in cytotox nr czerwień neutralna zastosowania zasada ocena

IN CYTOTOX
NR
CZERWIEŃ NEUTRALNA
ZASTOSOWANIA
Test kolorymetryczny do obliczenia przepuszczalności błony i aktywności lizosomalnej
komórek w odpowiedzi na związki farmaceutyczne, chemiczne i środowiskowe oraz
substancje odżywcze.
ZASADA
Procedura
z
zastosowaniem
czerwieni
neutralnej
(NR)
to
test
oceny
przeżywalności/żywotności komórek oparty na zdolności żywych komórek do przyłączania i
wiązania czerwieni neutralnej w obrębie lizosomów. Ogólnie rzecz biorąc, jest
przeprowadzany na komórkach przylegających. NR to słaby barwnik kationowy, który szybko
przenika przez błonę komórkową i ulega nagromadzeniu wewnątrz komórki, w lizosomach
(pH lizosomów < pH cytoplazmy), w których wiąże się miejscami anionowymi do macierzy
lizosomalnej (G. Griffon i wsp. 1995).
Zmiany powierzchni komórki lub wrażliwej błony lizosomalnej prowadzą do kruchości
lizosomów i innych zmian, które powoli stają się nieodwracalne. Takie zmiany wywołane
działaniem ksenobiotyków powodują zmniejszony wychwyt i wiązanie NR. Tym samym
można odróżnić komórkę żywą, uszkodzoną lub martwą – i jest to podstawa tego testu.
Ilość barwnika wiązanego w komórkach jest mierzona spektrofotometrycznie przy długości
fali 540 nm i jest wprost proporcjonalna do liczby komórek z nienaruszoną błoną.
Test można stosować do oceny cytotoksyczności, określając wartość IC50 (stężenie
hamujące 50%).
OCENA PARAMETRÓW BIOLOGICZNYCH
•
•
•
IC50 (stężenie hamujące 50%)
Przepuszczalność błony
Aktywność lizosomalna
Aktywność lizosomalna w komórkach Caco-2, oceniona po
24-godzinnym wzroście w teście UNR
TIGRET Sp. z o.o., ul. Warszawska 27, 02-495 Warszawa
Tel.: 0-22 8670528, Fax: 0-22 8670530
www.tigret.eu
[email protected]
SPECYFIKACJA TECHNICZNA
Absorbancja:
540 nm + 690 nm (filtr referencyjny)
Czas oznaczenia:
3 h 40 minut
Dostępne konfiguracje testu:
- Tylko odczynniki
- Odczynniki i 96-dołkowe mikropłytki,
sterylne zbiorniczki na odczynniki
Składniki zestawu:
- Roztwór myjący
- Roztwór znakujący
- Roztwór wiążący
- Roztwór rozpuszczający
- Instrukcja dla użytkownika
ZAMAWIANIE
NR KATALOGOWY
KRN96.300
KRN96.1200
LICZBA TESTÓW W ZESTAWIE
300
1200
Zestawy z płytkami i zbiorniczkami są także dostępne.
Zamówienia na inne ilości testów w zestawie są kalkulowane indywidualnie.
Wersja 1.5 01/2007
_____________________________________________
Producent:
XENOMETRIX
Gewerbestrasse 25
CH-4123 Allschwill
Switzerland
Tel.: +41 61 4821434
Fax: +41 61 4822072
e-mail: [email protected]
www.xenometrix.ch
Dystrybucja:
TIGRET Sp. z o.o.
Ul. Warszawska 27
02-495 Warszawa, Polska
Tel. 0-22 8670528
Fax: 0-22 8670530
e-mail: [email protected]
www.tigret.eu