Zamierzone uwolnienie GMO Tytuł Zamierzone uwolnienie GMO Opis Wniosek o wydanie decyzji w sprawie zamierzonego uwolnienia GMO Dane ogólne INFORMACJE OGÓLNE O WNIOSKU Numer wniosku 02-13/2014 Status zgłoszenia Wydano decyzję Data zgłoszenia 2014-07-23 Znak decyzji DLPVI-431-107/721/14/jryb Data wydania decyzji 2015-01-08 Data obowiązywania decyzji 2019-09-14 Data upublicznienia 2014-07-23 Numer decyzji 2/2015 Numer uchwały 46/2014 Tytuł zamierzonego uwolnienia Zamierzone uwolnienie genetycznie zmodyfikowanej topoli w celach innych niż wprowadzenie do obrotu, mające na celu charakterystykę i ocenę zmienionych właściwości przyrostu biomasy drewna i wydajności zużycia wody w zmiennych warunkach środowiskowych w latach 2015-2019 Title Intended release of genetically modified poplar trees with changed biomass production properties and water use efficiency into field experiments during 2015-2019 Cel zamierzonego uwolnienia Celem doświadczeń jest charakterystyka morfologiczna i fizjologiczna modyfikowanych genetycznie topoli w aspekcie przyrostu drewna, kompozycji ściany komórkowej, zużycia wody, odporności na zmienne warunki pogodowe i naturalne roślinne patogeny. Celem badań laboratoryjnych materiału z warunków polowych jest poznanie mechanizmów programowej śmierci komórki i starzenia się roślin, poprzez regulację wydajności procesów oddychania i fotosyntezy w mitochondriach i chloroplastach. Tylko warunki polowe potwierdzą współzależności zachodzące na poszczególnych poziomach regulacji komórkowej podstawowych procesów życiowych roślin. Geny, które wpływają na procesy przez nas badane to: LSD1, PAD4, EDS1, CAO1, MPK4. Przebadane zostaną genetycznie zmodyfikowane rośliny topoli z wyciszeniami genów (patrz: Załącznik 2). Celem aplikacyjnym będzie produkcja drewna, papieru, etanolu z roślin o podwyższonej odporności i zwiększonym przyroście biomasy w warunkach ograniczonego zużycia środków ochrony roślin. Prowadzone doświadczenia są kontynuacją i rozszerzeniem prac prowadzonych w ramach poprzedniego uwolnienia. Modyfikowane genetycznie rośliny topoli pochodzą z laboratorium Umea Plant Science Center, Umea, Szwecja. Abstract The aim of the field experimental GMO releasing is a morphological and physiological analysis of genes which take a part in various biological processes: biomass production, cell wall composition, water use Strona 1 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO efficiency, resistance to biotic and abiotic stresses. The aim of the laboratory experiments using GMO plant material from field experiments is knowledge about programmed cell death and plant senescence based on photorespiration, photosynthesis mechanisms in mitochondria, chloroplasts and signal transduction between these organelles. Light perception and its spectral composition takes a main part in these mechanisms. Field experiments can prove correlations occur on each level of basic plant living processes regulation. Genes that influence on above processes are under our interest: LSD1, PAD4, EDS1, CAO1, MPK4. GMO poplar plants with silenced expressions of chosen genes will be examined (see: Załącznik 2). In the future, application aim of the project is production of wood, paper and ethanol (bio-fuel) using plants confer higher pathogen resistance and biomass production and reduction in the use of plant protection toxic chemicals. The experiments which are conducted are the continuation and extension of analysis performed during previous release. GMO poplar plants come from Umea Plant Science Center laboratory, Umea, Sweden Strona 2 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Użytkownik 1.INFORMACJE O UŻYTKWONIKU GMO I OSOBACH ODPOWIEDZIALNYCH ZA PRZYGOTOWANIE I PRZEPROWADZENIE ZAMIERZONEGO UWOLNIENIA 1.1. Nazwa i siedziba lub nazwisko i adres użytkownika GMO Dane osoby prawnej Nazwa użytkownika Szkoła Główna Gospodarstwa Wiejskiego Kod pocztowy 02-776 Miejscowość Warszawa Ulica Nowoursynowska Numer budynku 159 Numer lokalu ..................................... Adres e-mail ..................................... Telefon ..................................... Faks ..................................... 1.2. Imię i nazwisko oraz informacja o kwalifikacjach fachowych osoby (osób) odpowiedzialnej za przygotowanie i przeprowadzenie zamierzonego uwolnienia GMO do środowiska Dane osoby odpowiedzialnej Tytuł naukowy Prof. dr hab. Imię pracownika Stanisław Nazwisko pracownika Karpiński Telefon ..................................... Faks ..................................... Adres e-mail ..................................... Kwalifikacje zawodowe pracownika udział w badaniach z użyciem GMO: 1. Transgenic control of photosynthetic electron transport, oxygen and hydrogen peroxide production in higher plants VR (Swedish Research Council - Szwedzki Komitet Badań Naukowych - S. Karpiński był kierownikiem projektu, 2050 tys. koron szwedzkich w latach 1998 - 2004). 2. Genetic control of biotic and abiotic stress tolerance and redox signalling circuitry in higher plants. FORMAS (Swedish Research Council for Environment, Agricultular Sciences and Spatial Planning Szwedzka Rada Badań Środowiska, Nauk Rolniczych i Zagospodarowania Przestrzennego – S. Karpiński był kierownikiem projektu, 940 tys. koron szwedzkich w latach 2003 - 2005). 3. The role of NPR1 in redox-mediated communication between pathogen resistance and excess light acclimation pathways in Arabidopsis. FORMAS (Swedish Research Council for Environment, Agricultular Sciences and Spatial Planning - Szwedzka Rada Badań Środowiska, Nauk Rolniczych i Zagospodarowania Przestrzennego – S. Karpiński był kierownikiem projektu, 580 tys. koron szwedzkich w latach 2004 - 2006). 4. Genes and light mechanisms controlling plants growth rate, development, environmental stress tolerance and yield quality. VR (Swedish Research Council – Szwedzki Komitet Badań Naukowych - S. Karpiński jest kierownikiem projektu, 1350 tys. koron szwedzkich w latach 2005-2008). 5. Swedish Strategic Fundation – Szwedzka Strona 3 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Fundacja Celowych Badań Podstawowych Arabidopsis platform (S. Karpiński był kierownikiem projektu, 450 tys. koron szwedzkich w latach 1998–2001). 6. Knut och Alice Wallenberg Foundation – Fundacja Knut och Alice Wallenberg, Arabidopsis platform (S. Karpiński był kierownikiem projektu, 750 tys. koron szwedzkich w latach 2001-2002). 7. Genes involved in regulation of stress tolerance and redox signaling circuitry in higher plants. A coordinated Swedish – U.K. interdisciplinary STINT fellowship program on higher plants (Swedish Agency for International Collaboration in Higher Education and Research). Interdyscyplinarny bilateralny szwedzko-brytyjski projekt badawczy roślin wyższych (Szwedzka Agencja Współpracy Międzynarodowej i Szkolnictwa Wyższego). S. Karpiński był kierownikiem i koordynatorem badań tego projektu; 3150 tys. koron szwedzkich w latach 2002 - 2005). Współpraca pomiędzy zespołami prof. PM Mullineaux i prof. Z Miszalskiego 8. Projekt UE „Cropstress” project (QLAM-2001-00424, lata 2003-2005). Udział w projekcie obejmował miedzyinnymi współpracę między Instytutem Fizjologii Roślin PAN (Zakład Biologii Stresu, prof. Z. Miszalski), który uzyskał tytuł Centrum Doskonałości i Department of Botany at the Stockholm University (Laboratory of Oxidative Stress, prof. S. Karpinski – Instytutem Botaniki Uniwersytetu Sztokholmskiego – Laboratorium Stresu Oksydacyjnego). 9. Projekt Welcome z Fundacji na Rzecz Nauki Polskiej (WELCOME 2008/1, lata 2008-2014). Udział w projekcie obejmował m. in. charakterystykę modyfikowanych genetycznie topól z konstrukcjami wyciszającymi geny endogenne związane z produkcją biomasy, kompozycją ściany komórkowej, wydajnością zużycia wody, przewodnictwem sygnałów komórkowych oraz wydajnością oddychania i fotosyntezy. Tytuł naukowy Dr hab. inż. Imię pracownika Marcin Nazwisko pracownika Filipecki Telefon 22 59-321-52 Faks 22 59-321-52 Adres e-mail [email protected] Kwalifikacje zawodowe pracownika ................................................................................................................................................................................ Strona 4 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Uwolnienie 2. INFORMACJE O ZAMIERZONYM UWOLNIENIU GMO DO ŚRODOWISKA a) Tytuł zamierzonego uwolnienia GMO do środowiska Zamierzone uwolnienie genetycznie zmodyfikowanej topoli w celach innych niż wprowadzenie do obrotu, mające na celu charakterystykę i ocenę zmienionych właściwości przyrostu biomasy drewna i wydajności zużycia wody w zmiennych warunkach środowiskowych w latach 2015-2019 Title Intended release of genetically modified poplar trees with changed biomass production properties and water use efficiency into field experiments during 2015-2019 b) Cel zamierzonego uwolnienia GMO do środowiska i krótkie streszczenie Celem doświadczeń jest charakterystyka morfologiczna i fizjologiczna modyfikowanych genetycznie topoli w aspekcie przyrostu drewna, kompozycji ściany komórkowej, zużycia wody, odporności na zmienne warunki pogodowe i naturalne roślinne patogeny. Celem badań laboratoryjnych materiału z warunków polowych jest poznanie mechanizmów programowej śmierci komórki i starzenia się roślin, poprzez regulację wydajności procesów oddychania i fotosyntezy w mitochondriach i chloroplastach. Tylko warunki polowe potwierdzą współzależności zachodzące na poszczególnych poziomach regulacji komórkowej podstawowych procesów życiowych roślin. Geny, które wpływają na procesy przez nas badane to: LSD1, PAD4, EDS1, CAO1, MPK4. Przebadane zostaną genetycznie zmodyfikowane rośliny topoli z wyciszeniami genów (patrz: Załącznik 2). Celem aplikacyjnym będzie produkcja drewna, papieru, etanolu z roślin o podwyższonej odporności i zwiększonym przyroście biomasy w warunkach ograniczonego zużycia środków ochrony roślin. Prowadzone doświadczenia są kontynuacją i rozszerzeniem prac prowadzonych w ramach poprzedniego uwolnienia. Modyfikowane genetycznie rośliny topoli pochodzą z laboratorium Umea Plant Science Center, Umea, Szwecja. Abstract The aim of the field experimental GMO releasing is a morphological and physiological analysis of genes which take a part in various biological processes: biomass production, cell wall composition, water use efficiency, resistance to biotic and abiotic stresses. The aim of the laboratory experiments using GMO plant material from field experiments is knowledge about programmed cell death and plant senescence based on photorespiration, photosynthesis mechanisms in mitochondria, chloroplasts and signal transduction between these organelles. Light perception and its spectral composition takes a main part in these mechanisms. Field experiments can prove correlations occur on each level of basic plant living processes regulation. Genes that influence on above processes are under our interest: LSD1, PAD4, EDS1, CAO1, MPK4. GMO poplar plants with silenced expressions of chosen genes will be examined (see: Załącznik 2). In the future, application aim of the project is production of wood, paper and ethanol (bio-fuel) using plants confer higher pathogen resistance and biomass production and reduction in the use of plant protection toxic chemicals. The experiments which are conducted are the continuation and extension of analysis performed during previous release. GMO poplar plants come from Umea Plant Science Center laboratory, Umea, Sweden Strona 5 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Biorca 3. INFORMACJE O GMO a) Charakterystyka biorcy; organizmu rodzicielskiego (o ile występuje) 3.1. Nazwa taksonomiczna Żadna z powyższych Jeżeli w powyższym słowniku wybrana została wartość "Żadne z powyższych" należy wypełnić pole: Rośliny: 1. Populus trichocarpa L. 2. Populus tremula L. x Populus tremuloides Michx, Bakterie: 1. Escherichia coli, 2. Agrobacterium tumefaciens 3.2. Taksonomia Rodzina: Salix Rodzaj: Salicaceae Gatunek: Populus trichocarpa L; Populus tremula L x Populus tremuloides Michx Domena: Bakterie Klasa: Gammaprobacteria Rząd: Enterobacteriales Rodzina: Enterobacteriaceae Rodzaj: Escherichia Gatunek: Escherichia coli; Domena: Bakterie Klasa: Alphaproteobacteria Rząd: Rhizobiales Rodzina: Rhizobiaceae Rodzaj: Agrobacterium Gatunek: Agrobacterium tumefaciens. 3.3. Inne nazwy (w szczególności: nazwa zwyczajowa, nazwa szczepu, nazwa hodowlana) Rośliny: 1. topola – topola kalifornijska (gatunek dziki) 2. topola- mieszaniec międzygatunkowy topoli osiki (P. tremula L.) i topoli osikowej (P. tremuloides Michx.) (gatunek dziki) Bakterie: 1. szczepy laboratoryjne E. coli : DB3.1, DH5α, XL1-Blue MRF’, TOP10F’ 2. szczepy laboratoryjne A. tumefaciens: GVC31010, GV3101, LBA4404, 3.4. Cechy fenotypowe i genetyczne Cechy fenotypowe topoli odpowiadają cechom typowym dla każdego z gatunków i odmianowym. Cechy bakterii są typowe dla danego szczepu: - (Plant Genetic Transformation and Gene Expression. Eds. J. Draper, R. Scott, P. Armitage, R. Walden. 1988. Blackwell Sci. Publ.; Hellens R., Mullineaux P. Technical Focus: A guide to Agrobacterium binary Ti vectors. 2000. Trends in Plant Sci. 5: 446-451.) 3.5. Stopień pokrewieństwa pomiędzy dawcą i biorcą lub między organizmami rodzicielskimi Sekwencje pochodzące z danego gatunku są przenoszone do tego samego gatunku (punkt 3.1). Bakterie są zdolne do przenoszenia materiału genetycznego w kontrolowanych warunkach laboratoryjnych, w wyniku zastosowania specjalnie do tego celu opracowanych procedur. 3.6. Opis technik identyfikacji i detekcji nie dotyczy 3.7. Dokładność, powtarzalność i specyficzność technik identyfikacji i detekcji nie dotyczy 3.8. Opis geograficznego zasięgu i naturalnego środowiska organizmu wraz z informacją o naturalnych wrogach, ofiarach, pasożytach, konkurentach, symbiontach i gospodarzach Topole to drzewa z rodziny wierzbowatych rosnących w klimacie umiarkowanym, odmiany użytkowe: dostarczające miękkiego drewna używanego do produkcji m.in. papieru, zapałek; wykorzystywane również jako modelowe rośliny laboratoryjne. Agrobacterium tumefaciens jest bakterią glebową, Escherichia. coli występuje w jelitach ssaków. W celach naukowych stosowane szczepy bakteryjne są odpowiednio zmodyfikowane i przeżywają tylko w warunkach laboratoryjnych. 3.9. Możliwość przeniesienia informacji genetycznej do innych organizmów. Krzyżowanie z innymi gatunkami użytkowymi lub dzikimi Możliwość przenoszenia DNA między genetycznie zmodyfikowanymi i nie modyfikowanymi roślinami jest bardzo mało prawdopodobna. Pola doświadczalne KGHiBR położone są na terenie miejskim. Strona 6 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Topola jest rośliną obcopylną. Gatunki te nie krzyżują się z innymi gatunkami dzikimi. Ponadto topola nie wytwarza organów generatywnych do 9-12 roku życia. Bakterie są zdolne do przenoszenia materiału genetycznego w kontrolowanych warunkach laboratoryjnych, w wyniku zastosowania specjalnie do tego celu opracowanych procedur. Niepotrzebny do dalszych badań materiał biologiczny jest niszczony po zakończeniu doświadczenia. 3.10. Stabilność genetyczna organizmów i czynniki na nią wpływające Stabilne 3.11. Cechy patologiczne, ekologiczne i fizjologiczne a) cechy patologiczne, stosownie do istniejących norm dotyczących ochrony zdrowia ludzi lub ochrony środowiska Nie dotyczy b) wymiana pokoleń w naturalnym ekosystemie; płciowe i bezpłciowe cykle reprodukcyjne Topole rozmnażane są wegetatywnie, do 9-go ,12-go roku życia nie wytwarzają organów do rozmnażania generatywnego. Bakterie rozmnażają się przez podział. c) zdolność do samodzielnego utrzymania się w środowisku, w tym wytwarzanie diaspor między innymi przez nasiona, spory. Specyficzne czynniki wpływające na przeżywalność i rozsiewanie Topola jest rośliną obcopylną. Gatunki te nie krzyżują się z innymi gatunkami dzikimi. Ponadto topola nie wytwarza organów generatywnych do 9-12 roku życia. Samodzielne utrzymanie się bakterii w środowisku jest mało prawdopodobne ze względu na system mutacji znacznie ograniczające zdolności adaptacyjne tych szczepów. d) patogenność: infekcyjność, toksyczność, alergenność, nośniki (wektory) patogenów, inne wektory, wpływ na organizmy nieobjęte celowym działaniem GMO. Możliwość aktywacji wirusów utajonych (prowirusów); zdolność do kolonizacji innych organizmów nie patogenne e) oporność na antybiotyki i możliwość wykorzystywania tych antybiotyków w leczeniu ludzi i zwierząt i w profilaktyce nie patogenne f) rola w procesach środowiskowych, produkcja, przemiany metaboliczne, rozkład materii organicznej, inne Wybrane geny są zaangażowane w odpowiedź roślin na stresy biotyczne i abiotyczne. 3.12. Charakterystyka wcześniej wprowadzonych wektorów Ogólna chcrakterystyka wcześniej wprowadzonych wektorów Wektory wewnętrzne nie występują a) sekwencja Nie dotyczy b) częstotliwość użytkowania Nie dotyczy c) specyficzność Nie dotyczy Strona 7 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO d) obecność genów nadających oporność Nie dotyczy 3.13. Opis wcześniejszych modyfikacji genetycznych Rośliny biorcy nie były wcześniej modyfikowane genetycznie. Stosowane szczepy laboratoryjne bakterii są dostępne komercyjnie na rynku, mają ściśle określony genotyp i są powszechnie stosowane w laboratoriach UE. Strona 8 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Dawca 3. INFORMACJE O GMO b) Charakterystyka dawcy 3.14. Nazwa taksonomiczna Żadna z powyższych Jeżeli w powyższym słowniku wybrana została wartość "Żadne z powyższych" należy wypełnić pole: Rośliny: - Populus trichocarpa L. – sekwencje genów uczestniczących w odpowiedzi rośliny na stresy biotyczne i abiotyczne. - Populus tremula L x tremuloides Michx - sekwencje genów uczestniczących w odpowiedzi rośliny na stresy biotyczne i abiotyczne. Bakterie: - Agrobacterium tumefaciens – wektor insercyjny pH7GWIWG2(I). 3.15. Taksonomia Rodzina: Salix Rodzaj: Salicaceae Gatunek: Populus trichocarpa L; Populus tremula L. x tremuloides Michx Domena: Bakterie Klasa: Alphaproteobacteria Rząd: Rhizobiales Rodzina: Rhizobiaceae Rodzaj: Agrobacterium Gatunek: Agrobacterium tumefaciens 3.16. Inne nazwy (w szczególności: nazw zwyczajowa, nazwa szczepu, nazwa hodowlana) Escherichia coli – pałeczka okrężnicy, w przypadku pozostałych bakterii używa się nazwy taksonomiczne. 3.17. Cechy fenotypowe i genetyczne Cechy fenotypowe topoli odpowiadają cechom typowym dla każdego z gatunków i odmian. Cechy bakterii są typowe dla danego szczepu: - (Plant Genetic Transformation and Gene Expression. Eds. J. Draper, R. Scott, P. Armitage, R. Walden. 1988. Blackwell Sci. Publ.; Hellens R., Mullineaux P. Technical Focus: A guide to Agrobacterium binary Ti vectors. 2000. Trends in Plant Sci. 5: 446-451.) 3.18. Stopień pokrewieństwa pomiędzy dawcą i biorcą lub między organizmami rodzicielskimi Sekwencje pochodzące z danego gatunku są przenoszone do tego samego gatunku (punkt 3.1). Bakterie są zdolne do przenoszenia materiału genetycznego w kontrolowanych warunkach laboratoryjnych, w wyniku zastosowania specjalnie do tego celu opracowanych procedur. 3.19. Opis technik identyfikacji i detekcji Nie dotyczy 3.20. Dokładność, powtarzalność i specyficzność technik identyfikacji i detekcji Nie dotyczy 3.21. Opis geograficznego zasięgu i naturalnego środowiska organizmu wraz z informacją o naturalnych wrogach, pasożytach, konkurentach, symbiontach i gospodarzach Topola kalifornijska to odmiana użytkowa, stosowana w praktyce, jest również modelową rośliną laboratoryjną. Topola osika to odmiana użytkowa, stosowana w praktyce. Agrobacterium tumefaciens jest bakterią glebową 3.22. Możliwość przeniesienia informacji genetycznej do innych organizmów Krzyżowanie z innymi gatunkami użytkowymi lub dzikimi Nie dotyczy 3.23. Stabilność genetyczna organizmów i czynniki na nią wpływające Strona 9 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Nie dotyczy, ponieważ w badaniach nie będą wykorzystane organizmy dawców, a tylko sekwencje DNA z nich pochodzące 3.24. Cechy epidemiologiczne (patologiczne i fizjologiczne oraz ekologiczne) a) cechy patologiczne, stosownie do istniejących norm dotyczących ochrony zdrowia ludzi lub ochrony środowiska Nie dotyczy, ponieważ w badaniach nie będą wykorzystane organizmy dawców, a tylko sekwencje DNA z nich pochodzące. b) Wymiana pokoleń w naturalnym ekosystemie; płciowe i bezpłciowe cykle reprodukcyjne Nie dotyczy c) zdolność do samodzielnego utrzymania się w środowisku, w tym wytwarzanie diaspor między innymi przez nasiona, spory. Specyficzne czynniki wpływające na przeżywalność i rozsiewanie Nie dotyczy d) patogenność: infekcyjność, toksyczność, alergenność, nośniki (wektory) patogenów, inne wektory, wpływ na organizmy nieobjęte celowym oddziaływaniem GMO; możliwość aktywacji wirusów utajonych (prowirusów); zdolność do kolonizacji innych organizmów Nie patogenne e) oporność na antybiotyki i możliwość wykorzystywania tych antybiotyków w leczeniu ludzi i zwierząt i w profilaktyce Nie dotyczy f) rola w procesach środowiskowych, produkcja, przemiany metaboliczne, rozkład materii organicznej, inne Nie dotyczy 3.25. Charakterystyka wcześniej wprowadzonych wektorów Charaktetystyka wcześniej wprowadzonych wektorów Nie dotyczy a) sekwencja Nie dotyczy b) częstość mobilizacji Nie dotyczy c) specyficzność Nie dotyczy d) obecność genów nadających oporność Nie dotyczy 3.26. Opis wcześniejszych modyfikacji genetycznych Rośliny dawcy nie były wcześniej modyfikowane genetycznie. Stosowane szczepy laboratoryjne bakterii są dostępne komercyjnie na rynku, mają ściśle określony genotyp i są powszechnie stosowane w laboratoriach UE. Strona 10 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Wektor 3. INFORMACJE O GMO c) Charakterystyka wektora 3.27. Właściwości i źródło wektora Wektory binarne: pH7GWIWG2(I) - wektor oparty na systemie Gateway. M., Inze, D., Depicker, A., Gateway vectors for Agrobacterium-mediated plant transformation. Trends Plant Sci. 2002 May;7(5): 193-195. Wektory pośrednie: pCRII-TOPO pENTR - komercyjne wektory stosowane do klonowania sekwencji DNA w laboratoryjnych szczepach E. coli. Dostępne w firmie Invitrogen (www.invitrogen.com). 3.28. Sekwencja transpozonów, wektorów i innych niekodujących odcinków genetycznych, użytych do konstrukcji GMO i zrobienia wektorów wprowadzających oraz pozwalających na ich funkcjonowanie w GMO Wektory binarne: pH7GWIWG2(I) - wektor oparty na systemie Gateway. Jest powszechnie używany do transformacji roślin. Zawiera sekwencje graniczną T-DNA (tzw. prawą i lewą), genów selekcyjny warunkujący oporność na higromycynę. Ekspresja genów warunkowana jest sekwencjami promotorowymi: promotorem 35S CaMV. Koniec transkrypcji warunkowany jest sygnałem poliadenylacji z syntazy nopalinowej. M., Inze, D., Depicker, A., Gateway vectors for Agrobacterium-mediated plant transformation. Trends Plant Sci. 2002 May;7(5): 193-195. Wektory pośrednie: pCRII-TOPO pENTR - komercyjne wektory stosowane do klonowania sekwencji DNA w laboratoryjnych szczepach E. coli. Są to powszechnie używane plazmidy do badań w biologii molekularnej wielu różnych organizmów. W swojej strukturze zawierają sekwencje odpowiedzialne za amplifikację w komórce bakteryjnej (ORI), gen warunkujący oporność na antybiotyk, sekwencje umożliwiające łatwe klonowanie insertów. Wszystkie te wektory są dostępne komercyjnie w firmie Invitrogen. 3.29. Częstość mobilizacji wbudowanego wektora lub zdolność przenoszenia i metody określenia tych procesów Fragment wbudowanego do chromosomu wektora (tzn. T-DNA) nie ulega dalszej mobilizacji. 3.30. Informacje o tym, w jakim stopniu wektor jest ograniczony do DNA wymaganego do spełnienia planowanych funkcji Wektor został skonstruowany tak, aby zminimalizować ilość DNA niepotrzebnego do procesu transgenezy. Do GMO wprowadzany jest odcinek T-DNA ograniczony sekwencjami LB i RB (left border, right border) w pojedynczej lub wielu kopiach. Strona 11 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO GMO 3. INFORMACJE O GMO d) Charakterystyka GMO 3.31. Informacje związane z modyfikacjami genetycznymi a) metody modyfikacji Modyfikacja genetyczna topoli polegała na wprowadzeniu do roślin topoli za pośrednictwem bakterii Agrobacterium thumefaciens konstruktów wyciszających interesujące nas geny lub/i ich kombinacje (patrz: Załącznik 2). Obserwacje i wnioski dotyczące funkcji tych genów mogą być wysnute tylko na podstawie zmian fenotypowych modyfikowanych genetycznie roślin. Technologia RNAi. b) metody konstrukcji i wprowadzenia insertu bądź insertów do biorcy lub usunięcia sekwencji Transformacja komórek roślinnych niżej wymienionych gatunków odbywa się metodą pośrednią z użyciem wektorów tj. Agrobacterium tumefaciens: 1. Populus trichocarpa L. 2. Popilus tremula L x tremuloidesMichx Komórki Agrobacterium transformowane są plazmidami za pomocą elektroporacji. Komórki E. coli za pomocą metody szoku cieplnego. c) opis insertu i/ lub konstrukcji wektora Insert stanowią sekwencje cDNA kodujące białka związane z odpowiedzią roślin na stresy biotyczne i abiotyczne w orientacji sens-intron-antysens, generujące w roślinie sygnał wyciszający (RNAi). d) metody użyte do selekcji Do selekcji modyfikowanych genetycznie linii topoli e) czystość insertu - obecność sekwencji o nieznanych funkcjach Nie stwierdzono sekwencji o nieznanych funkcjach f) sekwencja, lokalizacja i funkcja wprowadzonych/ usuniętych/ zmienionych fragmentów DNA, ze szczególnym odniesieniem do jakiejkolwiek znanej szkodliwej sekwencji Nie dotyczy g) umiejscowienie insertu w komórce (chromosomy, mitochondria, chloroplasty, cytoplazma) i metody identyfikacji umiejscowienia insertu Transgen wbudowywany jest do chromosomu - DNA jądrowego w procesie rekombinacji niehomologicznej. Lokalizacja plazmidów w komórkach bakteryjnych jest pozachromosomowa. h) wielkość usuniętego fragmentu i jego funkcje Nie dotyczy 3.32. Informacje o uzyskanym GMO Informacje o uzyskanym GMO Uzyskane GMO to: rośliny modyfikowane genetycznie zawierające odpowiednie T-DNA oraz laboratoryjne szczepy bakterii zawierające odpowiednie plazmidy. a) opis zmienionych cech genetycznych i fenotypowych GMO Rośliny: 1. Populus trichocarpa L. - oporność na higromycynę, zmiana ekspresji badanych genów. 2. Populus tremula L. x tremuloides Michx - oporność na higromycynę, zmiana ekspresji badanych genów. Strona 12 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Bakterie: charakteryzują się odpornością na jeden z wymienionych antybiotyków używanych do selekcji: ampicylina, rifampicyna, spektomycyna, gentamycyna, streptomycyna. b) struktura i liczba kopii każdego wektora lub dodanego kwasu nukleinowego w GMO Transgen integrowany jest z chromosomem roślinnym jako struktura liniowa. W roślinach może występować od jednej do kilku kopii transgenu po transformacji. Ilość kopii i poprawność integracji jest sprawdzana w trakcie badań met. hybrydyzacji DNA. Dotyczy to wszystkich gatunków roślin. W komórce bakteryjnej struktura plazmidu jest kolista, nie zintegrowana z chromosomem. Liczba kopii od kilku do kilkuset w komórce. c) stabilność genetyczna i fenotypowa Transgeny są stabilne, to znaczy nie ulegają samorzutnej mobilizacji. Ekspresja transgenów jest stabilna w większości przypadków. Transgeny są dziedziczone w kolejnych pokoleniach i ulegają rozszczepieniu zgodnie z prawami Mendla. Dotyczy to wszystkich gatunków roślin. W komórkach bakteryjnych plazmidy przekazywane są do komórek potomnych. d) charakterystyka i poziom ekspresji nowego materiału genetycznego; metody i czułość pomiaru; części organizmu, gdzie występuje ekspresja (np. korzeń) Wprowadzone sekwencje nukleinowe ulegają ekspresji na zróżnicowanym poziomie. Poziom ekspresji i aktywność wprowadzonych sekwencji są stosunkowo proste do śledzenia. Ekspresję można śledzić wykonując analizy molekularne - RT-PCR. e) funkcja nowego białka Konstrukcje wyciszające – struktury transgenów powodują przede wszystkim degradację natywnego mRNA, a w konsekwencji ograniczenie syntezy funkcjonalnego polipeptydu; zastosowane są tu fragmenty badanych genów. Badane sekwencje biorą udział w odpowiedzi rośliny na stresy biotyczne i abiotyczne. f) techniki identyfikacji i detekcji wprowadzonej sekwencji, wektorów i białka oraz metabolitów będących produktami wprowadzonego genu Wprowadzone do komórki roślinnej T-DNA identyfikowane jest metodą PCR i/lub metodą hybrydyzacji DNA :: DNA (Southern). Detekcja DNA plazmidowego w komórkach bakteryjnych - analiza restrykcyjna oraz PCR. g) czułość, wiarygodność (w rozumieniu ilościowym) i specyficzność technik identyfikacji i detekcji Przedstawione powyżej molekularne metody detekcji są bardzo czułe i zaliczane do standardowych w tej dziedzinie. h) zmiany współczynnika rozmnożenia, zdolności do rozsiewania i przeżywalności GMO w porównaniu do organizmu biorcy Wprowadzenie transgenu może zmienić zdolności do rozmnażania generatywnego i zdolności do przetrwania roślin modyfikowanych genetycznie, w porównaniu z organizmem wyjściowym w warunkach polowych. Wprowadzenie transgenu nie zwiększy przewagi selekcyjnej w przypadku uwolnienia GMO do środowiska naturalnego. Zdolność do przetrwania bakterii w warunkach laboratoryjnych zależy od rodzaju wprowadzonego wektora (markery selekcyjne). 3.33. Opis wcześniejszych uwolnień GMO Nie dotyczy 3.34. Ustalenia zdrowotne Ustalenia zdrowotne Strona 13 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Nie mają negatywnego wpływu na zdrowie człowieka i zwierząt. a) efekty toksyczne lub alergiczne GMO lub produktów ich metabolizmu Żaden z używanych transgenów nie koduje substancji toksycznych. Potencjalne właściwości alergenne są bardzo mało prawdopodobne. Żaden ze szczepów bakteryjnych nie jest patogenny, ich produkty nie są toksyczne ani nie staną się toksyczne. Ich alergenność jest bardzo mało prawdopodobna. b) produkty stwarzające zagrożenie Nie dotyczy c) porównanie GMO z dawcą, biorcą lub organizmem rodzicielskim (o ile występuje), w odniesieniu do patogenności Nie dotyczy d) zdolność do kolonizacji Nie dotyczy e) patogenność organizmu dla ludzi, którzy są immunokompetentni (o sprawnym układzie odpornościowym) Nie dotyczy f) wywołane dolegliwości i mechanizm patogenności, włączając inwazyjność i złośliwość (zjadliwość) choroby Nie dotyczy g) zaraźliwość (zakaźność) Nie dotyczy h) dawka infekcyjna Nie dotyczy i) zakres gospodarzy i możliwość ich zmiany Nie dotyczy j) możliwość przeżycia poza organizmem gospodarza Nie dotyczy k) obecność wektorów lub możliwość rozprzestrzeniania się Nie dotyczy l) stabilność biologiczna Nie dotyczy m) formy oporne na antybiotyki Nie dotyczy n) możliwość leczenia Nie dotyczy Strona 14 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Warunki uwolenienia 4. Informacje dotyczące warunków zamierzonego uwolnienia GMO do środowiska a) Informacje o zamierzonym uwolnieniu do środowiska 4.1. Opis proponowanych zamierzonych uwolnień do środowiska, zawierający zamierzone i przewidywane skutki Planowane jest założenie doświadczenia w 1 lokalizacji Lokalizacja - Pole doświadczalne WOLICA; Katedra Genetyki Hodowli i Biotechnologii Roślin; ul. Nowoursynowska 92/100, 02-130 Warszawa, województwo mazowieckie. Doświadczenia prowadzone będą zgodnie z ustaloną metodyką (Załącznik 2). 4.2. Dane dotyczące zamierzonego uwolnienia do środowiska a) termin zamierzonego uwolnienia początek 2015-04-15 koniec 2019-09-14 czas uwolnienia Wielokrotne na lata 2015-2019 b) charakter zamierzonego uwolnienia (jednorazowe, wielokrotne, czasowe) Wielokrotne na lata 2015-2019 4.3. Przygotowanie miejsca i jego charakterystyka Teren ogrodzony, typowy ekosystem rolny, przygotowany standardowo do wysadzania roślin topoli 4.4. Metody używane do uwolnienia do środowiska Ręczne wysadzanie młodych drzew topoli 4.5. Planowana ilość uwolnionego do środowiska GMO 288 roślin genetycznie zmodyfikowanych 4.6. Zmiany siedliska (typ i metoda uprawy, nawadnianie lub inne działania i ich znaczenie) Nie dotyczy 4.7. Sposoby ochrony pracowników w czasie zamierzonego uwalniania GMO do środowiska Nie występują żadne zagrożenia 4.8. Traktowanie terenu po zakończeniu uwolnienia do środowiska GMO (typ i metoda uprawy, nawadnianie lub inne działania i ich znaczenie) Podczas eksperymentu i po jego zakończeniu teren będzie kontrolowany co najmniej dwa razy w tygodniu 4.9. Przewidywane techniki eliminacji lub inaktywacji GMO po zakończeniu eksperymentu Po dokonaniu obserwacji fenotypowych, pomiarów biometrycznych, zbiorze materiału roślinnego do analiz molekularnych, rośliny zostaną zebrane, rozdrobnione (w przypadku topoli) i spalone, a użyte narzędzia starannie wyczyszczone. 4.10. Informacje i wyniki dotyczące wcześniejszego wprowadzenia do środowiska GMO, zwłaszcza w różnych skalach i różnych ekosystemach Nie dotyczy Strona 15 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Środowisko 5. CHARAKTERYSTYKA ŚRODOWISKA, DO KTÓREGO MA NASTĄPIĆ ZAMIERZONE UWOLNIENIE GMO 5.1. Jednostka podziału administracyjnego, lokalizacja geograficzna Jednostka podziału administracyjnego, lokalizacja geograficzna Lokalizacja - Pole doświadczalne WOLICA; Katedra Genetyki Hodowli i Biotechnologii Roślin; ul. Nowoursynowska 92/100, 02-130 Warszawa, województwo mazowieckie Województwo 5.2. Wielkość terenu mazowieckie Teren liczy 60 000 m2 pola, na którym prowadzone są uprawy roślin warzywnych. 1200 m2 liczy teren, na którym będzie prowadzone zamierzone uwolnienie GMO do środowiska. 5.3. Fizyczne lub biologiczne pokrewieństwo uwalnianego organizmu z ludźmi lub innymi ważnymi organizmami (gatunki pokrewne dzikie i użytkowe) Nie ma pokrewieństwa. 5.4. Sąsiedztwo ważnych biotopów lub obszarów chronionych rezerwat „Park Natoliński” (teren ogrodzony) 5.5. Odległość od najbliższego obszaru chronionego wody pitnej i obiektów wyróżniających się cennymi walorami przyrodniczymi ok 100 m do rezerwatu „Park Natoliński” (teren ogrodzony) 5.6. Charakterystyka klimatyczna regionu Nie ma specjalnych wymagań. Warunki klimatyczne typowe dla rejonów, gdzie rosną topole. 5.7. Charakterystyka geograficzna, geologiczna i gleboznawcza Warunki geologiczno-glebowe typowe dla rejonów, gdzie rosną topole. 5.8. Flora i fauna, włączając rośliny uprawne, żywy inwentarz i gatunki wędrowne Flora i fauna charakterystyczna dla warunków klimatycznych środkowej Europy. Na polu doświadczalnym uprawiane są w celach badawczych warzywa z rodziny dyniowatych (dynia zwyczajna, melon, ogórek) oraz psiankowatych (pomidor, papryka). Ze względu na brak pokrewieństwa nie możliwe jest krzyżowanie się tych gatunków warzyw z topolą. 5.9. Opis ekosystemów będących i niebędących celem wprowadzenia, na których może wystąpić efekt Flora i fauna charakterystyczna dla warunków klimatycznych środkowej Europy. Na polu doświadczalnym uprawiane są w celach badawczych warzywa z rodziny dyniowatych (dynia zwyczajna, melon, ogórek) oraz psiankowatych (pomidor, papryka). Ze względu na brak pokrewieństwa nie możliwe jest krzyżowanie się tych gatunków warzyw z topolą. 5.10. Porównanie naturalnego środowiska organizmu biorcy z proponowanym terenem uwolnienia do środowiska Środowisko identyczne. Strona 16 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO 5.11. Informacja o planowanych zmianach zagospodarowania terenu i planach rozwoju regionu, które mogą mieć wpływ na środowiskowe oddziaływanie zamierzonego uwolnienia Nie planujemy zmian zagospodarowania terenu 5.12. Liczebność społeczności lokalnej w zależności od obszaru zamierzonego uwolnienia ok. 350 osób zamieszkałych przy ul. Nowoursynowskiej na długości terenu zamierzonego uwolnienia 5.13. Główne kierunki działalności gospodarczej społeczności lokalnej, korzystającej z naturalnych zasobów obszaru Pole doświadczalne WOLICA należy do SGGW i prowadzone są na nim badania naukowe na warzywach z rodziny dyniowatych i psiankowatych (patrz pkt. 5.8) (Działalność doświadczalna w ramach statutowych badań Katedry Genetyki, Hodowli i Biotechnologii Roślin). W sąsiedztwie pola doświadczalnego nie ma gospodarstw prowadzących działalność gospodarczą, a uzyskane na polu doświadczalnym warzywa są jedynie przedmiotem badań naukowych Strona 17 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Oddziaływanie 6. Informacje o oddziaływaniach między GMO a środowiskiem a) Charakterystyka oddziaływań środowiska na przeżycie, rozmnażanie i rozpowszechnianie GMO 6.1. Cechy biologiczne mające wpływ na przetrwanie, rozmnażanie i rozprzestrzenianie Topola jest rośliną obcopylną. Gatunki te nie krzyżują się z innymi gatunkami dzikimi. Ponadto topola nie wytwarza organów generatywnych do 9-12 roku życia. 6.2. Cechy biologiczne mające wpływ na przetrwanie, rozmnażanie i rozprzestrzenianie Przedmiotem badań są modyfikowane genetycznie linie topoli, których geny związane z odpowiedzią na stresy biotyczne i abiotyczne zostały wyciszone, czyli nie spełniają swoich funkcji. Podlegają one wpływom środowiska w takim samym stopniu jak odmiany nie modyfikowane genetycznie, a linie z wyłączoną funkcją genów są bardziej wrażliwe na bodźce środowiskowe. 6.3. Wrażliwość na specyficzne warunki Temperatura, herbicydy. b) Oddziaływanie ze środowiskiem 6.4. Przewidziane środowisko GMO Pole doświadczalne SGGW na którym prowadzone są badania naukowe. 6.5. Wyniki badań nad zachowaniem i charakterystyką GMO w kontrolowanych warunkach wzrostu, takich jak laboratoryjnie odtworzone ekosystemy, komory wzrostu, cieplarnie i inne Wyniki badania modyfikowanych genetycznie roślin topoli w warunkach szklarniowych dają gwarancję braku jakiegokolwiek negatywnego wpływu na otoczenie. 6.6. Zdolność przenoszenia materiału genetycznego a) z GMO do organizmów występujących w ekosystemie Topola nie wytwarza organów generatywnych do 9-12 roku życia. Planujemy zakończenie doświadczeń na długo przed pojawieniem się organów generatywnych b) z organizmów występujących w ekosystemie do GMO Topola jest rośliną obcopylną. Gatunki te nie krzyżują się z innymi gatunkami dzikimi. Zapylenie przez inną odmianę możliwe, ale nie pociąga za sobą żadnych negatywnych skutków. 6.7. Prawdopodobieństwo selekcji, po uwolnieniu do środowiska, prowadzące do nieoczekiwanej ekspresji niepożądanych cech w GMO Geny, które są modyfikowane u topoli występują naturalnie w genomie tej rośliny, nie wprowadzamy nowych genów z innych gatunków, czy odmian. Nie przewidujemy wystąpienia cech innych niż zakładane. 6.8. Stosowane środki dla zabezpieczenia i sprawdzenia stabilności genetycznej; opis mechanizmów genetycznych, które mogą zapobiegać lub minimalizować rozprzestrzenianie się materiału genetycznego; metody sprawdzania stabilności genetycznej Metody weryfikujące stabilność genetyczną. Southern i northern blot są używane rutynowo do analizy genomowego DNA modyfikowanych genetycznie roślin. 6.9. Szlaki biologicznego rozprzestrzeniania, znane lub potencjalne sposoby rozsiewania, włączając wdychanie, przyjmowanie pokarmu, przenikanie przez glebę lub skórę, inne Strona 18 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Nie dotyczy 6.10. Opis ekosystemów, do których GMO mógłby |być przeniesiony Nie dotyczy c) Potencjalny wpływ na środowisko 6.11. Możliwość nadmiernego rozmnażania w środowisku Brak takiej możliwości 6.12. Konkurencyjność GMO w stosunku do niezmodyfikowanych biorców lub organizmów rodzicielskich Nie konkurencyjne 6.13. Identyfikacja i opis organizmów objętych celowym oddziaływaniem GMO Brak organizmów objętych celowym oddziaływaniem GMO 6.14. Przewidywany mechanizm i rezultaty oddziaływania między GMO a organizmem objętym celowym oddziaływaniem GMO Nie dotyczy 6.15. Identyfikacja i opis innych organizmów, na które mogą wpływać niezamierzone oddziaływania Brak organizmów na które mogą wpływać niezamierzone oddziaływania 6.16. Prawdopodobieństwo zmian biologicznych oddziaływań lub zmiany gospodarza Nie dotyczy 6.17. Znane lub przewidywane wpływy na organizmy nieobjęte celowym oddziaływaniem GMO w środowisku, zmiany konkurencyjności w stosunku do ofiar, gospodarzy, symbiontów, wrogów, pasożytów i patogenów Nie dotyczy 6.18. Możliwy wpływ na środowisko, wynikający z wzajemnego oddziaływania GMO i organizmów nieobjętych celowym oddziaływaniem GMO Nie dotyczy 6.19. Możliwe pozytywne i negatywne cechy u innych krzyżujących się gatunków, które mogą ujawniać się na skutek przeniesienia genów z GMO Nie jest możliwe przeniesienie genów z modyfikowanych genetycznie roślin topoli, ponieważ topola nie krzyżuje się z innymi gatunkami. Ponadto, czas trwania eksperymentu uniemożliwia powstanie organów generatywnych służących do rozmnażania oraz do modyfikowanych genetycznie roślin nie są wprowadzane obce geny. 6.20. Znany lub przewidywany udział w procesach biogeochemicznych Nie dotyczy 6.21. Inne potencjalnie możliwe interakcje i zależności ze środowiskiem biotycznym i abiotycznym Nie dotyczy Strona 19 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Pracownicy 7. INFORMACJE DOTYCZĄCE PRZYGOTOWANIA ZAWODOWEGO PRACOWNIKÓW 7.1. Imię i nazwisko oraz informacje o kwalifikacjach fachowych osoby odpowiedzialnej za działanie polegające na zamierzonym uwolnieniu GMO Dane pracownika Tytuł Imię ..................................... Nazwisko ..................................... Telefon ..................................... Faks ..................................... Adres e-mail ..................................... Kwalifikacje zawodowe ................................................................................................................................................................................ 7.2. Liczba osób zatrudnionych przy realizacji projektu (lista imienna) ................................................................................................................................................................................ 7.3. Wykształcenie i doświadczenie pracowników (w tym odbyte szkolenia) ................................................................................................................................................................................ Strona 20 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Tryb kontroli 8. INFORMACJE DOTYCZĄCE TRYBU KONTRLOLI I MONITOROWANIA PROCESU UWALNIANIA GMO DO ŚRODOWISKA a) Informacje o technice monitorowania 8.1. Metody monitorowania GMO i efektów uwolnienia do środowiska Metody biologii molekularnej 8.2. Specyficzność, czułość i wiarygodność technik monitorowania Southern i northern blot, PCR. 8.3. Techniki detekcji materiału genetycznego przenoszonego do innych organizmów Oporność na antybiotyki oraz techniki southern i northern blot, PCR. 8.4. Czas trwania i częstotliwość monitorowania Obszar pól doświadczalnych będzie monitorowany 2 razy w tygodniu, przez 2 lata po ukończeniu badań polowych zgodnie z metodyką. b) Kontrola zamierzonego uwalniania do środowiska 8.5. Metody i procedury zmierzające do uniknięcia lub zminimalizowania rozprzestrzeniania GMO poza miejscem uwolnienia do środowiska (izolacja przestrzenna lub mechaniczna) Genetycznie modyfikowane topole pochodzą z kultur in vitro. Rozmnażane są wegetatywnie. Zachowanie minimum 20 metrowej odległości od innych upraw. 8.6. Metody i procedury mające na celu ochronę miejsca uwolnienia GMO przed wtargnięciem osób nieupoważnionych Teren pól doświadczalnych jest zamknięty i monitorowany przez 24 godziny. Utworzona zostanie lista osób upoważnionych do kontrolowania doświadczeń 8.7. Metody i procedury ochrony miejsca uwolnienia przed innymi organizmami Nie dotyczy c) Izolacja przestrzenna 8.8. Planowana odległość od gatunków pokrewnych, zdolnych do krzyżowania się, dzikich i uprawnych Nie krzyżują się z innymi gatunkami 8.9. Metody zapobiegania niekontrolowanemu rozprzestrzenianiu się diaspor i pyłku Nie ma takiej możliwości, ponieważ czas trwania eksperymentu uniemożliwia powstanie organów generatywnych służących do rozmnażania oraz do modyfikowanych genetycznie roślin nie są wprowadzane obce geny. d) Plany reagowania na zagrożenie 8.10. Metody i procedury kontroli GMO, w| przypadku nieoczekiwanego rozprzestrzenienia Metody biologii molekularnej (southern, northern blot, PCR). 8.11. Plany ochrony zdrowia ludzi i środowiska, w przypadku wystąpienia niepożądanych efektów Nie dotyczy 8.12. Metody postępowania z GMO, stwarzającym zagrożenie (unieczynnienie, usunięcie ze środowiska) Strona 21 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Nie dotyczy 8.13. Metody eliminacji: roślin, zwierząt, gleby, inne, narażonych na kontakt z GMO po lub w trakcie rozprzestrzeniania Nie dotyczy 8.14. Metody izolacji obszarów zagrożonych rozprzestrzenieniem się GMO Nie dotyczy Strona 22 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Odpady 9. INFORMACJE DOTYCZĄCE POSTĘPOWANIA Z ODPADAMI 9.1. Rodzaj wytwarzanych odpadów Części zielone (pędy, liście), części zdrewniałe 9.2. Oczekiwana ilość odpadów 200 kg na koniec sezonu 9.3. Możliwe zagrożenia Nie dotyczy 9.4. Opis planowanego postępowania z odpadami, uwzględniający metody bezpiecznej dla zdrowia ludzi i środowiska dezaktywacji odpadów Mechaniczne rozdrobnienie, spalenie Strona 23 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Poprzednie uwolnienia 10. INFORMACJE O WYNIKACH POPRZEDNICH ZAMIERZONYCH UWOLNIEŃ GMO DO ŚRODOWISKA Dane o poprzednich uwolnieniach Informacje o wynikach poprzednich zamierzonych uwolnień GMO do środowiska Decyzja nr 02-03/2010 z dn. 31.12.2010 r., zmieniona decyzją nr 02-01/2011 z dn. 24.05.2011 r. a) Data wydanej zgody ..................................... Numer wydanej zgody ..................................... Początek ..................................... Koniec ..................................... Czas uwolnienia ................................................................................................................................................................................ b) Miejsce wprowadzenia Pole doświadczalne WOLICA; Katedra Genetyki Hodowli i Biotechnologii Roślin; ul. Nowoursynowska 92/100, 02-130 Warszawa, województwo mazowieckie. c) Cel wprowadzenia Celem doświadczeń w warunkach polowych jest: charakterystyka morfologiczna i fizjologiczna, szczególnie w aspekcie przyrostu rocznego drewna, kompozycji ściany komórkowej, zużycia wody, odporności na zmienne warunki pogodowe, zimową przeżywalność i naturalnie występujące w środowisku roślinne patogeny. Celem prowadzenia badań laboratoryjnych na materiale z warunków polowych jest: poznanie mechanizmów programowej śmierci komórki i starzenia się roślin, poprzez regulację wydajności procesów oddychania i fotosyntezy w mitochondriach i chloroplastach oraz transdukcji sygnałów pomiędzy tymi organellami. Światło, jego percepcja oraz spektralna kompozycja odgrywa szczególną rolę w tych mechanizmach. Tylko warunki polowe potwierdzą współzależności zachodzące na poszczególnych poziomach regulacji komórkowej podstawowych procesów życiowych roślin. Geny, które szczególnie wpływają na procesy przez nas badane to: LSD1, PAD4, EDS1, CAO1, MPK4 oraz nowe geny zidentyfikowane w regulonie LSD1. Celem aplikacyjnym w przyszłości będzie produkcja drewna, papieru, etanolu z roślin o podwyższonej odporności i zwiększonym przyroście biomasy w warunkach ograniczonego do minimum zużycia szkodliwych chemicznych środków ochrony roślin. d) Obserwacje po wprowadzeniu Nie zaobserwowano żadnych nieprawidłowości, związanych z niekontrolowanym rozpowszechnieniem materiału modyfikowanego genetycznie, ponieważ nie było takiej możliwości. e) Wnioski z poprzedniego wprowadzenia Prowadzenie badań laboratoryjnych na materiale polowym pozwoliło na faktyczne określenie funkcji wybranych genów we współzależności ze zmiennymi warunkami środowiska. Ponadto, uzyskane wyniki wskazują na pewne podobieństwa pomiędzy funkcją wybranych genów w drzewach (Populus trichocarpa) i roślinach zielnych (Arabidopsis thaliana). Wyniki przeprowadzonych analiz mogą posłużyć celom aplikacyjnym, np. produkcji drewna, papieru i bioetanolu. Na podstawie prowadzonych w trakcie uwolnienia badań przygotowane i wysłane do publikacji zostały dwa manuskrypty, a kolejne są w przygotowaniu. f) Rezultaty wprowadzenia związane z ryzykiem dla zdrowia ludzi i środowiska Strona 24 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Nie dotyczy g) Wnioski dotyczące kumulatywnego wpływu na zdrowie ludzi i środowisko Nie dotyczy Strona 25 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Komentarze 11. KOMENTARZE I UWAGI DODATKOWE, INNE INFORMACJE, UZNANE PRZEZ UZYTKOWNIKA ZA WAŻNE DLA ZACHOWANIA BEZPIECZEŃSTWA Komentarze i uwagi dodatkowe Brak Strona 26 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Załączniki 12. ZAŁĄCZNIKI 1) Ocena zagrożenia przygotowana dla uwalnianych organizmów genetycznie zmodyfikowanych 02-13_2014_wniosek.docx 2) Dokumentacja związana z opracowaniem oceny zagrożenia wraz ze wskazaniem metod przeprowadzenia tej oceny 02-13_2014_ocena.docx 3) Techniczna dokumentacja zamierzonego uwolnienia 02-13_2014_dok_techniczna.docx 4) Program działania w przypadku zagrożenia dla zdrowia ludzi lub dla środowiska związanego z zamierzonym uwolnieniem 02-13_2014_awaria.docx 5) Mapa wektora 02-13_2014_wektor.docx 6) Plany pól doświadczalnych 02-13_2014_Plan_pola.jpg 7) Streszczenie wniosku brak DOKUMENTY DODAWANE PRZEZ PRACOWNIKA MINISTERSTWA ŚRODOWISKA Nazwa załącznika Decyzja Załącznik 02-13_2014_decyzja.pdf Nazwa załącznika Uchwała Komisji ds. GMO Załącznik uchwaly_IVN_2014.doc Strona 27 z 28 Zamierzone uwolnienie GMO Strona 28 z 28