Wykorzystanie entomopatogenicznych nicieni w ochronie roślin – historia badań Marek Tomalak Zakład Biologicznych Metod Instytut Ochrony Roślin Państwowy instytut Badawczy Poznań Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Główne kierunki badań i stosowania POZNAŃ 1976 1976-1984 1984 - Nicienie pasożytnicze i towarzyszące kornikom 1988-nadal - Genetyczne doskonalenie szczepów nicieni owadobójczych z rodzajów Steinernema i Heterorhabditis w celu zwiększenia ich skuteczności w zwalczaniu glebowych stadiów rozwojowych wybranych szkodników roślin ocena zmienności genetycznej w naturalnych populacjach, h b d hybrydyzacja j wewnątrzgatunkowa, t t k selekcja, l k j mutageneza t rekombinacja (klasyczna) 1994-2010 – p produkcja j Steinernema feltiae ((selekcjonowany j y szczep p ScP)) (Owinema), Owiplant, Owińska 1998- nadal - Analiza zagrożenia drzew i krzewów miejskich ze strony najważniejszych szkodników owadzich oraz ocena przydatności nicieni owadobójczych w ich zwalczaniu Zachodniopomorski p Uniwersytet y Technologiczny g y ((AR), ), Szczecin KUL, Lublin IBL, Stary Sękocin ….. Główne kierunki badań i stosowania 1976-1984 - Nicienie pasożytnicze i towarzyszące kornikom Instytut y Ochrony y Lasu Akademia Rolnicza,, Poznań Początek: Instytut Ekologii – Dziekanów Leśny Dr. S. Stanuszek – pierwsze, 5-dniowe szkolenie w zakresie: - up uprawy a y irysów ysó (hybrydów ( yb ydó amerykańskich), a e y a s c ), tu tulipanów pa ó i irysów ysó - nematologii (w przerwach) Projekt: Organizmy patogeniczne i towarzyszące cetyńcom ((Tomicus p piniperda p i T. minor)) w Polsce (p (prof. J. Michalski)) Potem …. Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Nicienie – Naturalne pasożyty korników Cryptaphelenchus C h l h spp. Aphelenchoides spp. Sulphutretylenchus spp. Parasitylenchus spp. Parasitorhabditis spp. Nicienie p pasożytnicze y i towarzyszące y ą kornikom Tomalak, T l k M., M Michalski, Mi h l ki J J., G Grocholski, h l ki J J. 1984 1984. The Th influence i fl off nematodes d on the h structure off genitalia of Tomicus poiniperda (Coleoptera: Scolytidae). Journal of Invertebrate Pathology, 43: 358-362. Tomalak, M., Welch, H.E., Galloway, T.D. 1988. Interaction of parasitic nematode Parasitorhabditis oldhami (Nematoda: ( Aphelenchoididae)) and a bacterium in Dutch Elm Disease vector, Hylurgopinus rufipes (Coleoptera: Scolytidae). Journal of Invertebrate Pathology, 52: 301-308. Tomalak, M., Welch, H.E., Galloway, T.D. 1989. Nematode parasites of bark beetles (Scolytidae) in southern Manitoba, with description of three species of Sulphuretylenchus Rűhm (Nematoda: Allantonematidae). Canadian Journal of Zoology, 67: 2497-2505. Tomalak, M., Welch, H.E., Galloway, T.D. 1989. Parasitism of Parasitorhabditis obtusa and P. autographi (Nematoda: Rhabditidae) in the digestive tract of their bark beetle (Coleoptera: Scolytidae) hosts. Journal of Invertebrate Pathoogy, 53: 57-63. Tomalak, M., Welch, H.E., Galloway, T.D. 1989. Pathology of Aphelenchoides pityokteini (Nematoda: Aphelenchoidae) in the Malpighian tubules of Pityokteines sparsus (Coleoptera Scolytidae). Journal of Invertebrate Pathology, 53: 140-141. Tomalak, M., Welch, H.E., Galloway, T.D. 1989. Effects of crowding on Sulphuretylenchus spp. (Nematoda: Allantonematidae) in the haemocoel of their bark beetle hosts (Coleoptera: Scolytidae). Canadian Entomologist. 121(9): 821-822. Tomalak, M Tomalak M., Welch Welch, H H.E., E Galloway Galloway, T T.D. D 1990 1990. Pathogenicity of Allantonematidae (Nematoda) infecting bark beetles (Coleoptera: Scolytidae) in Manitoba. Canadian Journal of Zoology, 68: 89-100. Główne kierunki badań i stosowania 1988-2005 988 005 - Ge Genetyczne etyc e dos doskonalenie o ae es szczepów c epó nicieni ce owadobójczych z rodzajów Steinernema i Heterorhabditis w celu zwiększenia ich skuteczności w zwalczaniu glebowych stadiów rozwojowych j y wybranych y y szkodników roślin ocena zmienności genetycznej w naturalnych populacjach, hybrydyzacja wewnątrzgatunkowa i selekcja: • Zwalczanie muchówek ziemiórkowatych (Diptera: Sciaridae) w uprawach szklarniowych i pieczarkarniach • Zwalczanie wciornastka zachodniego (Franlkiniella occidentalis) w uprawach szklarniowych • Zwalczanie pędraków chrabąszczy (Melolontha melolontha i Amphimallon solstitiale) w uprawach polowych i leśnych • Zwalczanie Z l i opuchlaka hl k ttruskawkowca k k (Oti (Otiorhynchus h h sulcatus) l t )w kontenerowych uprawach drzew ozdobnych 1994-2001 – p produkcja j Steinernema feltiae ((selekcjonowany j y szczep ScP) - (Owinema), Owiplant, Owińska Zwalczanie ziemiórek Lycoriella spp, Bradysia spp. w mnożarkach roślin ozdobnych i warzywnych oraz w uprawach grzybów jadalnych Larwyy ziemiórki Lycoriella ingenua opanowane przez Steinernema feltiae Po 48 godzinach Larwyy ziemiórki Lycoriella ingenua opanowane przez Steinernema feltiae Po 5 dniach Po 7 dniach Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Boczniak ostrygowaty yg y Pleurotus ostreatus Heterorhabditis megidis Steinernema feltiae Wciornastek zachodni Frankliniella occidentalis Steinernema feltiae Stosowanie doglebowe - przedpoczwarki - poczwarki - młode imagines Stosowanie nalistne ??? Tomalak, M. 1994 1994.. Genetic improvement of Steinernema feltiae for integrated control of the Western Flower Thrips, Frankliniella occidentalis.. Microbial Control of Pests (Ed occidentalis (Ed.. P.H. Smits). Smits). IOBC/WPRS Bulletin Bulletin,, 17 17((3): 1717-20 20.. Chrabąszczowate N Najważniejsze j ż i j gatunki t ki A A. Melolontha melolontha B. Amphimallon solstitiale C. Phylloperta horticola B C Chrabąszczowate N Najważniejsze j ż i j gatunki t ki A A. Melolontha melolontha B. Amphimallon solstitiale C. Phylloperta horticola B C Amphimallon solstitiale Przetchlinki ę Pędrak L3 Poczwarka Guniak czerwczyk y Amphimallon solstitiale Przetchlinki Steienrnema arenarium Pędrak Poczwarka Opuchlak p truskawkowiec Otiorhynchus sulcatus Heterorhabditis megidis / bacteriophora Steinernema feltiae Główne kierunki badań i stosowania 1992-2012 99 0 - Ge Genetyczne etyc e dos doskonalenie o ae es szczepów c epó nicieni ce owadobójczych z rodzajów Steinernema i Heterorhabditis w celu zwiększenia ich skuteczności w zwalczaniu glebowych stadiów rozwojowych j y wybranych y y szkodników roślin Mutageneza i rekombinacja: • Indukcja mutacji warunkujących powstawanie nowych fenotypów larw infekcyjnych Steinernema feltiae • Identyfikacja i opis genów zmienianych przez te mutacje – identyfikacja pierwszych genów kontrolujących morfogenezę i aktywność larw infekcyjnych S. feltiae. • Analiza związków funkcjonalnych pomiędzy indywidualnymi cechami morfologicznymi i anatomicznymi larw infekcyjnych oraz ich aktywnością ruchową i infekcyjnością w stosunku do owadów gospodarzy • Konstrukcja mutantów wielokrotnych na drodze rekombinacji genetycznej oraz ocena wpływu tak uzyskanych rekombinacji na fenotyp larw infekcyjnych nicienia S. feltiae. • Analiza przydatności mutagenezy i rekombinacji genetycznej mutantów dla konstrukcji genetycznie ulepszonych szczepów nicieni owadobójczych Mutanty Steinernema feltiae Sfdpy-1(pn34) ScP (w-t) Sfvab-1(pn12) Sflon-1(pn49) Mutanty y Steinernema feltiae A - w-t B - Sfdpy-1(pn11) C - Sfvab-2(pn1) Sfvab 2(pn1) D - Sfseg-1(pn12) E - Sfdpy-1(pn33) (p ) F - Sfvab-1(pn32) G - Sfseg-1(pn12) H - Sfdpy-1(pn33) I - Sfvab-1(pn32) J - w-t K - Sfdpy-1(pn11) L - Sfdpy-2(pn35) M - Sfseg-1(pn12) ( ) N - Sfvab-1(pn32) (Tomalak, 1994;1997; 1998) Mutanty y Steinernema feltiae A - w-t B - Sfunc-1(pn15) C - Sfvab-2(pn1) D - Sfdpy-1(pn7) E - Sfdpy-1(pn31) F - Sfdpy-1(pn11) Sfdpy 1(pn11) G - Sfdpy-1(pn29) H - Sfdpy-1(pn29) g(p ) I - Sfdseg(pn12) M - w-t N - Sfdpy-1(pn31) (Tomalak & Mracek, 1998) Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Steinernema feltiae – mutanty Roller Sfrol -1(pn16; pn36) ScP pn36 pn36 ScP pn36 ScP Aktywność y ruchowa mutantów / p podwójnych j y mutantów Steinernema feltiae pn36 Roller Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań pn15pn36 Roller/Twitcher pn15 Twitcher Mutanty uta ty Ste Steinernema e e a feltiae e t ae 80 % infected B.paupera 70 %infecting nematodes 60 50 40 30 20 10 Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań pn 12 p pn n1 12 3 p pn n3 13 6 p pn n3 13 5 p pn n1 13 6 p pn n3 15 6 p pn n1 15 6 pn 36 0 Sc P pn 12 pn 35 pn 13 pn 15 pn 16 pn 36 % infec cted insects % infectin ng nematodes s Sfrol-1(pn16;pn36) Sfunc-1(pn13; pn15); Sfseg-1(pn12); Sfdpy-2(pn35) Infekcyjność mutantów i podwójnych mutantów Steinernema feltiae w stosunku do larw Bradysia paupera w torfie. torfie (Doświadczenie (D ś i d i laboratoryjne: l b t j płytki ł tki multi-well lti ll 3,5 x 2cm; 100 IJ/komorę; 10 larwe/komorę; 24 godz., 20oC) Steinernema feltiae – mutanty Long Sflon-1(pn49) pn49 ScP ScP pn49 ScP pn49 Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Wymiary ciała larw infekcyjnych e cyj yc Steinernema feltiae (ScP i pn49), S. glaseri, i S. arenarium n=50 1. Długość ScP S. glaseri* S. arenarium** 825 (660-920) 1181 (970-1380) 1130 (864-1448) 28 (24-30) (24 30) 33 (31-38) (31 38) 43 (31-50) (31 50) 46 (28-77) (28 77) 3. Główa do 58 (53-63) otworu wydalniczego 76 (66-85) 102 (87-110) 83 (76-86) 4. Głowa do 91 (85-98) pierścienia nerwowego 122 (103-143) 120 (112-126) 109 (100-120) 5. Głowa do 139 (128-150) podstawy gardzieli 194 (178-220) 162 (258-168) 138 (123-160) 6. Długość ogona 78 (60-88) 104 (85-125) 78 (62-87) 75 (64-84) a (1/2) 30 (24-31) 35 (31-40) 29 (26-35) 26 (17-34) 7.6 (5.9-10.8) 2 Szerokość 2. b (1/5) 5.9 (4.9-6.6) 6.1 (5.3-6.6) 7.3 (6.3-7.8) c (1/6) 10.6 (10.5-11.6) 11.4 (10.0-13.0) 14.7 (13.6-15.7) 1034 (724-1408) 13.8 (9.4-16.9) d (3/6) 0.41 (0.39-0.43) 0.39 (0.35-0.42) 0.65 (0.58-0.71) 0.55 (0.52-0.59) e (2/6) 0.74 (0.68-0.90) 0.73 (0.64-0.82) 1.31 (1.22-1.38) 1.19 (1.06-1.30) ---------------------------------------------* Poinar, 1986 Kozodoi. 1988 ** Poinar & Kozodoi Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań pn49 100 IJs Podwójne j mutanty y Steinernema feltiae z udziałem mutacji pn49 (Sflon-1) 2 cm 10 cm 20 cm pn34 pn12 pn12pn49 ScP pn49 pn34pn49 Infekcyjność mutantów i rekombinantów 70 pn12 60 pn49 50 pn12pn49 40 30 * 20 * 10 0 2 cm 10 cm Percent infecting nem matodes +S.E. Percent infecting nem matodes +S.E. Steinernema feltiae na różnych głębokościach w glebie 70 pn16 60 pn49 50 * 40 30 20 10 * 0 20 cm 2 cm 70 pn35 pn49 50 pn35pn49 40 30 * 20 10 0 2 cm 10 cm Soil depth [cm ] Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań 10 cm 20 cm Soil depth [cm ] 20 cm Perce ent infecting nematode es +S.E. Perce ent infecting nematode es +S.E. Soil depth [cm ] 60 pn16pn49 70 pn34 60 pn49 50 * 40 pn34pn49 30 20 * 10 0 2 cm 10 cm 20 cm Soil depth [cm ] (Doświadczenie laboratoryjne: kolumny gleby; 3 gąsienice G. G mellonella w siatkach na głębokości 2, 10 lub 20 cm; 100 IJs na powierzchni; ekspozycja: 3 dni) Genetyczne doskonalenie szczepów nicieni owadobójczych z rodzajów Steinernema i Heterorhabditis w celu zwiększenia i h skuteczności ich k t ś i w zwalczaniu l i glebowych l b h stadiów t dió rozwojowych wybranych szkodników roślin Tomalak, M Tomalak M., Lipa Lipa, J J.J. J 1991 1991. Factors affecting entomophilic activity of Neoaplectana feltiae in mushroom compost. Entomologia Experimentalis et Applicata, 59:105-110. Grewal, P.S., Tomalak, M., Keil C.B.O., Gaugler, R. 1993. Evaluation of a genetically selected strain of Steinernema feltiae against the mushroom sciarid Lycoriella mali. Annals of Applied Biology, Biology 123: 695 695-702. 702 Tomalak, M. 1994. Selective breeding of Steinernema feltiae (Filipjev) (Nematoda: Steinernematidae) for improved efficacy in control of a mushroom fly, Lycoriella solani Winnertz (Diptera: Sciaridae). Biocontrol Science and Technology, 4: 187-198. Tomalak, M. 1994. Phenotypic and genetic characterization of dumpy infective juvenile mutant in Steinernema feltiae (Rhabditida: Steinernematidae). Fundamental and Applied Nematology, 17: 485-495. Selvan S., Selvan, S Grewal, Grewal S.P., S P Gaugler, Gaugler R R., Tomalak Tomalak, M. M 1994. 1994 Evaluation of steinernematid nematodes against Popillia japonica (Coleoptera: Scarabeidae) larvae: Species, strains, and rinse after application. Journal of Economic Entomology, 87: 605-609. Tomalak, M. 1995. Biocontrol potential of new, genetically altered strains of an entomopathogenic nematode, nematode Steinernema feltiae. feltiae European Journal of Plant Pathology, 620. Tomalak, M. 1997. New morphological variants of infective juveniles associated with mutations in four sex-linked genes of Steinernema feltiae (Filipjev) (Nematoda: Steinernematidae) Fundamental and Applied Nematology, Steinernematidae). Nematology 20: 541-550 541-550. Tomalak, M., Mracek, Z. 1998. Scanning electron microscope study on morphological modifications of lateral fields in infective juveniles of mutant Steinernema feltiae (Filipjev) (Nematoda: Steinernematidae). Fundamental and Applied Nematology, 21: 8994 Główne kierunki badań i stosowania 1998 998 - nadal ada - Analiza a a zagrożenia ag o e a drzew d e i krzewów e ó miejskich ejs c ze strony najważniejszych szkodników owadzich oraz ocena przydatności nicieni owadobójczych w ich zwalczaniu Id Identyfikacja t fik j najważniejszych j ż i j h szkodników k d ikó zasiedlających i dl j h drzewa d i krzewy na terenach zieleni miejskiej - Ocena skuteczności nicieni owadobójczych w ograniczaniu ich populacji w czasie przepoczwarczania i zimowania w glebie • Piędziki (Operophtera brumata, O. fagata) • Stonki nalistne (Altica quercetorum, Agelastica alni, Phytodecta quinquepunctata, q q p , Phyllodecta y laticollis)) • Błonkówki – rośliniarki (Arge spp., Caliroa spp., Pristiphora spp., Hemichroa crocea, Blennocampa phyllocolpa) Rozszerzenie zakresu stosowania nicieni owadobójczych w zwalczaniu wybranych szkodników drzew i krzewów owocowych • Owocnice (Hoplocampa flava, H. minuta, H. testudinea) • Brzęczak porzeczkowy (Nematus ribesii) Szkodniki drzew miejskich miejskich Miernikowce zimowe Piędzik przedzimek Operophtera brumata Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Ży ywe poczzwarki [% %] Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań 60 40 20 la tro Ko n di s H .m eg i S. fe lti a e 0 Przeżywalność P ż l ść piędzika i d ik przedzimka d i k (Operophtera (O ht brumata) przepoczwarczającego się w glebie traktowanej preparatami zawierającymi nicienie o adobójc e owadobójcze. (**Doświadczenia terenowe, 2003) Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Drzewa i lasy miejskie Szkodnik S k d iki Susówka dębowa ę (Altica quercetorum) Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Drzewa i lasy miejskie Szkodniki Hurmak olchowiec (Agelastica alni) Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Drzewa i lasy miejskie Specyfika szkodników Szubarga pięciokropka (Phytodecta quinquepunctata) Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Drzewa i lasy miejskie Szkodniki Jętrewka długoczułka (Phyllodecta laticollis) Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Stonki nadrzewne (Phytodecta quinquepunctata) Heterorhabditis megidis Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań A.quercetorum A.alni 80 60 40 20 la tro Ko n H .m eg id S. is 0 fe l ti ae Wy ylot chrzą ąszczy [% %] Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Wylot W l stonek k (Altica (Alti quercetorum t i Agelastica A l ti alni) l i) po przepoczwarczeniu w glebie traktowanej preparatami zawierającymi nicienie owadobójcze. (**Doświadczenia terenowe, 2003) Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Błonkówki najczęściej zasiedlające drzewa i krzewy miejskie Błonkówki najczęściej zasiedlające drzewa i krzewy miejskie Cykl rozwojowy rośliniarek atakujących drzewa (np. Caliroa annulipes) - Imagines, jaja, larwy żerujące na drzewach i krzewach - Dorosłe larwy, eonimfy, pronimfy i poczwarki w glebie Rośliniarki jako gospodarze nicieni owadobójczych Procentt uszkodzo onych liśc ci Z l Zwalczanie i drugiego d i pokolenia k l i obnażacza b ż k ś i ó ki kwaśnicówki (Arge berberidis) na berberysie 100 80 60 40 20 0 Maj Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Czerwiec Lipiec Sierpień Wrzesień Heterorhabditis megidis (105 IJ m-2 ) zastosowany na powierzchnię gleby Owocnica żółtoroga (Hoplocampa minuta) minuta) na śliwie nicienie (Heterorhabditis megidis) megidis) Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Analiza zagrożenia drzew i krzewów miejskich ze strony najważniejszych szkodników owadzich oraz ocena przydatności nicieni owadobójczych w ich zwalczaniu Tomalak, M. 2002. Potential new targets for entomopathogenic nematodes in biological control of urban pests. Nematology, 4:199. Tomalak, M. 2003. Biocontrol potential of entomopathogenic nematodes against winter moths (Operophtera brumata and O. fagata) (Lepidoptera: Geometridae) infesting urban trees. Biocontrol Science and Technology 13: 517-527. Tomalak, M. 2004. Infectivity of entomopathogenic nematodes to soil-dwelling developmental stages of tree leaf beetles Altica quercetorum Foudr. and Agelastica alni L. (Coleoptera: Chrysomelidae). Entomologia Experimentalis et Applicata 110: 125-133. Tomalak. M. 2005. Potential of entomopathogenic nematodes for biological control of selected pest insects infesting urban trees. Insect Pathogens and Insect Parasitic Nematodes (Ed. B. Papierok). IOBC/WPRS Bulletin, 28(3): 3-7. • Tomalak, M., Piggott, S., Jagdale, G. 2005. Glasshouse application. W: Nematodes as Biological Control Agents (Eds P.S. Grewal, R-U Ehlers, D.I. Shapiro-Ilan), CABI Publishing, Wellingford, U.K., ISBN 0 85199 0177, 480 pp. • Tello,, M-L.,, Tomalak,, M.,, Siwecki,, R.,, Gaper, p , J.,, Motta,, E.,, Mateo-Sagasta, g , E. 2005. Stresses and Threats: Pests and Diseases of Urban trees in Europe. W: Urban Forests and Trees (Eds C.C. Konijnendijk, K. Nilsson, T.B. Randrup, J. Schipperijn) Springer, ISBN 3-540-25125X, 325-365. Udział w programach COST 1993 - 1995 COST 812 Cold C ld Active A ti St Strains i off Entomopathogenic E t th i Nematodes 1995-2000 COST 819 Entomopathogenic nematodes 2002 - 2006 COST 850 Biocontrol Bi t l Symbioses S bi 2000 - 2002 COST E12 Urban Forests and Urban Trees 2004 - 2008 COST E39 Forests, Trees and Human Health and Wellbeing. Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań Podsumowanie Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań W omawianym okresie nicienie owadobójcze z rodzin Steienrnematidae i Heterorhabditidae były bardzo atrakcyjnym obszarem badań podstawowych i stosowanych W ciągu ostatnich 20 lat nastąpił istotny wzrost praktycznego znaczenia tej grupy organizmów, jako czynników biologicznego zwalczania szkodliwych owadów Polska aktywnie uczestniczyła w tworzeniu strategii praktycznego wykorzystania nicieni owadobójczych w zwalczaniu ziemiórek w uprawach szklarniowych i pieczarki, wciornastka zachodniego w uprawach szklarniowych oraz pędraków chrabąszczy i liściożernych szkodników drzew w glebie. glebie Poprzez szerokie badania z zakresu selekcji i mutagenezy przez wiele lat Polska współtworzyła główny kierunek badań genetycznych w obrębie ę nicieni owadobójczych j y ((zmagania g te chyba y przegraliśmy p g yz Caenorhabditis elegans) W Europie byliśmy jednym z pierwszych krajów produkujących nicienie owadobójcze w formie preparatu handlowego (Owinema) Udział w europejskich programach COST okazał się bardzo stymulujący dla badań nad nicieniami owadobójczymi w Polsce Dziękuję za uwagę Instytut Ochrony Roślin Państwowy Instytut Badawczy Poznań