Zadanie domowe Nr 4 termin do 21 września 2012 r. Zapoznać się dokładnie z poniższym tekstem (kilka razy przeczytać) a następnie w programie Edokacj@-testy maturalne wykonać zadania z działu „genetyka” o numerach: 5, 9, 21, 27, 84, 107, 129, 146. W piątek wieczorem sprawdzić, czy nie ma nowego zadania domowego :) *************************************************************************** Replikacja DNA Replikacja to proces kopiowania informacji genetycznej. W wyniku replikacji z jednej cząsteczki DNA powstają dwie identyczne cząsteczki DNA. Znaczenie procesu replikacji dla rosnącego organizmu jest takie, że dzięki replikacji każda nowo powstająca komórka otrzymuje komplet informacji genetycznej. Proces replikacji dokonuje się za pomocą enzymu replikazy. Inna nazwa replikazy to polimeraza DNA zależna od DNA. Replikaza jest dużym kompleksem enzymatycznym złożonym w wielu różnych enzymów (tropoizomeraza, helikaza, primaza i dwa rodzaje polimeraz). Replikacja rozpoczyna się od przyłączenia replikazy do cząsteczki DNA w charakterystycznym miejscu o specjalnej sekwencji nukleotydów. Taką sekwencję nazywamy miejscem inicjacji replikacji. W genomach prokariotycznych takie miejsce jest jedno lub co najwyżej kilka. W komórkach eukariotycznych każda cząsteczka DNA ma kilka tysięcy takich miejsc. Tak więc u eukariontów replikacja rozpoczyna się w bardzo wielu miejscach na raz. Polimeraza najpierw rozplata podwójną helisę DNA (enzym tropoizomeraza). Następnie rozrywa wiązania wodorowe pomiędzy nićmi na długości około 100 par nukleotydów (enzym helikaza). Do każdej z tak oddzielonych nici DNA natychmiast dołączane są białka stabilizujące, co zapobiega powtórnemu sklejeniu się obu nici z powrotem. Replikaza ma dwie ważne właściwości. Po pierwsze, potrafi tylko dobudowywać kolejne nukleotydy do już istniejącego fragmentu nici. Po drugie zaś, może ona dołączać nowe nukleotydy tylko do węgla nr. 3 deoksyrybozy poprzedniego nukleotydu. Z tego powodu zawsze przesuwa się po nowo tworzonej nici DNA w kierunku od końca 5’ do końca 3’ Aby więc replikaza mogła wstawić pierwszy nukleotyd, po rozdzieleniu nici DNA do każdej z nich jest dołączany jednoniciowy fragment RNA nazywany starterem albo primerem (enzym primaza). Ten starter ma już koniec 3’ do którego replikaza może przyłączyć pierwszy nukleotyd, a do niego kolejny itd. - zawsze do węgla nr. 3 poprzedniej deoksyrybozy. Pamiętamy, że obie nici DNA są przeciwnie zorientowane w przestrzeni, czyli antyrównoległe lub inaczej przeciwbieżne. Dlatego też, jeżeli na jednej nici patrząc na schemacie od dołu mamy koniec 3’, to na nici komplementarnej mamy koniec 5’, a do niego polimeraza nie potrafi dołączać kolejnych nukleotydów. Dlatego też jedna z nici zorientowana w kierunku od 3’ do 5’ do której będzie dobudowana nowa nić w kierunku od 5’ do 3’ – czyli zgodnym z kierunkiem przesuwania się replikazy - będzie kopiowana normalnie w sposób ciągły, zgodnie z kierunkiem przesuwania się replikazy i ta nić będzie nazywana nicią wiodącą. Ale do drugiej nici, która ma kierunek od 5’ do 3’ będzie dobudowana nowa nić, która będzie mieć orientację przeciwną, a wiec od 3’ do 5’. Tak polimeraza działać nie może. Aby obejść ten problem, polimeraza na tej nici cofa się wstecz i dobudowuje krótkie fragmenty w kierunku przeciwnym, do kierunku przesuwania się. Te fragmenty zostały nazwane fragmentami Okazaki od nazwiska odkrywcy tego procesu. Oczywiście każdy fragment Okazaki musi mieć swój starter. Po utworzeniu fragmentów startery są wycinane a same fragmenty Okazaki są sklejane przez enzym ligazę (ligacja to łączenie). Nić DNA, która jest kopiowana fragmentami Okazaki nazywamy nicią opóźnioną. Samo miejsce rozgałęzienia kopiowanych nici DNA jest nazywane widełkami replikacyjnymi. Replikaza tworzy nową nić DNA dobudowując do kopiowanej nici nukleotydy na zasadzie komplementarności. Do replikacji są niezbędne trifosforany nukleozydów: dATP, dCTP, dTTP, dGTP. Kolejne nukleotydy są ze sobą wiązane za pomocą wiązania fosfodiestrowego. A oto schemat procesu replikacji w widełkach replikacyjnych według powyższego opisu. Jak pewnie zauważyłeś, w każdej nowej cząsteczce DNA jedna z nici pochodzi ze starej, kopiowanej cząsteczki DNA. Tylko druga zostaje utworzona na nowo. Taki sposób kopiowania DNA nosi nazwę replikacji semikonserwatywnej – czyli półzachowawczej. Mechanizm replikacji semikonserwatywnej polega na tym, że w wyniku replikacji z każdej cząsteczki DNA powstają dwie identyczne cząsteczki DNA, w których jedna z nici jest stara a druga nowo dobudowana. Replikacja jest procesem bardzo dokładnym. Pomyłki się zdarzają, jednak bardzo rzadko – mniej więcej raz na 100 milionów do raz na miliard par nukleotydów. Dzieje się tak dlatego, ze prócz mechanizmu komplementarności, który wymusza wstawianie prawidłowych nukleotydów, replikaza ma wbudowane mechanizmy naprawcze, które po stwierdzeniu błędu, naprawiają go. Takie przypadkowe błędy w kopiowaniu DNA są nazywane mutacjami spontanicznymi.