Zapobieganie chorobie brązowienia kapelusza pieczarki wywoływanej przez wirus X The research leading to these results has received funding from the European Union Seventh Framework Programme (FP7/2007-2013) under grant agreement No. 286836. Factsheet 02/15 Caoimhe Fleming-Archibald, Teagasc, Ireland, Kerry Burton, East Malling Research, UK and Helen Grogan, Teagasc, Ireland. Chorobie brązowienia pieczarki towarzyszy pojawienie się owocników brązowych bądź szarawych w uprawie odmiany białej. To przebarwienie stanowi najbardziej charakterystyczny objaw choroby wywoływanej przez wirusa X (MVX), a dotyczy przede wszystkim upraw prowadzonych na podłożu fazy III. Choroba MVX wywołuje także szereg innych objawów, wśród których najważniejsze to opóźnienie tworzenia zawiązków i niskie plony. Omawiana choroba kojarzona jest zwykle ze znanym wirusem ‘Agaricusbisporus Virus 16 (AbV16)’ lub ‘Wirusem brązowienia kapelusza pieczarki (BCMV)’. Niniejsze opracowanie przedstawia zmiany wywołane przez chorobę, jej przyczyny i zwalczanie. The research leading to these results has received funding from the European Union Seventh Framework Programme (FP7/2007-2013) under grant agreement No. 286836. 1. Typowe objawy brązowienia owocników pieczarki odmiany białej Główne zalecenia Dla kompostowni • Parować lub pasteryzować tunele przed załadunkiem każdej partii podłoża fazy III. • Tam, gdzie to możliwe, załadunek i opróżnianie tuneli fazy III prowadzić z przeciwległych stron za pomocą sprzętu przeznaczonego do obsługi każdej strony tunelu. Unika się wtedy wzajemnych zakażeń. • Zapewnić wysoki poziom higieny podczas wysiewu grzybni, a wykonująca go grupa powinna pozostawać w tym czasie odizolowana od reszty zakładu. • Przed użyciem oczyścić z resztek podłoża i umyć sprzęt używany do załadunku oraz podłogi. • Okresowo sprawdzać podłoże fazy III na obecność wirusów. Dla firm transportowych • Przyczepy, ładowarki czołowe, hoppery i inne maszyny przemieszczające się w ramach zakładu powinny być często myte i dezynfekowane (wewnątrz i na zewnątrz) –koniecznie przed rozpoczęciem każdego nowego zadania. Dla pieczarkarni • Po zakończeniu każdego cyklu uprawy zdezynfekować termicznie hale. Podnieść temperaturę podłoża do 6570oC i utrzymać ją na tym poziomie przez 8 godzin. Po usunięciu podłoża z hali oczyścić i odkazić posadzkę. • Dokładnie oczyścić z pozostałości podłoża, zdezynfekować i spłukać wszystkie urządzenia • Powierzchnie betonowe i korytarze umyć oraz zdezynfekować po każdym dniu pracy. • Usunąć dokładnie pozostałe po zbiorze trzony i resztki grzybów. • Maszyny, urządzenia i personel biorący udział w załadunku fazy III odseparować. Załadunek świeżej fazy III powinien odbywać się w odosobnieniu. • Powierzchnie betonowe i korytarze wewnętrzne powinny zostać umyte i zdezynfekowane po zakończeniu każdego dnia pracy. • Każdego dnia po zakończeniu zbiorów usunąć wszystkie odpady (obcięte trzony, resztki grzybów itp.) • Sprawdzać okresowo na obecność wirusa grzyby i podłoże II i III fazy. • i maszyny ( taśmociągi, ładowarki i czesarki) przed i po użyciu. Warunki sprzyjające rozwoju choroby Choroba brązowienia kapelusza pojawia się sporadycznie każdego roku i zwykle dotyczy podłoża fazy III luzem. Jej pojawienie się wiąże się z łamaniem procedur higienicznych np. pozostawieniem resztek podłoża na maszynach, sprzęcie i pojazdach oraz „niegotowaniem” hal po zakończonym cyklu uprawowym. Rygorystyczne przestrzeganie zasad higieny pozwala na ograniczenie choroby, stanowiąc efektywne narzędzie jej zwalczania. Zakażenie może nastąpić w kompostowni, w hali uprawowej, a także podczas przewożenia podłoża, jego załadunku i wyładunku. Dlatego na wszystkich podmiotach branży pieczarkarskiej ciąży współodpowiedzialność za minimalizowanie prawdopodobieństwa rozprzestrzeniania się infekcji. Objawy Objawy choroby X wykazują dużą zmienność. • Mogą one wystąpić tylko w jednym rzucie (często w pierwszym), mogą być widoczne na półkach przed zbiorem, w czasie zbioru grzybów lub po umieszczenia ich w chłodni. • Objawy mogą pojawić się też w postaci słabo widocznych zmian na kapeluszu (jego “odbielenie” lub “kremowość”), co zwykle trudno wykryć. • Bywa, że grzyby wykazują intensywniejsze zabarwienie, od blado-kremowego do ciemnobrązowego, kawowego. Zmiany koloru dotyczą pojedynczych owocników, ale mogą objąć i 80% rzutu. • Nawet kilku brązowych grzybów nie należy lekceważyć, gdyż może to oznaczać, że uprawę i/lub podłoże zaatakował wirus X, a podłoże takiej uprawy może być źródłem rozprzestrzeniania się infekcji. Dlatego tak ważne jest utrzymywanie wysokich standardów higienicznych, a nawet podjęcie decyzji o parowaniu hal. 2. Kilka “brązowych” grzybów na półce z białymi pieczarkami • Niekiedy jedynym symptomem wirusa jest niska jakość plonu oraz towarzysząca mu skłonność do przedwczesnego otwierania się kapeluszy. 3. Niska jakość “przebarwionych” pieczarek 4. Brązowienie po zbiorze i przedwczesne otwarcie się kapeluszy Biologia i epidemiologia Dotąd w owocnikach pieczarki zidentyfikowano dziewiętnaście wirusów (tabela 1). Wiele z nich stwierdzono w „zdrowej” uprawie i nie kojarzy się ich z chorobą. Wirus pieczarki dwuzarodnikowej Agaricus bisporus Virus 1 (AbV1) odpowiada za chorobę wirusową La France. Obecnie nie występuje ona powszechnie ze względu na podjęte działania higieniczne w branży, a szczególnie upowszechnienie „gotowania” hal. Inne wirusy: AbV6 i pałeczkowaty wirus pieczarki (ang. MBV), mogą uczestniczyć w brązowieniu owocników. Niskie stężenie wirusa AbV16 (odpowiedzialnego za brązowienie pieczarek) w owocnikach wywołuje zmiany barwy od „czystej bieli” do „złamanej bieli”, niewykrywalne gołym okiem. Same owocniki mogą spełniać kryteria jakościowe. Gdy jednak wirus AbV16 osiągnie wysoki poziom, grzyby przybiorą różne odcienie barwy brązowej. Część dotychczas zidentyfikowanych wirusów może odpowiadać za opóźnione tworzenie zawiązków i objawy choroby X. Wymaga to dalszych badań. Tabela 1. Lista wirusów porażających pieczarkę Poprzednio rozpoznane wirusy: AbV1 Odpowiedzialny za chorobę La France (znany też jako LIV) MBV Mushroom Bacilliform Virus – łączony z innymi chorobami wirusowymi, w tym La France (po polsku należałoby używać nazwy pałeczkowaty wirus pieczarki) AbEV1 A. bisporus Endornavirus 1 – poprzednio łączony z zespołem MVX AbSV A. bisporus Spherical Virus (wirus kulisty) AbMV1 A. bisporus Mitochondrial Virus 1 ( mitochondrialny wirus 1) Nowo rozpoznane wirusy AbV16 (BCMV Odpowiedzialny za chorobę brązowienia kapelusza czyli Wirus X) AbV6 Także związany z wymienioną chorobą Inne wirusy o nieznanym oddziaływaniu: AbV2, AbV3, AbV5, AbV7, AbV8, AbV9, AbV10, AbV11, AbV12, AbV13, AbV14, AbV15 Źródła infekcji Źródłem wirusa X może być grzybnia, podłoże lub okrywa. Inne źródła czynnika chorobotwórczego stanowią resztki grzybów lub zarodniki pieczarki pochodzące z zakażonej uprawy. Najbardziej niebezpiecznym okresem szerzenia się infekcji jest okres wyładunku podłoża z tuneli Około 3% próbek podłoża fazy III pobranych w kompostowniach podczas opróżniania tuneli dało pozytywny wynik na obecność wirusa AbV16. Próbki grzybów i podłoża dały pozytywny wynik dla AbV16 w 9 w 17 zakładów uprawowych. Tabela 2 pokazuje zbiorcze wyniki dla zakładów, w których wystąpił AbV16. i jego załadunku do hal uprawowych. Wtedy bowiem na podłoże oddziałują czynniki zewnętrzne. Tabela 2. Wyniki testów na obecność AbV16 w badanych europejskich zakładach pieczarkarskich Zakłady sprawdzane w latach 2012 -2014 Obecność AbV16 6 kompostowni W 3 zakładach wystąpił AbV16 11 z 351 próbek (3%) podłoża fazy III zawierało AbV16 17 zakładów uprawowych W 9 zakładach wystąpił AbV16 10 z 63 próbek (16%) wykazało obecność AbV16 (grzyby i/lub podłoże) Jeśli podłoże po uprawie i okrywa z zakażoną grzybnią pieczarki zostaną zdezynfekowane termicznie, nie będą stanowić w przyszłości źródła choroby. Zakażenia poprzez zakażone fragmenty podłoża (lub okrywy) mogą przebiegać następująco: • Resztki zakażonego materiału mogą przedostać się do tuneli fazy III podczas siewu grzybni lub przerostu podłoża. • Zainfekowane podłoże fazy III może zakazić pojazdy transportowe i urządzenia do załadunku, w tym taśmociągi i ładowarki, które są trudne do dezynfekcji. • Uprawa, której nie poddano działaniu pary stanowi źródło zakażeń, gdyż zawierające wirusy fragmenty podłoża i okrywy będą krążyć po zakładzie, by następnie osiąść na maszynach do załadunku i nakładania okrywy, na różnych urządzeniach (np. wyciągarkach). • Cząstki zakażonego podłoża i okrywy krążące po zakładzie lub kompostowni mogą zostać rozwiane w czasie wietrznej pogody i ponownie zakazić zdezynfekowane już taśmociągi, maszyny i urządzenia. 5. Pozostałości podłoża w ładowarce po jej oczyszczeniu Wykazano, że już bardzo niewielka ilość zakażonego materiału może spowodować rozprzestrzenienie się choroby. Podczas eksperymentów szczypta zainfekowanego podłoża dodana do podłoża fazy III lub do okrywy podczas operacji związanych z jej załadunkiem może wywołać objawy brązowienia lub odbielenia pieczarek. Rozwój wirusa w podłożu fazy III bywa gwałtowny, gdyż na opanowanie warstwy podłoża na półce potrzebuje on mniej niż dwóch dni. Im większa jest liczba punktów zakażenia, tym gwałtowniejszy jest przebieg choroby, roznoszonej następnie przez zakażone ładowarki, taśmociągi lub czesarki. 6. Pozostałości podłoża na taśmociągu podczas wybierania podłoża z tunelu fazy III 7. Resztki materiału organicznego na czesarce po jej zastosowaniu 8. Niewielka ilość zakażonego podłoża wywołuje objawy Zapobieganie Higiena stanowi podstawową metodę zapobiegania infekcji. Badania wykazały, że dezynfekcja nie niszczy grzybni zawartej we fragmentach podłoża. Dlatego niezwykle ważnym elementem ochrony jest upewnienie się, że z narzędzi, maszyn i powierzchni użytkowanych usunięto pozostałości materii organicznej, zdezynfekowano je i dokładnie umyto wodą. Ważne są odpowiedniej jakości filtry chroniące hale uprawowe przed nalotem zarodników pieczarki i zakażonych cząstek podłoża. Monitorowanie i wykrywanie Producentowi winna towarzyszyć świadomość, że w uprawie może się pojawić wirus X. Powinien też wiedzieć, że objawy choroby można pomylić z oddziaływaniem innych czynników nieorganicznych. Dlatego niezbędnym jest nauczenie pracowników zatrudnionych przy zbiorze rozpoznawania zmian chorobowych. Niskie stężenie wirusa wykrywa czuły, lecz drogi test. Jeśli w uprawie pojawią się owocniki szarobiałe lub żółtawe o obniżonej jakości, producent winien założyć przezornie, że nastąpiło porażenie i podjąć stosowne działania. Opracowano wysokoczuły test molekularny wykrywający wirusa X, czyli AbV6 i wirusa AbV6. To test wczesnego ostrzegania, gdyż mierzy poziom stężenia wirusa w podłożu fazy III, zanim wejdzie ono do produkcji grzybów. Można też zbadać nim podłoże pochodzące z hali uprawowej, a także owocniki pieczarki. Poziomy stężeń wirusa są ściśle powiązane ze stadium zaawansowania choroby. Dlatego też uzyskanie informacji o stężeniu wirusa, który pojawił się w podłożu fazy III podczas rutynowych kontroli pozwala producentom podłoża i pieczarek rozpoznać, kiedy wirus staje się groźny. Walka z chorobą Najskuteczniejszy sposób pozbycia się wirusa X polega na skrupulatnym przestrzeganiu higieny. Wirusy są zwykle przenoszone z grzybnią pieczarki w podłożu. Dlatego należy położyć szczególny nacisk na dokładne usunięcie resztek podłoża z hal uprawowych i potraktowanie tej czynności jako kluczowego sposobu walki z chorobą. Po oczyszczeniu powierzchnię zmywa się dokładnie wodą i dezynfekuje. Zakłady produkcji podłoża Tunele dezynfekować parą lub pasteryzować w przerwie między przygotowaniem kolejnych partii podłoża. Jeśli to możliwe ładować i opróżniać tunele z przeciwległych końców maszynami przeznaczonymi wyłącznie do wykonania jednego zadania, to jest załadunku bądź wyładunku. Wysiew grzybni do podłoża prowadzić bez kontaktu z innymi częściami zakładu. Po zakończeniu pracy resztki podłoża usunąć z posadzki, maszyn i sprzętu, zdezynfekować je i spłukać wodą. Po opróżnieniu hal, półki i maty czyści się z resztek podłoża i dezynfekuje. Hale, w których pojawił się wirus, poddaje się ponownie działaniu pary wodnej o temperaturze 65˚C przez 2-8 godzin. Daje to pewność, że czynnik chorobotwórczy został zniszczony. Tam, gdzie wystąpiła choroba, istnieje wysokie prawdopodobieństwo ponownego pojawienia się wirusa X. Środki dezynfekcyjne nie wnikają w głąb podłoża i nie niszczą wirusa do końca, toteż parowanie hali pozostaje podstawowym sposobem zwalczania choroby. Po usunięciu z hal zużytego podłoża posadzki, półki i ściany pomieszczeń myje się i odkaża środkiem dezynfekcyjnym. Tak samo traktuje się powierzchnie betonowe poza pomieszczeniem uprawowym. Zużyte podłoże niezwłocznie wywozi się poza teren zakład. Gładkie powierzchnie ścian i posadzki hal oraz ich szczelność ułatwiają czyszczenie pomieszczeń i ich dezynfekcję. Gromadzona w zakładzie materia organiczna (podłoże, okrywa, trzony pieczarek) stanowi źródło porażenia przyszłych cykli uprawowych. 9. Tunele fazy III myte po wybraniu podłoża Środki transportu i sprzęt Środki transportu i sprzęt ruchomy czyścić i dezynfekować często z zewnątrz i wewnątrz. Jest to szczególnie ważne w przypadku pojazdów dostarczających podłoże do zakładów uprawowych, gdzie występuje wirus X i do zakładów, w których nie prowadzi się termicznej dezynfekcji hal po zakończonym cyklu. Pieczarkarnie Sprzęt oraz maszyny takie jak ładowarki, taśmociągi i czesarki dokładnie dezynfekować i myć przed i po użyciu. Resztki grzybów i odcięte trzony systematycznie usuwać. Betonowe powierzchnie i korytarze myć i dezynfekować każdego dnia po pracy. Wybetonowane place przy strefach załadunku podłoża luzem czyścić i zdezynfekować przed rozpoczęciem prac. Utrzymywać je w stanie wilgotnym, co sprzyja zatrzymywaniu kurzu i w pewnym stopniu chroni podłoże przed zakażeniem z powietrza. Podczas załadunku hal nie prowadzić zbioru, usuwania podłoża czy sprzątania, a plonujące hale zamknąć. Po załadowaniu podłoża i nałożeniu okrywy dokładnie sprzątnąć pomieszczenie, usunąć resztki podłoża, posadzkę spłukać wodą pod niskim ciśnieniem. Aby zapobiec zakażeniu przyszłej uprawy, osoby zatrudnione przy załadunku podłoża i nakładaniu okrywy, przed rozpoczęciem pracy nie powinny stykać się z resztą załogi. Parowanie hal po zakończonym zbiorze – to najskuteczniejszy sposób przeciwdziałania stratom. Parowanie prowadzi się w temperaturze 65-70˚C (w podłożu!) przez co najmniej 8 godzin. 10. Pozostałości podłoża w załadowanej hali uprawowej, które po zakończeniu prac należy usunąć Dalsze informacje Ulotka informacyjna Mush TV HDC Ulotki informacyjne i publikacje 01/15: Chemiczne środki dezynfekcyjne w uprawie pieczarek. HDC Ulotka 11/07: Wirus X w uprawie pieczarki 03/15: Zielone pleśnie Trichoderma aggressivum w podłożu fazy III luzem 04/15: Choroby grzybowe pieczarek i ich zwalczanie HDC Podsumowania i raporty dla producentów pieczarek Do znalezienia na stronie internetowej HDC (www.hdc.org.uk) kopie M 58, 51, 39a, 39b, 39c, 39d and 07 Podziękowania W tym miejscu składamy podziękowania dla Jude Wilson, Monaghan Mushrooms, Ireland; Patricka Delva, NV Karela Sterckx, Belgium; Brendana Burns, Sylvan, Ireland; Helen Fanning, Custom Compost, Ireland; Robba Maas, Cooperation Prawa autorskie do zdjęć Zdjęcia użyczone dzięki uprzejmości i chronione prawem autorskim Teagasc. Funghi U.A, Netherlands I Pietowi Liempens, Hooymans Compost BV, Netherlands za ich pomocne uwagi podczas przygotowywania tego materiału. Izba Rozwoju Rolnictwa i Ogrodnictwa (Agriculture and Horticulture Development Board) działająca poprzez oddział HDC dokłada wszelkich starań, aby informacje zawarte w tym dokumencie były rzetelne w momencie oddania ich do druku, nie udziela ona jednak w tej kwestii żadnej gwarancji i do maksymalnej granicy dopuszczalnej prawem nie przejmuje odpowiedzialności za straty, szkody czy też wypadki spowodowane (łącznie z powstałymi wskutek zaniedbania) których doznano bezpośrednio lub pośrednio w związku z informacjami i opiniami podanymi lub pominiętymi w niniejszym dokumencie. © Izba Rozwoju Rolnictwa i Ogrodnictwa 2015. Żadna z części niniejszej publikacji nie może być powielana w jakiejkolwiek formie materialnej (w tym także kopiowana ani przechowywana w jakiejkolwiek postaci na nośniku elektronicznym) ani też kopiowana, adaptowana, publikowana ani rozpowszechniana (w formie fizycznej, elektronicznej ani żadnej innej) bez uzyskania uprzednio pisemnej zgody Izby Rozwoju Rolnictwa i Ogrodnictwa. Dopuszczalne jest jedynie reprodukowanie zawartych tutaj informacji w ich oryginalnej formie w celu solidnego posłużenia się nimi, z podaniem jako źródła informacji Izby Rozwoju Rolnictwa i Ogrodnictwa lub zgodnie z przepisami ustawy o prawie autorskim i patentowym 1988. Wszelkie prawa zastrzeżone. Contact us Project Co-ordinator Dr. Helen Grogan Teagasc, Ashtown Research Centre, Dublin 15, Ireland Tel: 00 353 1 8059780 Email: [email protected] Communications Co-ordinator Ruth Ashfield HDC, Stoneleigh Park, Warwickshire, UK Tel: 00 44 (0) 247 647 8663 Email: [email protected] For more information visit www.mushtv.eu