FOSFORYLACJA OKSYDACYJNA - PREZENTACJA.doc (46 KB) Pobierz 2. Fosforylacja oksydacyjna – proces syntezy ATP, zachodzÄ…cy w wyniku przeniesienia elektronĂłw NADH lub FADH2 na O2 przez szereg przenoĹ›nikĂłw elektronĂłw (w Ĺ‚aĹ„cuchu oddechowym).  GĹ‚Ăłwne ĹşrĂłdĹ‚o ATP w organizmach tlenowych.  Z 30 ATP powst. Podczas utleniania glukozy 26 pochodzi z fosforylacji oksydacyjnej.  3. Przebieg: PrzepĹ‚yw elektronĂłw z NADH i FADH2 do O2 przez kompleksy biaĹ‚kowe w wewn bĹ‚onie mitochondriĂłw, powoduje wypompowanie protonĂłw z matriks mitochondrialnej powstaje siĹ‚a protomotoryczna skĹ‚adajÄ…ca siÄ™ z: gradientu pH i transbĹ‚onowego potencjaĹ‚u elektrycznego. Synteza ATP zachodzi na skutek powrotnego przepĹ‚ywu protonĂłw przez kompleks enzymatyczny do matriks mit. Utlenianie sprzężone jest z fosforylacjÄ… dziÄ™ki gradientowi protonowemu wytworzonemu w poprzek bĹ‚ony mit. IstotÄ™ fosforylacji Oks stanowi przeksztaĹ‚cenie siĹ‚y elektromotorycznej w siĹ‚Ä™ protonomotorycznÄ…, a nastÄ™pnie w potencjaĹ‚ fosforylacyjny. 4. W pierwszej fazie biorÄ… udziaĹ‚ 3 pompy protonowe napÄ™dzane elektronami: reduktaza NADH-Q, reduktaza cytochromowa i oksydaza cytochromowa. W ich skĹ‚ad wchodzÄ… zĹ‚oĹĽone centra oksydoredukcyjne zaw.flawiny, chinony, centra ĹĽelazowo-siarkowe, hemy, jony miedzi. 5. W drugiej fazie uczestniczy synteza ATP, ktĂłra syntetyzuje ATP w nastÄ™pstwie przepĹ‚ywu protonĂłw z powrotem do matriks mit. Fosf Oks stanowi dobitny przykĹ‚ad, ĹĽe gradienty protonowe odpowiedajÄ… w ukĹ‚adach biologicznych za odwracalny przepĹ‚yw energii swobodnej.   Fosforylacja Oks u org tlenowych zachodzi na went bĹ‚onie mitochondriom – maĹ‚o przepuszczalna, ma stronÄ™ cytoplazmatyczna i matriksowÄ… W org prokariotycznych pompy protonowe napÄ™dzanie elektronami i kompleks syntetyzujÄ…cy ATP sÄ… umiejscowione w bĹ‚onie cytoplazmatycznej, wewnÄ™trznej z dwĂłch bĹ‚on.   Podczas fosf Oks potencjaĹ‚ przenoszenia elektr NADH lub FAD2 ulega przeksztaĹ‚ceniu w potencjaĹ‚ przenoszenia fosforanĂłw ATP(potencjaĹ‚ fosforanowy ATP)  6. Silne reduktory, jak NADH wykazujÄ… ujemny potencjaĹ‚ redukcyjny, a silne utleniacze, jak O2 majÄ… potencjaĹ‚ dodatni. Transport elektronĂłw przez Ĺ‚aĹ„cuch oddechowy jest wymuszony różnicÄ… potencjaĹ‚u miÄ™dzy NADH i O2 wynoszÄ…cÄ… 1,14V.  7. W skĹ‚ad Ĺ‚aĹ„ odd wchodzÄ… 3 pompy protonowe poĹ‚aczone dwoma ruchomymi przenoĹ›nikami elektronĂłw: reduktaza NADH-Q, reduktaza cytochromowa i oksydaza cytochromowa. PrzepĹ‚yw elektronĂłw przez te transbĹ‚onowe kompleksy powoduje pompowanie protonĂłw w poprzek wewn bĹ‚ony mit. Do grup przenoszÄ…cych elektrony naleĹĽÄ…: flawiny, centra ĹĽelazo-siarkowe, hemy i jony miedzi. 8. -Elektrony przenoszone sÄ… z reduktazy NADH-Q do drugiego kompleksu Ĺ‚aĹ„cuchareduktazy cytochromowej, przez zredukowanÄ… formÄ™ ubichinonu (Q), hydrofobowego chinonu szybko dyfundujÄ…cego w bĹ‚onie mit. - Ubichinon rĂłwnieĹĽ przenosi elektrony z FADH2(wytworzonego na przykĹ‚ad podczas utleniania bursztynianu w cyklu kwasu cytrynowego) do reduktazy cytochromowej. - MaĹ‚e biaĹ‚ko – cytochrom c- przerzuca elektrony z reduktazy cytochromowej na oksydazÄ™ cytochromowÄ… bÄ™dÄ…cÄ… koĹ„cowym skĹ‚adnikiem Ĺ‚aĹ„cucha.  9. Reduktaza NADH-Q nazywana kompleksem I – przejĹ›cie 2 elekt z NADH-Q powoduje wypompowanie 4 H+ z matriks na cytoplazmatycznÄ… stronÄ™ wewn bĹ‚ony mit. Choroby: kilka rodzajĂłw mutacji reduktazy NADH-Q powouje dziedzicznÄ… wzrokowÄ… neuropatiÄ™ Lebera- utrata wzroku dziedziczona na drodze matczynej, pojawiajÄ…ca siÄ™ zazwyczaj w wieku Ĺ›rednim.  Reduktaza bursztynian-Q – kompleks II (nie pompuje protonĂłw) – miejsce wejĹ›cia takĹĽe dla elektronĂłw z FADH2, FADH2 nie opuszcza kompleksu  Reduktaza cytochromowa – kompleks III – hem jako grupa prostetyczna, przejĹ›cie pary elektr przez ten kompleks powoduje przetransportowanie netto 2H+ na str cytoplazmatycznÄ….  Oksydaza cytochromowa – kompleks IV – kat. Przeniesienie elektr z ferro-cytochromu c (forma zredukowana) do akceptora koĹ„cowego, ktĂłrym jest tlen czÄ…steczkowy. PrzyjÄ™cie 4 elektr przez O2 powoduje jego caĹ‚kowitÄ… redukcjÄ™ do H2O z rĂłwnoczesnym wypompowaniem protonĂłw z matriks na cytoplazmatycznÄ… stronÄ™ wewn bĹ‚ony mit. Podczas przejĹ›cia pary elektr przez oksydazÄ™ przepompowywane sÄ… 4 protony.  Nie znany jest mechanizm przeksztaĹ‚cajÄ…cy potencjaĹ‚ elektronĂłw w siĹ‚Ä™ protonomotorycznÄ…. Transport elektronĂłw w Ĺ‚aĹ„ odd jest hamowany przez specyficzne inhibitory. (rys str 580)  10. Utlenianie jest sprzężone z fosforylacjÄ… przez siĹ‚Ä™ protonomotorycznÄ…. Energia swobodna utleniania jest wykorzystywana do procesu endoergicznego, jakim jest synteza ATP ADP + Pi + H+ > ATP + H2O SyntezÄ… ATP przeprowadza zespół podjednostek umiejscowiony w wewnÄ™trznej bĹ‚onie mit. Ten kompleks enzymatyczny nazwano: mitochondrialnÄ… ATPazÄ… lub ATPazÄ… H+, obecnie nazywa siÄ™ go syntetaza ATP. 11. W jaki sposĂłb utlenianie NADH sprzężone jest z fosforylacjÄ… ATP? 12. PoczÄ…tkowo sÄ…dzono, ĹĽe transport elektronĂłw prowadzi do utworzenia kowalencyjnego intermedia tu wysokoenergetycznego, ktĂłry miaĹ‚by sĹ‚uĹĽyć jako prekursor ATP. PrĂłbowano wyizolować domniemane intermedia ty, ale ich nie znaleziono. W 1961r. Peter Mitchell przedstawiĹ‚ hipotezÄ™ chemiosmotycznÄ…. MĂłwiĹ‚ on, ĹĽe: SiĹ‚a protonomotoryczna jest czynnikiem napÄ™dzajÄ…cym syntezÄ™ ATP przez kompleks ATPazy. IstotÄ™ jego koncepcji moĹĽna tak przedstawić w skrĂłcie: pierwszym stadium zachowania energii jest wytworzenie siĹ‚y protonomotorycznej w poprzek wewnÄ™trznej bĹ‚ony mitochondrialnej, indukowane przez transport elektronĂłw. Czyli sprzężenie utleniania z fosforylacjÄ… przez gradient protonowy.  13. ATP jest syntetyzowany przez kompleks enzymatyczny zĹ‚oĹĽony z kanaĹ‚owej podjednostki F0 przewodzÄ…cej protony i katalitycznj podjednostki F1. 14 F1: -katalizuje syntezÄ™ ATP - zawiera 5 rodzajĂłw Ĺ‚aĹ„cuchĂłw polipeptydowych - masa czÄ…st. 387kDa  F0: - hydrofobowy segment zakotwiczony w bĹ‚onie mitochondrialnej stanowiÄ…cy kanaĹ‚ protonowy kompleksu - 4 rodzaje Ĺ‚aĹ„cuchĂłw polipeptydowych 15 Trzonek Ĺ‚Ä…czÄ…cy F0 i F1 zawiera jeszcze kilka innych biaĹ‚ek. Jedno z nich decyduje o wraĹĽliwoĹ›ci kompleksu na oligomycynÄ™, antybiotyk, ktĂłry przeszkadzajÄ…c w wykorzystaniu gradientu protonowego, hamuje syntezÄ™ ATP. 16 RYSUNEK I OMĂ“WIONY PRZEBIEG PrzepĹ‚yw protonĂłw przez syntazÄ™ ATP powoduje uwolnienie Ĺ›ciĹ›le zwiÄ…zanego ATP. Syntaza ATP katalizuje reakcjÄ™: ADP3- + Pi2- + H+ > ATP4- + H2O W rzeczywistoĹ›ci ADP i ATP wystÄ™pujÄ… w formie skompleksowanej z Mg2+. KoĹ„cowy atom tlenu ADP atakuje atom fosforu Pi, wskutek czego powstaje intermedia pentakowalencyjny, ktĂłry nastepnie dysocjuje do ATP i H2O        (RYS) Paul Boyer odkryĹ‚ ĹĽe: RolÄ… gradientu protonowego nie jest udziaĹ‚ w syntezie ATP, lecz odĹ‚Ä…czenie nukleotydu od syntazy, bo ATP tworzy siÄ™ rĂłwnieĹĽ podczas nieobecnoĹ›ci siĹ‚y protonomotorycznej. Miejsca wiÄ…ĹĽÄ…ce nukleotydy w tym enzymie oddziaĹ‚ujÄ… na siebie. WiÄ…znie ADP i Pi do jednego miejsca pobudza usuniÄ™cie ATP z drugiego miejsca, czyli synteza ATP wykazuje tzw. kooperatywność katabolicznÄ…. 17 Boyer zaproponowaĹ‚ model konformacyjnego mechanizmu syntezy ATP napÄ™dzanej przez protony. (RYS.) 3 miejsca katalityczne: O- forma otwarta – ma znikome powinowactwo do substratĂłw L – wiÄ…ĹĽe substraty luĹşno i nie wykazuje aktywnoĹ›ci katalitycznej T – wiÄ…ĹĽe substraty bardzo silnie i jest aktywne RozwaĹĽmy czÄ…st enzymu, w ktĂłrej ATP zwiÄ…zany jest z miejscem T. W tym czasie ADP i Pi zwiÄ…zane sÄ…Â z miejscami L. Energia wniesiona przez przepĹ‚yw protonĂłw przemienia miejsce T w O, L w T, a O w L. Protony przepĹ‚ywajÄ… przez bĹ‚onÄ™ F0 do miejsca katalitycznego F1, tylko wtedy, gdy O, L i T wzajemnie w siebie przechodzÄ…! Te przejĹ›cia sÄ… powiÄ…zane najprawdopodobniej przez zmiany w oddziaĹ‚ywaniu miÄ™dzy podjednostkami.   18. -SiĹ‚a protonomotoryczna napÄ™dzajÄ…ca syntezÄ™ ATP jest sumÄ… dwĂłch skĹ‚adowych: gradientu pH i potencjaĹ‚u bĹ‚onowego. -Dodatni potencjaĹ‚ bĹ‚onowy przyczynia siÄ™ do syntezy ATP dziÄ™ki tworzeniu lokalnie duĹĽego stężenia H+ w miejscu poĹ‚Ä…czenia F0 z F1 stanowiÄ…cego dla nich barierÄ™: jest charakterystyczne, ĹĽe 0,18V prowadzi do powstania takiego samego gradientu stężeĹ„, jak różnica 3 jednostek pH pomiÄ™dzy obu stronami. - Przeniesienie 3 H+ przez syntezÄ™ powoduje utworzenie 1 czÄ…steczki ATP.  (RYS)  19 SkÄ…d ADP? translokaza ATP-ADP w bĹ‚onie mit – umoĹĽliwia transport ADP do Ĺ›rodka jedynie w powiÄ…zaniu transportu ATP na zewn. SkÄ…d Pi? PrzenoĹ›nik di karboksylowy umoĹĽliwia przechodzenie jabĹ‚czanu, bursztynianu i Dumaranu przez wewn bĹ‚ mit na wymianÄ™ z Pi.  20. O szybkoĹ›ci fosforylacji oksydacyjnej decyduje zapotrzebowanie na ATP. Decyduje tu gĹ‚Ăłwnie poziom ADP – regulacja szybkoĹ›ci fosforylacji oksydacyjnej przez poziom ADP nazywa siÄ™ kontrolÄ… oddechowÄ…. Takie zwiÄ…zki jak np. DNP, ktĂłre przenoszÄ… protony w poprzek wewn bĹ‚ony mit, niszczÄ… gradient protonowy. Plik z chomika: LycorisCaldwelli Inne pliki z tego folderu: wykĹ‚ady z biochemii - I sem(1).docx (621 KB) Prezentacja - metabolizm glikogenu.ppt (35317 KB) Serotonina.ppt (292 KB) Synteza_i_rozpad_glikogenu_-seminarium.pptx (6058 KB) SZLAK_PENTOZOFOSFORANOWY-to_co_czyt.ppt (1371 KB) Inne foldery tego chomika: Anatomia Biofizyka Chemia Genetyka Histologia ZgĹ‚oĹ› jeĹ›li naruszono regulamin Strona gĹ‚Ăłwna AktualnoĹ›ci Kontakt DziaĹ‚ Pomocy Opinie Regulamin serwisu Polityka prywatnoĹ›ci Copyright © 2012 Chomikuj.pl