1 Grant MNiSW 0751/B/P01/2009/37 ,,Badania pośmiertne w

Grant MNiSW 0751/B/P01/2009/37
,,Badania pośmiertne w chorobach mitochondrialnych, w tym ocena czynności
mitochondriów w hodowli fibroblastów. Opracowanie standardu postępowania
w podejrzeniu choroby mitochondrialnej jako przyczyny niewyjaśnionego
zgonu u dziecka”
Kierownik projektu: doc dr hab. n. med. Maciej Pronicki
Obecnie
wiadomo, Ŝe choroby mitochondrialne naleŜą do najczęściej
występujących chorób genetycznych (>1:3500 urodzeń), takŜe w kraju. Wyjaśnienie
molekularnego tła defektu jest niezbędne dla potrzeb porady genetycznej w kaŜdym
przypadku, ze względu na występowanie wszystkich moŜliwych sposobów
dziedziczenia.
Szybki i niepomyślny przebieg choroby (zwłaszcza u małych dzieci) oraz brak
niezawodnych markerów biochemicznych powoduje, Ŝe zwykle zawodzi proces
przyŜyciowej identyfikacji przyczyny choroby. Rutynowe badanie pośmiertne (nawet
jeŜeli wykonane) ma w większości przypadków ograniczoną przydatność.
Kontynuowanie badań po śmierci probanda jest moŜliwe, ale wymaga dostępności
materiału tkankowego. Zabezpieczanie zamroŜonych wycinków tkanek, próbki DNA
czy hodowli fibroblastów nie mieści się jednak w obecnych standardach
postępowania.
Praktycznym
celem pracy jest weryfikacja przydatności w badaniu pośmiertnym
dostępnych metod oceny patologii mitochondriów (histochemia, immunohistochemia,
proteomika, spektrofotometria, analiza DNA) oraz przygotowanie ogólnopolskich
standardów dotyczących zasad i warunków właściwego zabezpieczania wycinków
tkanek (mięsień, serce, wątroba, mózg) w czasie sekcji oraz ich transportu do
pracowni medycyny mitochondrialnej.
Drugim celem są badania w Instytucie im. M. Nenckiego nad wykorzystaniem
hodowli fibroblastów (dostępnych w badaniach pośmiertnych) do lokalizacji defektu.
Zbadany
zostanie
potencjał
na
wewnętrznej
błonie
mitochondrialnej,
wewnątrzkomórkowy poziom jonów wapnia, produkcja wolnych rodników oraz
poziom ATP w niezmienionych mitochondriach. Przewidziano takŜe próbę
farmakologicznej modyfikacji zaburzeń.
Do badań wykorzystany zostanie materiał zabezpieczony prospektywnie w czasie
sekcji około 60-80 pacjentów. Hodowle fibroblastów pochodzić będą z banku tkanek
(40 linii, materiał retrospektywny).
Wynikiem
projektu będzie zaproponowanie własnego standardu badania
pośmiertnego w kierunku chorób mitochondrialnych, a takŜe ocena przydatności
fibroblastów ludzkich w badaniach nad patologią mitochondriów i ewentualnie
korekcją defektu.
W projekcie przewidziano dwa przewody doktorskie.
1
2