji o zakażeniu HCV u matki. Pełny schemat badań - 44 dzieci, 7 wypadło z obserwacji, 1 dziecko < 6 mies. życia. Pacjenci i metody: Analizowano: przebieg ciąży, rodzaj i czas trwania porodu, stan dziecka po urodzeniu, wagę urodzeniową, rodzaj profilaktyki zakażenia wertykalnego HIV u matki i dziecka. U 34 kobiet zbadano - poziom wiremii HCV HCV Monitor (Roche) zakres liniowości pomiaru: 6,0x102 - >7,0x105. Wyniki: Obecność przeciwciał anty- HCV (1m.ż) stwierdzono u 40/52 dzieci (76,9%) ELISA III generacji (Pointe). Obecność materiału genetycznego HCV stwierdzono u 7/52 (13,4%) Cobas Amplicor HCV v2.0 (Roche). u jednego - wiremia przejściowa HCV, 6 dzieci - przewlekłe zakażenie HCV. Zakażenie HIV rozpoznano u 4 dzieci, u żadnego nie rozpoznano współzakażenia HCV. Wyniki: U 24/34 kobiet stwierdzono wysoką wiremię HCV (> 105 kopii/ml). Stwierdzono statystycznie istotną zależność pomiędzy transmisją wertykalną HCV a VL HCV u matki (2(1)=2,70, p<0,05). Do transmisji wertykalnej HCV doszło u dzieci matek z wiremią > 105 kopii/ml. Wiremia HCV (kopii/ml) 10000000 liczba kopii w ml 1000000 100000 10000 1000 100 10 1 Badano 34 kobiety Wyniki: U 10 kobiet - cięcie cesarskie ze wskazań nagłych (3 dzieci - zakażonych HCV, 1 – HIV). U 6 kobiet – cięcie cesarskie elektywne (wszystkie dzieci zdrowe). U 2 kobiet - poród fizjologiczny przedłużony >4h od odejścia wód płodowych (1 dziecko zakażone HCV). Wykazano statystycznie istotną zależność pomiędzy transmisją HCV a porodem przedłużonym i cięciem cesarskim ze wskazań nagłych (2(1)=5,01, p<0,05). Wnioski: Wszystkie dzieci matek zakażonych HIV wymagają diagnostyki w kierunku wertykalnego zakażenia HCV. Czynniki ryzyka transmisji wertykalnej HCV: wysoka wiremia HCV u matki (>105 kopii/ml), poród fizjologiczny przedłużony >4h od odejścia wód płodowych, cięcie cesarskie ze wskazań nagłych. Diagnostyka wertykalnego zakażenia HBV. Pierwsza doba życia immunoglobulina anty-HBs (HBIG) oraz pierwsza dawka szczepienia przeciwko wzw - B. Co najmniej dwukrotne oznaczenie HBsAg (w 2 i 6 m.ż.). HBsAg (+) HBeAg, anty- HBc IgM, HBV-DNA, aktywność AlAT. Wiek dziecka / badanie 1 - 5 doba życia Badanie przedmiotowe ۷ 10 - 14 doba życia ۷ 30 dni życia ۷ Neurolog Morfologia krwi obwodowej ۷ Antygen p24, PCR-HIV, hodowla Wartość limf. T CD4 ۷ 2 - 3 mies. życia 7 mies. życia ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ٭۷ ٭۷ ۷ ۷ ٭۷ ٭۷ HCV-RNA AlAT ۷ Przeciwciała anty-HCV ۷ ٭۷ ٭۷ Przeciwciała anty-HIV Antygen HBs HBV-DNA, HBeAg, anty-HBc IgM > 12 mies. życia ۷ ۷ ٭۷ Wiek dziecka / badanie 1 - 5 doba życia Badanie przedmiotowe ۷ 10 - 14 doba życia ۷ 30 dni życia ۷ Neurolog Morfologia krwi obwodowej ۷ Antygen p24, PCR-HIV, hodowla Wartość limf. T CD4 ۷ 2 - 3 mies. życia 7 mies. życia ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ۷ ٭۷ ٭۷ ۷ ۷ ٭۷ ٭۷ HCV-RNA AlAT ۷ Przeciwciała anty-HCV ۷ ٭۷ ٭۷ Przeciwciała anty-HIV Antygen HBs HBV-DNA, HBeAg, anty-HBc IgM > 12 mies. życia ۷ ۷ ٭۷