Nr wniosku: 166866, nr raportu: 14940. Kierownik (z rap.): dr hab. Janina Skipor Zakażenia bakteryjne i wirusowe oraz związane z nimi stany zapalne są przyczyną obniżenia produkcyjności zwierząt gospodarskich. Stanowią częstą przyczynę zaburzeń rozrodu u wielu gatunków zwierząt i w związku z tym przynoszą znaczne straty ekonomiczne. U samic obszar podwzgórza w mózgu jest głównym miejscem hamowania procesów rozrodu w wyniku stanów zapalnych, a cytokiny prozapalne wydają się odgrywać w tym procesie istotną rolę. Mechanizmy, poprzez które stany zapalne (stres immunologiczny) toczące się na obwodzie stymulują odpowiedz immunologiczną w mózgu nie są dobrze poznane. Splot naczyniówkowy komór mózgu odgrywa ważną rolę w komunikacji między układem immunologicznym a mózgiem. W splocie zlokalizowana jest bariera krew-płyn mózgowo-rdzeniowy (płyn m-r) regulująca stopień docierania substancji do mózgu. Splot jest również głównym miejscem produkcji płynu m-r. Splot naczyniówkowy, otoczony płynem m-r, pozostaje pod wpływem wysokiego stężenia melatoniny (biochemicznego sygnału informującego organizm o zmieniającej się długości dnia) wydzielanej z szyszynki bezpośrednio do płynu m-r i krwi. Mając na uwadze fakt, że funkcje układu immunologicznego są modulowane długością dnia, postawiono hipotezę zakładającą, że melatonina moduluje działanie stresu immunologicznego na splot naczyniówkowy i tym samym wpływa na komunikację między układem immunologicznym i mózgiem. Celem naukowym projektu było poznanie wpływu melatoniny na kolejne etapy odpowiedzi splotu naczyniówkowego owiec na stres immunologiczny wywołany toksyną bakteryjną (lipopolisacharyd - LPS) W ramach badań projektu wykazano, że w splocie naczyniówkowym u owiec ma miejsce ekspresja genów kodujących receptory rozpoznające wzorce patogenów, charakterystyczne dla wirusów, bakterii i grzybów. Wykazano, że melatonina nie wpływa na poziom ekspresji genów kodujących białka receptora LPS w splocie oraz na stężenie białka wiążącego LPS w krwi w warunkach fizjologicznych i w warunkach stresu immunologicznego. Tym samym nie zaburza potencjału splotu do odpowiedzi na działanie LPS. Wykazano, że na skutek stymulacji receptora LPS dochodzi do indukcji ekspresji genów cytokin prozapalnych i ich receptorów w splocie. Jest to szczególnie istotne dla wyjaśnienia mechanizmów odpowiedzialnych za przechodzenie cytokin przez barierę krewpłyn m-r. Wykazano, że melatonina obniża ekspresję genu jednej z cytokin – interleukiny 6, ale nie wpływa na ekspresję pozostałych cytokin (interleukiny 1beta – IL1 i czynnika martwicy nowotworu alfa - TNF ) odgrywających istotną rolę w mechanizmie zaburzeń rozrodu u owiec. Wyniki te są istotne dla badań wyjaśniających mechanizm zaburzeń procesów rozrodu na poziomie podwzgórza u zwierząt gospodarskich. Określono również poziom ekspresji enzymów oraz ich inhibitorów odpowiedzialnych za stan substancji międzykomórkowej i stabilność połączeń ścisłych między komórkami posiadającymi właściwości bariery oraz określono ekspresje białek połączeń ścisłych odpowiedzialnych za przepuszczalność bariery krew-płyn m-r. Wykazano, że melatonina nie wpływa na stężenie IL-1 w płynie m-r oraz na przepuszczalność bariery krew-płyn m-r w początkowym etapie stanu zapalnego. Wyniki badań projektu przyczyniają się do pogłębienia wiedzy w dziedzinie nauk o zwierzętach hodowlanych. W naszej szerokości geograficznej cykl rozrodczy owiec i kóz przebiega sezonowo, co sprawia, że podaż surowców pozyskiwanych od tych zwierząt, głównie mleka i mięsa, zmienia się wraz z porami roku. Jedną z metod spełniających wymagania rolnictwa zachowawczego i pozwalającą na sterowanie rozrodem owiec i kóz jest regulacja sezonowości rozrodu za pomocą manipulacji długością dnia i wykorzystania melatoniny o przedłużonym uwalnianiu. Wyniki badań projektu wykazały, że w warunkach fizjologicznych melatonina stosowana w hodowli owiec nie zaburza funkcji splotu naczyniówkowego. Wszystkie uzyskane wyniki przyczyniły się do lepszego poznania stosowanego u zwierząt gospodarskich modelu do badań centralnych mechanizmów regulacji procesów rozrodu, który jest wykorzystywany przez naukowców w Polsce, jak również za granicą.