testy wydzielania interferonu _igra_ do podania na stronę.…

Kujawsko – Pomorskie Centrum Pulmonologii w Bydgoszczy
Zakład Diagnostyki Mikrobiologicznej
ul.Seminaryjna 1, 85-326 Bydgoszcz
Tel.: rejestracja; 052 32 56 791, asystenci: 052 32 56 789, kierownik: 052 32 56 792
POBIERANIE KRWI DO TESTÓW WYDZIELANIA INTERFERONU γ WYKRYWAJĄCYCH
ZAKAŻENIE PRĄTKAMI GRUŹLICY (TESTY IGRA)
Wyciąg z Instrukcji systemu zarządzania jakością QI- 060/O/DL
Data aktualizacji 10.07.2012r.
Testy IGRA są testami in vitro do wykrywania zakażenia prątkami gruźlicy w oparciu o ocenę uwalniania
interferonu gamma przez pobudzone swoistymi antygenami prątka gruźlicy leukocyty krwi obwodowej człowieka.
Na wyniki testów nie ma wpływu szczepienie BCG.
Materiałem do testów jest krew obwodowa.
Wykonanie testów rekomendowane jest:
U osób przed planowaną immunosupresją: terapia antagonistami TNFα chorych na RZS lub inne choroby
autoimmunologiczne, chemioterapia, przeszczepianie narządów
U osób zakażonych wirusem HIV
U osób z kontaktu z chorym prątkującym – szczególnie dzieci
U osób podejrzewanych o pozapłucną postać gruźlicy (kręgosłup, kości, stawy, CUN)
U innych osób z grup dużego ryzyka rozwoju gruźlicy (więźniowie, pensjonariusze DPS i podopieczni
Pomocy Społecznej, bezdomni, pracownicy Ochrony Zdrowia).
Dostępne są dwa rodzaje testów:
•
T-SPOT®TB (metoda ELISPOT, użyte antygeny prątkowe: ESAT-6 i CFP-50)
•
QuantiFERON®-TB Gold (metoda ELISA, użyte antygeny prątkowe: ESAT-6, CFP-10
i TB7,7(p4)).
Probówki do obu testów można zamówić w Zakładzie Diagnostyki Mikrobiologicznej faksem: 52 32 56 790.
Strona 1 z 4
Kujawsko – Pomorskie Centrum Pulmonologii w Bydgoszczy
Zakład Diagnostyki Mikrobiologicznej
ul.Seminaryjna 1, 85-326 Bydgoszcz
Tel.: rejestracja; 052 32 56 791, asystenci: 052 32 56 789, kierownik: 052 32 56 792
POBIERANIE KRWI DO TESTU T-SPOT®TB
WYKRYWAJĄCEGO ZAKAŻENIE PRĄTKAMI GRUŹLICY
1. PRZYJMOWANIE PRÓBEK DO TESTU DO LABORATORIUM:
Poniedziałek – czwartek w godzinach 7:00 - 11:00.
UWAGA!
Bezwzględnie konieczne jest odnotowanie daty i godziny pobrania krwi, gdyż postępowanie
z próbką w trakcie badania różni się w zależności od czasu, jaki upłynął od momentu jej uzyskania
do rozpoczęcia testu.
2. MATERIAŁ DO TESTU: krew obwodowa
3. ILE KRWI POBIERAĆ:
dorośli i dzieci od 10 roku życia: optymalnie 7 - 8 ml krwi, minimalnie 6 ml krwi
dzieci od 2 do 9 roku życia: minimalnie 4 ml krwi
dzieci do 2 roku życia: minimalnie 2 ml krwi
osoby z immunosupresją: jeśli to możliwe, pobrać podwójną porcję krwi
4. POBIERANIE KRWI:
do probówek litowoheparynowych – dopuszczalny czas transportu do 24 godzin
do probówek CPTTM z cytrynianem sodu w systemie aspiracyjno-próżniowym Vacutainer®– pod
warunkiem dostarczenia próbek do laboratorium w ciągu 3 godzin od momentu pobrania krwi
Po pobraniu krew powinna być ostrożnie wymieszana przez 8 – 10-krotne odwrócenie probówki z zawartością
do góry dnem.
UWAGA!
W przypadku pobierania krwi tradycyjną techniką aspiracyjną za pomocą igły i strzykawki
przeniesienie krwi ze strzykawki do probówki powinno nastąpić po zdjęciu igły, co zapobiegnie lizie
komórek.
5. POSTĘPOWANIE Z POBRANĄ KRWIĄ
Probówki z pobraną krwią przechowywać i transportować w temperaturze pokojowej.
NIE UMIESZCZAĆ W LODÓWCE!
NIE ZAMRAŻAĆ!
Pobrane
próbki
należy
dostarczyć
do
Zakładu
Diagnostyki
Mikrobiologicznej
maksymalnie w ciągu 24 godzin.
UWAGA!
NIE NADAJE SIĘ do testu T-SPOT®TB: krew pobrana, przechowywana i transportowana w inny
sposób, niż wyżej wymienione!
Strona 2 z 4
Kujawsko – Pomorskie Centrum Pulmonologii w Bydgoszczy
Zakład Diagnostyki Mikrobiologicznej
ul.Seminaryjna 1, 85-326 Bydgoszcz
Tel.: rejestracja; 052 32 56 791, asystenci: 052 32 56 789, kierownik: 052 32 56 792
INSTRUKCJA POBIERANIA KRWI DO TESTU QUANTIFERON®-TB GOLD
WYKRYWAJĄCEGO ZAKAŻENIE PRĄTKAMI GRUŹLICY
(CZĘŚĆ DLA POBIERAJĄCEGO)
1. PRZECHOWYWANIE PROBÓWEK
Probówki przeznaczone do wykonania testu (komplet do testu dla jednego pacjenta stanowią 3 probówki:
ANTIGEN, NIL, MITOGEN) przed użyciem należy przechowywać w temperaturze od 4oC do 25oC.
2. POBIERANIE KRWI
2.1.Probówki kompletu należy opisać danymi identyfikującymi pacjenta.
2.2.Krew pobierać:
za pomocą dołączonego do zestawu probówek aparatu do pobierania krwi
lub za pomocą systemu BD Vacutainer®
lub za pomocą zwykłej igły i strzykawki.
W każdym przypadku napełnić probówki krwią przez przekłucie igłą korków probówek.
2.3. Do każdej z trzech probówek pobrać ok. 1 ml krwi (do poziomu znacznika – czarnego kwadratu
umieszczonego na etykiecie każdej probówki – bardzo ważne!!!).
3. MIESZANIE KRWI
Pobraną krew należy od razu wymieszać przez 10-krotne odwrócenie probówek, tak, aby cała ich wewnętrzna
powierzchnia została pokryta krwią.
4. TRANSPORT PRÓBEK DO LABORATORIUM
4.1.Jak najszybciej (do 16 godzin od momentu pobrania krwi) dostarczyć pobrane próbki do Zakładu
Diagnostyki Mikrobiologicznej Kujawsko-Pomorskiego Centrum Pulmonologii w Bydgoszczy nie później
niż do godz. 14:00 (wejście C, trzecie piętro).
4.2. Jeśli dostarczenie próbek do Zakładu Diagnostyki Mikrobiologicznej Kujawsko-Pomorskiego Centrum
Pulmonologii w Bydgoszczy w ciągu 16 godzin od pobrania krwi jest niemożliwe, należy je w ciągu
16 godzin przetransportować do lokalnego laboratorium.
Zanim pobrane próbki dotrą do laboratorium, przechowywać je w temperaturze pokojowej.
Nie wolno zamrażać próbek krwi, ani przechowywać ich w lodówce.
5. DOKUMENTACJA
Załączyć skierowanie na badanie z podaniem daty i godziny pobrania krwi.
Strona 3 z 4
Kujawsko – Pomorskie Centrum Pulmonologii w Bydgoszczy
Zakład Diagnostyki Mikrobiologicznej
ul.Seminaryjna 1, 85-326 Bydgoszcz
Tel.: rejestracja; 052 32 56 791, asystenci: 052 32 56 789, kierownik: 052 32 56 792
INSTRUKCJA POSTĘPOWANIA Z KRWIĄ POBRANĄ DO TESTU QUANTIFERON®-TB GOLD
(CZĘŚĆ DLA LOKALNEGO LABORATORIUM)
1. INKUBACJA
Jak najszybciej (do 16 godzin od momentu pobrania krwi) wstawić probówki z pobraną krwią do cieplarki do
37oC ± 1oC i inkubować je wylotem ku górze przez 16 do 24 godzin. Tuż przed poddaniem inkubacji
wymieszać zawartość probówek przez ich 10-krotne odwrócenie.
Do momentu rozpoczęcia inkubacji przechowywać probówki w temperaturze pokojowej.
Nie wolno zamrażać próbek krwi, ani przechowywać ich w lodówce.
2. WIROWANIE
Po
zakończeniu
inkubacji
odwirować
zawartość
probówek
przez
15
minut
przy
prędkości
2000 do 3000 RCF (g). Czop żelowy oddzieli komórki od osocza. Jeśli to nie nastąpi, zawartość próbówek
ponownie odwirować przy wyższej prędkości obrotowej.
3. ZEBRANIE OSOCZA
3.1. Przygotować probówki do przechowywania zebranego osocza
•
Opisać
je
nazwami
probówek,
z
których
przeniesione
będzie
osocze
(NIL, ANTYGEN oraz MITOGEN)
•
Opisać je imieniem i nazwiskiem pacjenta
3.2. Osocze zbierać znad czopu żelowego, nie uszkadzając go za pomocą pipety pasteurowskiej
lub automatycznej bardzo ostrożnie i bez mieszania. Nie należy zbierać osocza przez przelewanie!
3.3. Z każdej probówki z kompletu (ANTIGEN, NIL, MITOGEN) przenieść osocze do oddzielnej,
oznakowanej wcześniej probówki służącej do przechowywania osocza, zmieniając pipetę pasteurowską
lub końcówkę pipety automatycznej na nową między poszczególnymi rodzajami probówek
oraz pacjentami (oddzielna pipeta/końcówka dla NIL, oddzielna dla ANTYGEN i oddzielna dla
MITOGEN danego pacjenta).
4. PRZECHOWYWANIE OSOCZA
Próbki osocza przechowywać w temperaturze 2-8oC i dostarczyć do badania do Zakładu Diagnostyki
Mikrobiologicznej Kujawsko-Pomorskiego Centrum Pulmonologii w Bydgoszczy nie później niż
do godz. 14:00 (wejście C, trzecie piętro) w ciągu 14 dni.
UWAGA!
NIE NADAJE SIĘ do testu QUANTIFERON®-TB GOLD: krew pobrana, przechowywana
i transportowana w inny sposób, niż wyżej wymienione!
Strona 4 z 4