Wszystkie kursy zaczynają się o godzinie 9.00, z wyjątkiem Kursów praktycznych ( PCR czasu rzeczywistego – zastosowania w biologii i medycynie i Techniki molekularne w biologii i medycynie), które zaczynają się o godzinie 9.00. W roku 2014: Kurs: Podstawy molekularne działania hormonów tarczycy Czwartek, 20.11.2014 9.00 - 10.30 Biosynteza hormonów tarczycy, gromadzenie hormonów tarczycy i ich uwalnianie Dr. n. med. Joanna Bogusławska 10.35 – 11.20 Hormon tyreotropowy TSH - mechanizm działania via receptor TSH Dr hab. n. med. Agnieszka Piekiełko-Witkowska 11.20-11.50 Przerwa 11.50 - 12.35 Oddziaływanie hormonów tarczycy na mięsień sercowy. Zespół tarczycowo-sercowy Dr n. med. Michał Ambroziak 12.40 - 13.25 Zespoły chorobowe związane z pozatarczycowymi zaburzeniami poziomu hormonu tarczycy we krwi. Dr n. med. Michał Ambroziak 13.30 - 14.15 Transport jodu i hormonów tarczycy do krwi i do komórek docelowych. Mutacje genów białek transportujących i ich następstwa. Mgr Hanna Kędzierska 14.20 - 15.05 Jodotyroninowe dejodynazy ( D1,D2,D3) - enzymy regulujące poziom hormonów tarczycy, właściwości, zaburzenia i polimorfizmy w stanach patologicznych. Dr hab. n. med. Agnieszka Piekiełko-Witkowska Piątek, 21.11.2014 9.00 - 9.45 Choroby tarczycy uwarunkowane zaburzeniami genetycznymi Prof. dr hab. n. med. Monika Puzianowska-Kuźnicka 9.50 - 10.35 Wpływ hormonów tarczycy na proces starzenia Prof. dr hab. n. med. Monika Puzianowska-Kuźnicka 10.40 - 11.25 Mechanizm działania hormonu tarczycy na poziomie genomu. Mutacje receptorów hormonów tarczycy w stanach patologicznych Dr hab. n. med. Agnieszka Piekiełko-Witkowska 11.25-11.55 Przerwa 11.55-13.25 Pozagenomowe i mitochondrialne działanie hormonów tarczycy i ich pochodnych Dr n. med. Piotr Popławski 13.30-14.15 Funkcja i działanie tyronamin - aktywnych metabolitów hormonu tarczycy Mgr Hanna Kędzierska 14.20-15.05 Zaburzenia epigenetyczne w chorobach tarczycy Dr n. med. Joanna Bogusławska 15.05-15.20. Seminarium. Zakończenie kursu. Dr hab. n. med. Agnieszka Piekiełko-Witkowska Tytuł kursu: Wpływ hormonów tarczycy na otyłość i zaburzenia metaboliczne - aspekty kliniczne i molekularne: 3-4 grudnia 2014 Lp. Temat wykładu lub innych zajęć Tytuł, imię i nazwisko wykładowcy Liczba godzin Dzień 1: 1. Podstawy molekularne działania hormonów tarczycy dr hab. n. med. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 2 2. Wpływ hormonów tarczycy na tkankę tłuszczową dr hab. n. med. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 1 3. Jodotyroninowe dejodynazy: lokalne regulatory przemian energetycznych w tkankach dr n. med. Piotr Popławski 1 4 Tyronaminy – "nowe" hormony tarczycy: wpływ na metabolizm lipidów i glukozy mgr Hanna Kędzierska 1 5. Receptory hormonów tarczycy: rola w otyłości, cukrzycy i niealkoholowym stłuszczeniowym zapaleniu wątroby dr n. med. Joanna Bogusławska 1 Dzień 2: 6. Otyłość: objaw kliniczny, czy złożone zaburzenie metaboliczne? dr hab. n. med. Wojciech Bik 1 7. Problemy interpretacyjne wyników badań hormonalnych. dr n. med. Anna Litwiniuk 1 8. Otyłość a aktywność osi podwzgórzeprzysadka-tarczyca. Leczenie zaburzeń lipidowych. dr hab. n. med. Wojciech Bik 1 9. Zmiany funkcjonowania układu podwzgórzeprzysadka-tarczyca w okresie starzenia dr hab. n. med. Wojciech Bik 1 Mutacje w endokrynologii. 09.12.2014 9.009.45 Organizacja informacji genetycznej. Podstawy regulacji ekspresji genów Dr n. med. Joanna Bogusławska 1 9.5010.35 Mechanizmy powstawania mutacji Dr n. med. Piotr Popławski 1 10.4011.25 Mutacje genów białek wiążących hormony. Mutacje transporterów Mgr Hanna Kędzierska 1 11.3012.15 Mutacje genów kodujących receptory błonowe i białka szlaków sygnałowych. Dr n. med. Piotr Popławski 1 12.1512.45 Przerwa 12.4513.30 Mutacje genów receptorów jądrowych. Dr hab. n. med. Agnieszka Piekiełko-Witkowska 1 13.3515.05 Mutacje genów kodujących hormony. Nowotwory hormonozależne. Udział regulacji hormonalnej w procesie nowotworzenia. Prof. dr hab. n. med. Monika PuzianowskaKuźnicka 2 15.1015.20 Seminarium. Zakończenie kursu Dr hab. n.med. Agnieszka Piekiełko-Witkowska Lista kursów planowanych w 2015 roku. 1. Hormony tarczycy: wybrane zagadnienia kliniczne i molekularne (dawniej: Podstawy molekularne działania hormonów tarczycy): 11-12.06.2015, 19-20.11.2015. 2. Wpływ hormonów tarczycy na otyłość i zaburzenia metaboliczne - aspekty kliniczne i molekularne: 14-15.05.2015, 10-11.12.2015. 3. Rola mikroRNA w procesie nowotworzenia. 17.03.2015, 15.10.2015. 4. Mutacje w endokrynologii. 26.05.2015. 01.12.2015. 5. Wybrane zagadnienia z endokrynologii molekularnej (dawniej: Podstawy endokrynologii molekularnej): 16-17.04.2015. 08-09.10.2015. 6. Przepływ informacji genetycznej od genu do białka. 29.01.2015, 26.11.2015. 7. PCR czasu rzeczywistego – zastosowania w biologii i medycynie: terminy będą ustalane indywidualnie. 8. Techniki molekularne w biologii i medycynie - kurs indywidualny: terminy będą ustalane indywidualnie. Programy powyższych kursów: Tytuł kursu: Hormony tarczycy: wybrane zagadnienia kliniczne i molekularne Lp. Temat wykładu lub innych zajęć Tytuł, imię i nazwisko wykładowcy Liczba godzin Dzień 1: 1 Biosynteza hormonów tarczycy, gromadzenie dr n. med. Joanna Bogusławska hormonów tarczycy i ich uwalnianie 1 2 Transport jodu i hormonów tarczycy do krwi i do komórek docelowych. Mutacje genów białek transportujących i ich następstwa. mgr Hanna Kędzierska 1 3 Jodotyroninowe dejodynazy ( D1,D2,D3) enzymy regulujące poziom hormonów tarczycy, właściwości, zaburzenia i polimorfizmy w stanach patologicznych dr hab. n. med. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 1 4 Funkcja i działanie tyronamin - aktywnych metabolitów hormonu tarczycy mgr Hanna Kędzierska 1 5 Mechanizm działania hormonu tarczycy na poziomie genomu. Mutacje receptorów hormonów tarczycy w stanach patologicznych dr hab. n. med. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 1 6 Pozagenomowe i mitochondrialne działanie hormonów tarczycy i ich pochodnych dr n. med. Piotr Popławski 1 dr hab. n. med. Wojciech Bik 1 Dzień 2: 1 Zespół tarczycowo-sercowy – wpływ hormonów tarczycy na mięsień sercowy 2 Fizjologia tarczycy w ciąży 3 Problemy interpretacyjne w „Euthyroid Sick Syndrome” dr hab. n. med. Wojciech Bik dr hab. n. med. Wojciech Bik 1 1 4 Zaburzenia epigenetyczne w chorobach tarczycy dr n. med. Joanna Bogusławska 1 5 Choroby tarczycy uwarunkowane zaburzeniami genetycznymi Prof. dr hab. n. med. Monika Puzianowska-Kuźnicka 1 6 Wpływ hormonów tarczycy na proces starzenia Prof. dr hab. n. med. Monika Puzianowska-Kuźnicka 1 Razem 12 Tytuł kursu: Wpływ hormonów tarczycy na otyłość i zaburzenia metaboliczne - aspekty kliniczne i molekularne Lp. Temat wykładu lub innych zajęć Tytuł, imię i nazwisko wykładowcy Liczba godzin Dzień 1: 1. Podstawy molekularne działania hormonów tarczycy dr hab. n. med. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 2 2. Wpływ hormonów tarczycy na tkankę tłuszczową dr hab. n. med. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 1 3. Jodotyroninowe dejodynazy: lokalne regulatory przemian energetycznych w tkankach dr n. med. Piotr Popławski 1 4 Tyronaminy – "nowe" hormony tarczycy: wpływ na metabolizm lipidów i glukozy mgr Hanna Kędzierska 1 5. Wpływ hormonów tarczycy na metabolizm u osób w podeszłym wieku dr n. med. Agnieszka Baranowska-Bik 1 Dzień 2: 6. Choroby tarczycy a otyłość i metabolizm tkanki tłuszczowej (fenotypy kliniczne otyłości, kontrowersje dotyczące zespołu metabolicznego, korelacje aktywności stopnia nasilenia zaburzeń funkcji tarczycy w aspekcie nasilenia otyłości i wzrostu ryzyka powikłań ze strony układu sercowo-naczyniowego) dr hab. n. med. Wojciech Bik 2 7. Receptory hormonów tarczycy: rola w otyłości, cukrzycy i niealkoholowym stłuszczeniowym zapaleniu wątroby dr n. med. Joanna Bogusławska 1 8. Otyłość a aktywność osi podwzgórzeprzysadka-tarczyca (rola neuropeptydów w regulacji osi PPT) dr n. med. Agnieszka Baranowska-Bik 1 9. Leczenie otyłości i dyslipidemii w zaburzeniach czynnośći tarczycy dr n. med. Agnieszka Baranowska-Bik 1 dr hab. n. med. Wojciech Bik 1 10. Metabolizm lipidów w ciąży Razem 12 Tytuł kursu: Rola mikroRNA w procesie nowotworzenia Lp. 1. Temat wykładu lub innych zajęć mikroRNA: geneza i funkcja. Tytuł, imię i nazwisko wykładowcy Liczba godzin mgr Elżbieta Sokół 1 2. Wpływ mikroRNA na proces nowotworzenia: supresorowe i onkogenne cząsteczki mikroRNA. mgr Hanna Kędzierska 1 3. Modyfikacje genów kodujących mikroRNA (SNP, metylacja) – rola w kancerogenezie. dr n. med. Joanna Bogusławska 1 4 mikroRNA jako marker diagnostyczny: metody oznaczania, przykłady zastosowania. dr n. med. Piotr Popławski 1 5. mikroRNA jako cel terapii antynowotworowej. dr hab. n. med. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 1 Razem 5 Tytuł kursu: Mutacje w endokrynologii Lp. Temat wykładu lub innych zajęć Tytuł, imię i nazwisko wykładowcy Liczba godzin 1. Organizacja informacji genetycznej. Podstawy regulacji ekspresji genów dr n. med. Joanna Bogusławska 2 2. Mechanizmy powstawania mutacji mgr Elżbieta Sokół 1 3. Mutacje genów kodujących hormony. Nowotwory hormonozależne. Udział regulacji hormonalnej w procesie nowotworzenia. prof. dr hab. n. med. Monika Puzianowska-Kuźnicka 2 4 Mutacje genów białek wiążących hormony. Mutacje transporterów mgr Hanna Kędzierska 1 5. Mutacje genów kodujących receptory błonowe i białka szlaków sygnałowych. dr n. med. Piotr Popławski 1 6. Mutacje genów receptorów jądrowych. dr hab. n. med. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 1 Razem 8 Tytuł kursu: Wybrane zagadnienia z endokrynologii molekularnej Lp. Temat wykładu lub innych zajęć Tytuł, imię i nazwisko wykładowcy Liczba godzin Dzień 1: 1. Organizacja informacji genetycznej. Podstawy regulacji ekspresji genów dr n. med. Joanna Bogusławska 1 2. Badania proteomiczne w endokrynologii. Potranslacyjna regulacja ekspresji. dr hab. n. med. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 2 3. Przekazywanie sygnału hormonalnego za pośrednictwem receptorów błonowych i mitochondrialnych. dr n. med. Piotr Popławski 2 4 Przekazywanie sygnału hormonalnego za pośrednictwem receptorów jądrowych. Genomowy mechanizm działania hormonów. dr hab. n. med. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 2 Dzień 2: 5. Integracja pozajądrowego i jądrowego działania hormonów - na przykładzie melatoniny. dr n. med. Piotr Popławski 1 6. Rola alternatywnego splicingu w endokrynopatiach. Mgr Hanna Kędzierska 2 7. Terapia genowa: podstawy teoretyczne i praktyczne zastosowania w endokrynologii dr hab. n. med. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 1 8. Molekularne mechanizmy sprzężeń zwrotnych w układzie endokrynnym. dr hab. Agnieszka Piekiełko-Witkowska 1 9. Endokrynologia stresu Prof. dr hab. n. med. Monika Puzianowska-Kuźnicka 1 10. Nowotwory hormonozależne Razem Prof. dr hab. n. med. Monika Puzianowska-Kuźnicka 1 14 Tytuł kursu: Przepływ informacji genetycznej od genu do białka Lp. 1. Temat wykładu lub innych zajęć Tytuł, imię i nazwisko wykładowcy Organizacja informacji genetycznej, replikacja, dr hab. n. med. Agnieszka Piekiełkotranskrypcja Witkowska Liczba godzin 1 2. Regulacja transkrypcji: mechanizmy epigenetyczne, czynniki transkrypcyjne, poliadenylacja, przyłączanie 7metyloguanozyny dr n. med. Joanna Bogusławska 1 3 Rola mikroRNA w regulacji ekspresji genów mgr Elżbieta Sokół 1 4 Regulacja transkrypcji: Redagowanie RNA i różnicowe składanie pierwotnego transkryptu mgr Hanna Kędzierska 1 5 Translacja, regulacja potranslacyjna dr n. med. Piotr Popławski 1 Razem 5 Program KURSU: PCR czasu rzeczywistego – zastosowania w biologii i medycynie Lp. Temat wykładu lub innych zajęć Tytuł, imię i nazwisko wykładowcy Liczba godzin Dzień 1 1. Kurs „PCR czasu rzeczywistego – zastosowania w biologii i medycynie” – omówienie kursu, zasad BHP i regulaminu Pracowni Biologii Molekularnej. – wykład dr hab. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 2. Planowanie eksperymentu: izolacja i przechowywanie materiału, analiza jakościowa i ilościowa RNA, planowanie kontroli, uwzględnianie rodzaju materiału biologicznego - wykład mgr Hanna Kędzierska 3. Właściwości cząsteczek DNA i RNA wykorzystywane w technice PCR czasu rzeczywistego. Różne rodzaje cząsteczek RNA, które można analizować metodą PCR czasu rzeczywistego – wykład mgr Hanna Kędzierska 4. Podstawy ilościowej analizy RNA: różnice między real-time PCR a PCR. Rodzaje stosowanych sond/barwników/fluorochromów. – wykład dr Joanna Bogusławska 5. Projektowanie starterów: pożądane właściwości dobrze zaprojektowanych starterów, struktury drugorzędowe, dobieranie matryc. Analiza bioinformatyczna. Projektowanie i zamawianie sond-wykład dr hab. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 1 1 1 2 1 Dzień 2 6. 7. Obliczenia w real-time PCR: krzywa standardowa, 2^Ct, wydajność reakcji. Analiza ilościowa względna i bezwzględna. Geny referencyjne – wykład dr Joanna Bogusławska Analiza mRNA i mikroRNA: podobieństwa i różnice.- wykład mgr Hanna Kędzierska 1 1 8. 9. 10. 11. Razem Pułapki na drodze do uzyskania prawidłowych wyników: Real-time PCR w świetle wytycznych MIQE, organizacja pracowni PCR – wykład dr Piotr Popławski Real-time PCR: nie tylko oznaczanie poziomu ekspresji: analiza SNP i HRM mgr Hanna Kędzierska Real-time PCR: zastosowania praktyczne. Wybór odczynników: kiedy taniej znaczy drożej?– wykład dr Piotr Popławski Podsumowanie poznanych technik biologii molekularnej. Dyskusja. dr hab. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 1 1 1 1 12 Lp. Zajęcia praktyczne / Ćwiczenia (jeżeli przewidziane w programie kursu) Tytuł, imię i nazwisko prowadzącego Liczba godzin Dzień 1 1 Izolacja RNA. dr Joanna Bogusławska Elektroforeza RNA w żelu denaturującym. Wizualizacja żelu w bromku etydyny za pomocą promieniowania ultrafioletowego. Analiza spektrofotometryczna. mgr Hanna Kędzierska 2 dr Piotr Popławski Reakcja odwrotnej transkrypcji na matrycy wyizolowanego RNA mgr Elżbieta Sokół Dzień 2 2 Przygotowanie mieszaniny reakcyjnej real-time PCR dr Joanna Bogusławska Programowanie amplifikatora do detekcji w czasie rzeczywistym mgr Hanna Kędzierska Projektowanie starterów z wykorzystaniem oprogramowania bioinformatycznego dr Piotr Popławski Obliczanie poziomu ekspresji w oparciu o uzyskane wyniki analizy real-time PCR mgr Elżbieta Sokół Razem 2 4 Program KURSU: Techniki molekularne w biologii i medycynie. Lp. Temat wykładu lub innych zajęć Tytuł, imię i nazwisko wykładowcy Liczba godzin Dzień 1 1. Kurs Techniki Molekularne w Biologii i Medycynie – omówienie kursu, zasad BHP i regulaminu Pracowni Biologii Molekularnej. - wykład dr hab. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 1 2. Izolacja, oznaczenie i analiza kwasów nukleinowych – omówienie warunków i metod - wykład mgr Hanna Kędzierska 1 3. Izolacja, oznaczenie i analiza białek – omówienie warunków i metod - wykład mgr Hanna Kędzierska 1 4 Reakcja łańcuchowej polimerazy (PCR) - amplifikacja fragmentów DNA. Zasady ustalania warunków reakcji, rodzaje stosowanych polimeraz DNA. Zastosowania reakcji PCR. – wykład mgr Hanna Kędzierska 2 Dzień 2 5. Projektowanie starterów i sond do PCR – omówienie zasad, programy bioinformatyczne. – wykład dr hab. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 1 6. Techniki mikrobiologiczne stosowane w biologii molekularnej - wykład mgr Hanna Kędzierska 2 7. Plazmidy – podstawowe narzędzie w-biologii molekularnej - wykład dr Joanna Bogusławska 1 8. Elektroforeza, immunobloting, przeciwciała, metody detekcji - wykład dr Piotr Popławski 1 Dzień 3 dr Joanna Bogusławska 1 10. Zastosowania PCR czasu rzeczywistego, analiza wyników - wykład. dr Joanna Bogusławska 1 11. Hodowle komórkowe omówienie typów linii, testów, zastosowań – wykład dr Piotr Popławski 1 9. Podstawy teoretyczne PCR czasu rzeczywistego (Real time PCR) - wykład. 12 Prowadzenie hodowli komórkowych, obserwacja komórek pod mikroskopem, przygotowanie pożywek, wysiewanie komórek, pasażowanie. - wykład dr Piotr Popławski 1 13 Podsumowanie poznanych technik biologii molekularnej. Dyskusja. dr hab. Agnieszka PiekiełkoWitkowska 1 Razem Lp. 15 Zajęcia praktyczne / Ćwiczenia (jeżeli przewidziane w programie kursu) Tytuł, imię i nazwisko prowadzącego Liczba godzin Dzień 1 1. Izolacja RNA. dr Joanna Bogusławska Elektroforeza RNA w żelu denaturującym. Wizualizacja żelu w bromku etydyny za pomocą promieniowania ultrafioletowego. dr Piotr Popławski 3 Reakcja odwrotnej transkrypcji na matrycy wyizolowanego RNA. mgr Hanna Kędzierska Reakcja PCR na na matrycy cDNA uzyskanego w reakcji odwrotnej transkrypcji Izolacja białek. Oznaczanie stężenia białka metodami spektrofotometryczną Przygotowanie do elektroforezy białek SDS-PAGE: omówienie zasady rozdziału białek w polu elektrycznym, przygotowanie buforów, wylanie płytek Dzień 2 2. Przygotowanie pożywki LB i szalek LB-agar-ampicylina-Xgal-IPTG dr Joanna Bogusławska Elektroforeza produktów PCR w żelu agarozowym. Wizualizacja wyników za pomocą bromku etydyny i promieniowania ultrafioletowego dr Piotr Popławski 3 mgr Hanna Kędzierska Klonowanie molekularne: Oczyszczanie produktu PCR. Synteza końcówek adeninowych. Ligacja Transformacja bakterii plazmidem. Hodowla bakterii na podłożu stałym. Analiza restrykcyjna klonowanych konstruktów.. Elektroforeza białek jądrowych w żelu poliakrylamidowym w obecności SDS. Transfer białek jądrowych z żelu na błonę nitrocelulozową Hybrydyzacja błony nitrocelulozowej ze specyficznymi przeciwciałami. Dzień 3 3. Hybrydyzacja błony nitrocelulozowej przeciwciałami II rzędowymi. Wizualizacja związanych przeciwciał za dr Joanna Bogusławska 3 pomocą West Pico Chemiluminescent Reagent dr Piotr Popławski PCR kolonijny. Elektroforeza produktów PCR. mgr Hanna Kędzierska Izolacja plazmidowego DNA Elektroforeza produktów analizy restrykcyjnej. Razem 9