Diagnostyka materiału klinicznego metodą sondy genetycznej Probe Tec ET BD obejmuje wykrywanie Mycobacterium obecności tuberculosis DNA bezpośrednio prątków w należących materiale do kompleksu diagnostycznym metodą sondy genetycznej Probe Tec ET BD oraz wykonanie: - bakterioskopii, - hodowli na podłożach stałych Lowensteina-Jensena, - hodowli na podłożu płynnym w systemie Bactec dla osadu, z którego uzyskano dodatni wynik sondy genetycznej, testów lekowrażliwości dla szczepu uzyskanego z dodatniej hodowli Bactec. - Wyniki metod dodatkowych są wydawane niezwłocznie w miarę ich uzyskiwania. Diagnostyka w systemie BACTEC MGIT 960 TB: - identyfikacja hodowli prątków do jednej z grup: Mycobacterium tuberculosis complex lub MOTT (Mycobacterium Other Than Tuberculosis) testem BD MGIT Tbc Identification Test bezpośrednio z hodowli płynnej – czas oczekiwania na wynik – 15 minut. - lekowrażliwość na podstawowe leki przeciwprątkowe: streptomycyna, izoniazyd, rifampicyna, etambutol, pyrazynamid – czas oczekiwania na wynik 5 - 8 dni. Diagnostyka konwencjonalna: - identyfikacja Mycobacterium tuberculosis: test akumulacji niacyny - czas oczekiwania na wynik – 30 dni - lekowrażliwość na leki podstawowej terapii przeciwprątkowej: streptomycyna, izoniazyd, rifampicyna, etambutol - czas oczekiwania na wynik - 30 dni - lekowrażliwość na leki II-linii: amikacyna, ofloksacyna, etionamid, davercin, kotrimoksazol - czas oczekiwania na wynik - 30 dni Test T-SPOT® TB Zasada działania: Test jest oparty na technice ELISPOT, która pozwala na wychwycenie interferonu gamma na membranie reakcyjnej, bezpośrednio pod komórką, która wydzieliła cytokinę. Zabarwienie cytokiny w reakcji kolorymetrycznej ujawnia miejsce jej wydzielenia (a tym samym położenie i ilość komórek T efektorowych) tworząc na membranie tzw. ”odcisk stopy” po każdej komórce. Na wynik testu nie ma wpływu zawartość surowicy, a zastosowanie antygenów prątka z regionu RD1 eliminuje wpływ szczepień BCG. Wystandaryzowanie liczby komórek użytych do testu pozwala zachować wysoką czułość testu również u osób z obniżoną odpornością. Wykonanie testu rekomendowane jest: - u osób przed planowaną immunosupresją: terapia antagonistami TNFα chorych na RZS lub inne choroby autoimmunologiczne, chemioterapia, przeszczepianie narządów - u osób zakażonych wirusem HIV - u osób z kontaktu z chorym prątkującym – szczególnie dzieci - u osób podejrzewanych o pozapłucną postać gruźlicy (kręgosłup, kości, stawy, CUN) - u innych osób z grup dużego ryzyka rozwoju gruźlicy (więźniowie, pensjonariusze DPS i podopieczni Pomocy Społecznej, bezdomni, pracownicy Ochrony Zdrowia) Czas oczekiwania na wynik: Metody Rodzaj badania Bakterioskopia Konwencjonalna Bactec 24h 24h Hodowla pozytywna 2 - 8 tygodni 3 - 35 dni Hodowla ujemna 8 tygodni 6 tygodni Kontaminacja 1 tydzień 1 tydzień Lekooporność 30 dni 6 dni Sonda genetyczna T-SPOT® TB 24h 2-3 dni 1 dzień (badania od dostarczenia wykonywane w próbki do poniedziałek i laboratorium czwartek) Wyposażenie w aparaturę badawczą i inne urządzenia do badań: komory laminarne BSL z przepływem pionowym klasy II - jednostanowiskowa Safe/Flow i dwustanowiskowa AURA B3 digestorium „TOLLBRAND 1200” komplet aparatury do sondy genetycznej Probe Tec ET Becton Dickinson aparat Bactec 960 TB Becton Dickinson mikroskop fluorescencyjny BH2-OLYMPUS destylatory wody autoklawy: FREDEGARI z elektronicznym monitoringiem procesu steylizacji; SMS pokoje cieplarki wirówki: HERMLE 32-miejscowa, MPW 370 8-miejscowa ścinacz bakteriologiczny zamrażarka niskotemperaturowa (-75 stC) Platinum 500 wagi: analityczna, tensometryczna inkubator do testów biologicznych inkubator CO2